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Los homogeneizadores de alta presin son los equipos mas ampliamente utilizados para el rompimiento celular a gran escala.
Homogeneizador Manton-Gaulin
Una bomba de pistn de alta presin (1-2 lab, 3-5 ind) Una vlvula
Con una bomba de alimentacin (1-5 bar) se transporta la suspensin a la bomba de alta presin donde es comprimida hasta 600 bar. La vlvula se abre cuando la presin excede cierto valor. La suspensin es liberada a gran velocidad y choca contra un anillo de impacto.
Mecanismo de desintegracin
En la vlvula las clulas se someten a turbulencia, cavitacin y esfuerzos de corte lquido. La fuerza del choque sobre el anillo es la causa principal del rompimiento. El mtodo de rompimiento no es selectivo. No es efectivo para algunas bacterias Gram-positivas de pared celular muy gruesa.
Parmetros operacionales
Presin: para rompimiento eficiente debe ser superior a 350 bar (aunque depende del producto). Suelen requerirse varios pasos. Diseo de la vlvula: por encima de 200 bar la vlvula de cuchilla libera mayor cantidad de enzima que la plana
Microfluidizador
Dispositivo de contrapresin
La suspensin se divide en dos microcanales que impactan a gran velocidad y se mezclan en una pared estacionaria de la cmara de rompimiento. La energa de entrada se disipa producindose la ruptura celular.
Es muy compacto (30 x 35 cm) Permite mayor enfriamiento Rompimiento celular ms eficiente Permite flujos y volmenes menores Fcil de operar
Parmetros operacionales
Temperatura: permite incrementos de hasta 20 C y tiempos de residencia muy cortos a esas T (0,02 0,04 seg) Tamao de los restos celulares: produce restos de mayor tamao y suspensiones menos viscosas lo que facilita la separacin Concentracin celular: menores costos al eliminar la concentracin previa o disminuir el grado necesario