Bioqumica heptica
(II) El metabolismo del glucgeno. Glucogenolisis
El hepatocito muestra abundantes grnulos de glucgeno
Ultraestructura de los grnulos de glucgeno
35nm Rosetas de glucgeno Partcula
macromolcula de glucgeno
Estructura de cadenas ramificadas Lado cataltico
1 m
Capa exterior de enzimas implicados en el metabolismo del glucgeno
Lado regulador Glucgeno fosforilasa
Estructura del Glucgeno
CH2 OH H H OH OH H CH2OH H OH H OH O H OH H H O H OH CH2 OH O H OH H H OH H O H H O H CH2OH O H OH H H OH H 1 O CH2 OH O H 2 OH 1 O H H O H 4 OH H H OH H O H CH2 OH O H OH H H OH OH H
glucgeno
6 CH2 5 H OH O 4 3 H H
El glucgeno es un polmero de glucosa unidas por dos tipos de enlaces: w (14) glicosdicos, mayoritariamente w (16) glicosdicos, en las ramificaciones
El glucgeno es una macromolcula de estructura ramificada con ramificaciones ms frecuentes en la zona central que en la perifrica. La molcula de glucgeno tiene un peso molecular 10.000.000
Glicogenina
Extremo reductor (4-OH)
CH 2OH H OH H OH O H OH H H OPO32
glucosa-1-fosfato
El enzima glucgeno fosforilasa cataliza la fosforolisis de los enlaces (14) glicosdicos, liberando glucosa-1-fosfato:
glucgeno (n) + Pi glucgeno
(n1)
+ glucosa-1-fosfato
Hidrolisis : R-O-R' + HOH R-OH + R'-OH Fosforolisis: R-O-R' + HO HO-PO32- R-OH + R'-O-PO32-
La reaccin de fosforolisis catalizada por la glucgeno fosforilasa
Glucgeno (N)
Pi Glucgeno fosforilasa
Glucgeno (N-1)
-D-Glucosa 1-fosfato
El piridoxal fosfato, un derivado de la vitamina B 6, acta de grupo prosttico de la glucgeno fosforilasa
H O P O O + N H CH3
Enz (CH2)4 N+ O P O O + N H CH3 O HC H2 C H O
O C OH
H2 C
El coenzima est anclado al sitio activo del enzima a travs de un enlace de base Schiff l(formado por la condensacin del aldehido y un e-amino de una lisina .
piridoxal fosfato
Enzyme (Lys)-PLP Schiff base
Cmo acta la glucgeno fosforilasa?
Glucgeno fosforilasa
Cmo acta el enzima desramificante?
-1,6/-1,4 transglicosilasa
-1,6 glicosilasa
El enzima desramificante tiene dos centros catalticos independientes, resultante del plegamiento de una nica cadena polipeptdica: w La actividad transferasa permite hidrolizar un trisacrido de glucosa, y transferirlo al extremo de otra [Link] una glucosa unida por un enlace (1 6). w La actividad (1 6) glucosidasa hidroliza el enlace (1 6) y libera glucosa. Es la nica ocasin en la que se libera glucosa del glucgeno. El producto resultante del catabolismo del glucgeno es: glucosa-1-fosfato.
Cmo acta el enzima desramificante?
1-6 glicosilasa
Glucgeno fosforilasa
Lugar de hidrlisis de la -1,6 glucosidasa
Una visin global de la degradacin del glucgeno
Glicogenina
Fosforilasa
Transferasa
-1,6-glucosidasa
Enzyme-Ser-OPO 3 CH 2OH H OH H OH O H OH H H
Enzyme-Ser-OH CH2OPO 3 O H H OH H
2
Enzyme-Ser-OPO 32 CH 2OPO 3 O H H OH H
2
H
2
H OPO3
2
H OH
H OH
OPO3
OH OH
OH
glucosa-1-fosfato
glucosa-6-fosfato
La fosfoglucomutasa cataliza la reaccin reversible: glucosa-1-fosfato glucosa-6-fosfato La serina-OH en el centro activo del enzima es el lugar en el que se fija el Pi. La glucosa-6-fosfato puede entrar en la va glicoltica
Glucgeno
Glucosa Glucokinasa
G-6 -Pasa
Glucosa-1-P
Glucosa-6-P Glicolisis Piruvato
Glucosa + P i
La glucosa-6-fosfatasa, que solo existe en el hgado, cataliza la reaccin: glucosa-6-fosfato + H2 O glucosa + Pi Es clave para la funcin reguladora de la homeostasis de la glucosa que ejerce el hgado. Los dems tejidos carecen de ella
Destino metablico de la glucosa 6-fosfato
Fosfoglucomutasa
-D-Glucosa 1-fosfato
-D-Glucosa 6-fosfato
Glucosa sangunea
Glicolisis (Ciclo Krebs)
La regulacin de la glucogenolisis
Mecanismo dependiente de cAMP (Hgado) Mecanismo dependiente de Ca2+ (Msculo e hgado)
Regulacin de la glucogenolisis
w La glucgenofosforilasa existe bajo dos formas w "a " es la forma activa del enzima, cuya actividad es independiente de reguladores alostricos. En el caso de la glucgeno fosforilasa se trata de la forma fosforilada del enzima. w "b" es una forma mucho menos activa del enzima, pero cuya actividad depende de efectores alostricos (en el caso de la glucgeno fosforilasa, la forma defosforilada .
Covalent modification: Glucagon & epinephrine activate cAMP cascades in liver and in muscle, respectively. Both hormones are produced in response to low blood glucose. Epinephrine is also part of the fight or flight response. The cAMP cascade results in phosphorylation of a serine hydroxyl of Glycogen Phosphorylase, which promotes transition to the active (relaxed) state. The phosphorylated enzyme is less sensitive to allosteric inhibitors . Even if cellular ATP & glucose-6-phosphate are high, Phosphorylase will be active. The glucose-1-phosphate produced from glycogen in liver may be converted to free glucose for release to the blood. With this hormone-activated regulation, the needs of the organism take precedence over needs of the cell.
Hormone (epinephrine or glucagon) via G Protein (G -GTP) Adenylate cyclase (inactive) Adenylate cyclase (active) catalysis ATP cyclic AMP + PPi Activation Phosphodiesterase AMP Protein kinase A (inactive) Protein kinase A (active) ATP ADP Phosphorylase kinase (b-inactive) Phosphatase Pi Phosphorylase kinase (P) (a-active) ATP ADP Phosphorylase (P) (a-active) Pi
cAMP signal cascade
Phosphorylase (b-allosteric) Phosphatase
Effect of cAMP on Glycogen Synthesis
The cAMP cascade induced in liver by glucagon or epinephrine has the opposite effect on glycogen synthesis. Glycogen Synthase is directly phosphorylated by cAMP-Dependent Protein Kinase as well as by Phosphorylase Kinase. Phosphorylation of Glycogen Synthase promotes the "b" (less active ) conformation. The cAMP cascade inhibits glycogen synthesis . Instead of being converted to glycogen, glucose-1-phosphate in liver may be converted to glucose-6-phosphate, and dephosphorylated for release to the blood.
Insulin, produced in response to high blood glucose, triggers a signal cascade that activates Phosphoprotein Phosphatase. This phosphatase catalyzes removal of regulatory phosphate residues from Phosphorylase, Phosphorylase Kinase, & Glycogen Synthase enzymes. Thus insulin antagonizes effects of the cAMP cascade induced by glucagon & epinephrine . Ca++ also regulates glycogen breakdown in muscle. During activation of skeletal muscle, Ca++ is released from stores in the sarcoplasmic reticulum (muscle ER), to activate actin/myosin interactions.
Fosforilasa Quinasa Fosforilasa Quinasa Ca++ P-Fosforilasa Quinasa-Ca++
inactiva parcialmente activa totalmente activa
La Fosforilasa quinasa de msculo, cuya subunidad es la calmodulina , puede activarse va Ca++ adems de la fosforilizacin va la proteinquinasa A dependiente de cAMP. De esta manera se asegura la liberacin de G1P a partir del glucgeno y la entrada en la glicolisis tras isomerizacin a G6P para proveer el necesario ATP para la contraccin muscular.
La doble regulacin de la Glucgeno fosforilasa muscular
Fosforilasa a
Fosforilasa b
Fosforilasa quinasa
Forma R (activa)
Forma T (inactiva)
Fosfoprotena fosfatasa
Forma T
Forma R
Glucosa
La glucgeno fosforilasa de msculo es regulable alostricamente por AMP, ATP, y G6P. El isoenzima heptico es menos sensible a estos controles alostricos. w AMP (que aumenta cuando los niveles de ATP son bajos) activa promoting the relaxed conformation. w ATP & glucose-6-phosphate, which both have binding sites that overlap that of AMP, inhibit Phosphorylase, promoting the tenformation. w Thus glycogen breakdown is inhibited when ATP and glucose-6-phosphate are plentiful.
Sealizacin ligada a canales de Ca 2+ (I)
Ca2+ (10-3M)
10-7 M Ca 2+
Ca2+
La entrada de Ca2+ y su elevacin intracelular activa procesos en la clula
Sealizacin ligada a canales de Ca 2+ (II)
10-7 M Ca 2+
Ca2+ (10-3M)
Ca2+
La salida de Ca2+ de los depsitos intracelulares activa procesos en la clula
Ca2+
( 10 -3 M)
Na+ -driven Ca2+ antiport
Ca2+
Ca2+
Ca2+ -ATPase
Ca2+ ( 10 -7 M)
Na+
CYTOPLASM
(A) Ca2+ -ATPase in endoplasmic reticulum ATP ADP
ATP
ADP
Ca2+ -binding molecules in cytoplasm + P
Active Ca2+ import in mitochondrion
plasma membr ane
Ca2+
Ca2+
Ca 2+
calmodulina
Retculo endoplsmico
CITOPLASMA
(B)
mitocondria
