GLUCLISIS

La gluclisis es un conjunto de reacciones que transforman la glucosa en piruvato. Es una va casi universal. La gluclisis es una va ntegramente citoslica. Se distinguen 3 partes: -Entrada de glucosa de todas las clulas. Sobretodo a msculos e hgado. Es el primer punto de control de la va. -Una vez ha entrado dentro del hepatocito:

Se puede estructurar en 2 etapas: 1. Pasar de Glucosa a Fructosa-1,6-difosfato. 2. Pasar de Fructosa-1,6-difosfato a dihidroxiacetona y gliceraldehido. La primera fase es una fase de alteracin qumica para dejar la molcula til para la clula. Primera fase de la gluclisis 1. La glucosa se fosforila en el alcohol por la hexoquinasa. La hexoquinasa une el fosfato del ATP mediante un enlace fosfoster y la transforma en Glucosa-6-fosfato. La Glucosa-6-P est preparada para los procesos que continan en la gluclisis. La fosforilacin transforma 1 molcula neutra en una molcula cargada negativamente. Hace que ahora, la glucosa-6-P no pueda volver a salir por la membrana debido a su carga negativa. 2. A la clula no le gusta la forma aldosa y hace la forma cetosa (Fructosa-6-P). Es realizado por la fosfoglucosa isomerasa. 3. Implica la adquisicin de un segundo fosfato que va a parar al C1 y forma la fructosa-1,6-bisfosfato. Lo relaiza la fosfofructoquinasa-1 (PFK-1). La fructosa-1,6bisfosfato es completamente simtrica. La PFK-1 es un enzima clave en la gluclisis. 4. La fructosa-1,6-bisfosfato se parte por la mitad y da dos molculas (dihidroxiacetona-fosfato(DHAP) y gliceraldehido-3-fosfato (G3P)). La gluclisis se da a partir del gliceraldehido-3-P. El equilibrio est desplazado hacia la dihidroxiacetona-fosfato. Slo un 5% es Gliceraldehido-3-P. La desaparicin contnua de G3P transforma la DHAP en G3P. Todo acaba siendo G3P. Segunda fase de la gluclisis A partir del G3P comienzan las transformaciones que dan lugar a Piruvato (Pyr) (reacciones de oxidacin). 1. La primera reaccin es que el enzima Gliceraldehido-3-Fosfatodeshidrogenasa oxida el grupo aldehido a cido (gasta un NAD, que se reduce a NADH). Produce un enzima que es capaz de incorporar un fosfato al cido carboxlico correspondiente. Se forma un ster. La fosforilacin a nivel de sustrato se consigue porque hay ATP con un fosfato ya activado. 2. El 1,3-Bisfosfoglicerato cede 1 fosfato para sintetizar ATP. La reaccin la cataliza la fosfogliceratoquinasa. El producto de la sntesis de ATP es el 3-fosfoglicerato. Sufre transformaciones que dan lugar a la sntesis de Pyruvato. El P3 debe pasar a la posicin 2. Se consigue mediante el enzima fosfogliceromutasa. La mutasa tiene un fosfato activo, que se lo da a la posicin 2. En un momento hay dos fosfatos, pero luego, se lo quita de la posicin 3. Todas las mutasas funcionan as. Se hace para liberar el OH en la posicin 3. 3. Se produce la deshidratacin del OH. Se transforma el alcohol en enol, por la enolasa. Es parecido a Pyruvato, pero con enol y un fosfato. Se llama

fosfoenolpiruvato (PEP). Es una molcula muy inestable que se transforma en Pyruvato por la Pyruvatoquinasa y se acopla la energa que se desprende para sintetizar ATP. ANLISIS ESTEQUIOMTRICO DE LA GLUCLISIS Glucosa + 2Pi + 2 ADP + 2 NAD+ 2 Pyr + 2 ATP + 2 NADH + 2 H+ + 2 H2O La gluclisi es una va que transforma la glucosa en Pyruvato y, a su vez, reduce 2 NAD+ del citosol a NADH y usa 2 Adp para formar 2 ATP. La clula en cuanto puede, transforma otros monosacridos a molculas que estn en la va de la gluclisi. Fructosa Se encuentra en el azcar, se metaboliza segn: *0 En el hgado: la fructosa se transforma en fructosa-1-P. Se gasta 1 ATP que pasa a ADP. Lo realiza la fructoquinasa. La fructosa-1-P es degradada por una aldolasa, que da lugar a dihidroxiacetona-P y a gliceraldehido. El gliceraldehido es fosforilado con gasto de ATP a G3P. Se produce el mismo rendimiento que en la glucosa. *1 En el tejido adiposo: la fructosa es fosforilada a fructosa-6-P a partir de la transformacin de ATP a ADP por la hexoquinasa. La hexoquinasa tiene mucha menos afinidad por la fructosa que por la glucosa. Por eso, en el hgado, la hexoquinasa fosforila glucosa. En el tejido adiposo la hexoquinasa (HK) acta sobre la fructosa porque no hay tanta glucosa. Galactosa La galactosa se fosforila en Gal-1-P y se gasta ATP que pasa a ADP. Lo hace la galactoquinasa. La Gal-1-P es transferida al Uridindifosfoglucosa (UDPglucosa), que es la forma activada de la glucosa, por la Gal-1-P-uridiltransferasa y se genera UDPgalactosa y se libera Glucosa-1-P Despus se transforma la Glucosa-1-P en Glucosa-6-P mediante la fosfoglucomutasa. Para que el circuito funcione correctamente, hay que regenerar UDPglucosa. Hay una epimerasa que retransforma UDP-galactosa en UDPglucosa.

La galactosa rinde igual que la glucosa. REGULACIN DE FOSFOFRUCTOQUINASA Hay tres posibles reguladores de la gluclisis: *2 Hexoquinasa: no puede ser porque tambin se regula la sntesis de glicerol, la sntesis de glucgeno(G-1-P), la sntesis de ribosa-5-P. La hexoquinasa es sensible al exceso de Glucosa-6-P. *3 Fosfofructoquinasa-1: la reaccin que produce es fructosa-1,6-bisfosfato. La PFK-1 es sensible a la concentracin celular de molculas como ATP (efecto negativo sobre el enzima) y por niveles elevados del citrato (efecto negativo). Se activa alostricamente cuando hay mucho AMP (efecto positivo), la fructosa-2,6-bisfosfato (activador positivo, se fabrica a partir de fructosa-1,6-bisfosfato (1 milln de veces ms)), provoca que cuando hay poco, se active la PFK-1. *4 La PFK-2/FBP (fosfobisfostato fosfatasa) fosforila F6P a F-2,6-P2 y tambin la puede desfosforilar. La actividad del enzima PFK-2/FBPfosfatasa es regulada por

fosforilacin mediante la serinquinasa, de forma que cuando se fosforila, se aumenta la actividad fosfatasa y se disminuye la actividad quinasa. La serinquinasa se activa indirectamente por incrementos de glucagn. Se une a receptores de la membrana y se emite una seal. El glucagn se activa cuando la concentracin de glucosa desciende mucho. Todo el mecanismo est diseado para que el enzima sepa que hay menos glucosa en sangre. La Piruvato Quinasa es un enzima que se regula de muchas formas diferentes. Se regula de forma alostrica, siendo inhibida por altas concentraciones de ATP y altas concentraciones de Alanina. El piruvato se puede transformar en Alanina por una transaminasa. La disponibilidad de Fructosa-1,6-bisfosfato activa la piruvato quinasa. Cuando hay mucha Fructosa-1,6-bisfosfato, se abre la llave de la Piruvato quinasa y se metaboliza correctamente. Los mamferos tambin fabrican diversos isoenzimas de piruvato quinasa que se expresan de forma diferente segn el rgano. Hgado.................. L Piruvato quinasa. Msculo................. M Piruvato quinasa. La forma heptica es regulable por fosforilacin (inhibe). La protena responsable es la protena quinasa A, que es activable por niveles altos de glucagn circulante. Los genes que codifican la piruvato quinasa son regulables en su expresin, de forma que dietas muy elevadas en carbohidratos, levan a un incremento en el mRNA que codifica la piruvato quinasa. La piruvato quinasa est controlada de forma alostrica, por la transcripcin gnica y por fosforilacin. El hgado tiene un enzima capaz de fosforilar glucosa (glucoquinasa). Se caracteriza porque su Km es aproximadamente 5 mM, mientras que la hexoquinasa la tiene de 01 mM y no es inhibible por Glucosa-6-Fosfato. Cuando la concentracin de glucosa es elevada, la glucosa es fosforilada por la hexoquinasa, pero cuando la glucosa exterior sube a 10-12 mM, hay un enzima que funciona por encima de su Km, porque pasa del freno que es la Glucosa-6-Fosfato. La entrada de Glucosa en la clula no es por difusin pasiva, pero no requiere energa. Se produce un transporte pasivo. Estos transportadores estn en la membrana celular. Desde el punto de vista estructural, tiene 12 dominios transmembrana. Son aminocidos hidrofbicos. Existen diferentes tipos de transportadores de glucosa (GLUTn; donde n es un nmero que define el tipo de transportador). Hay diferencias funcionales en los diferentes GLUT. GLUT1/GLUT3: estn prcticamente en cualquier clula de mamfero. Tienen una Km de 1 mM. Si se considera que los niveles de glucemia pueden ser de 45-5 mM, transportan glucosa sin ningn problema. Hay otros transportadores como los GLUT2, que tienen una Km de 10-20 mM para la glucosa. Slo existe en el hgado o clulas del pncreas. Son importantes cuando hay cantidades muy grandes de glucosa. Por eso, el GLUT2 est en el hgado, porque es el rgano recaptador de glucosa. El pncreas responde produciendo insulina gracias a que el GLUT2 se vuelve activo. Las clulas hacen con el piruvato, energticamente, transformarlo en: 1. Etanol (EtOH). 2. Lactato 3. Acetil Co-A: va aerbica. Las levaduras producen EtOH en dos reacciones:

Las levaduras lo hacen para regenerar el NAD que consumieron pasando glucosa a piruvato. El paso de piruvato a lactato ocurre en microorganismos y mamferos cuando no hay O2. Se cataliza por la lactato deshidrogenasa y tiene como obligacin que una molcula de NADH regenera una molcula de NAD+ para seguir haciendo la gluclisis. El piruvato, en la mayora de clulas, con O2, lo transforman en Acetil Co-A. Supone una descarboxilacin y gasta una molcula de NAD+, que pasa a NADH.

Estos procesos estn catalizados por un complejo multienzimtico (3 diferentes protenas, que se asocian dentro de la clula para llevar a cabo esas reacciones de forma muy efectiva: piruvato deshidrogenasa; que no es citoslica, sino que est en la matriz mitocondrial (debe atravesar la membrana externa (poco selectiva) y la interna (muy selectiva))). COMPONENTE GRUPO PROSTTICO FUNCIN Piruvato deshidrogenasa Tiaminpirofosfato (TPP) Descarboxilasa del piruvato (E1) Oxida el hidroxiacil (forma el Dihidrolipiltransacetilasa Lipoamida enlace acil sobre un tomo de (E2) azufre) y lo transfiere al Co-A DHLP deshidrogenasa (E3) FAD Oxidar lipoamida El procedimiento que sigue es el siguiente: 1. E1 transforma en acetaldehido a hidroxitiaminpirofosfato. 2. El hidroxitiaminpirofosfato es transferido a E2. Tiene un grupo disulfuro que es el receptor del hidroxiacilo y lo va a unir covalentemente a 1 S y, despus, lo transfiere al Acetil Co-A. 3.La lipoamida ha quedado reducida y no puede coger hidroxiacilo. Hay que recargar el enlace disulfuro. El FADH se oxida a FAD, que provoca que el NAD se reduzca a NADH. En E. Coli hay 24 E1, 24 E2 y 12 E3. La ventaja de ese complejo es que el trfico de substratos y productos est optimizado. Este complejo requiere 5 enzimas diferentes (TPP, Lipoamida, FAD, NAD y CoA). De estos 5 enzimas, 4 son o contienen vitaminas: Tiamina......B1 cido pantotnico (Co-A). Nicotinamida (NAD). Riboflavina (FAD). El complejo se regula por producto de forma negativamente, por NADH y por acetil Co-A. Tambin es sensible a la carga energtica de la clula. Niveles elevados de AMP son activadores y niveles elevados de GTP son inhibidores.

La fosforilacin tambin lo regula y es regulada por la insulina. Ciclo de Krebs Tambin se llama ciclo de los cidos tricarboxlicos o ciclo del citrato. Es una va muy importante que ocurre en la matriz mitocondrial. Es un mecanismo que incorpora el Acetil del Acetil Co-Enzima-A sobre un oxaloacetato y resulta en la eliminacin de 2 C ms oxidados (CO2), a expensas del paso de algunas molculas de NAD a NADH y de FAD a FADH. Es un proceso central en el metabolismo de carbohidratos y de lpidos y de muchos aminocidos. Las reacciones que implica el ciclo de Krebs son: -Una molcula de Acetil Co-A se incorpora en una molcula de oxaloacetato, dando el cido ctrico. La condensacin se da por el enzima citratosintasa. Esta reaccin tiende hacia la incorporacin de Acetil Co-A incluso en concentraciones muy pequeas. -El citrato tiene un OH central, que se transfiere a un C adyacente mediante la aconitasa. Se forma un intermedio, que es el cis-aconitato. Es una reaccin de deshidratacin, seguida de rehidratacin. El agua que entra, entra en el otro C involucrado en el proceso. -El isocitrato se deshidrata formando NADH por la isocitrato deshidrogenasa. Da lugar al oxalosuccinato (es qumicamente inestables porque es un -cetocido (descarboxilan muy fcilmente) y un -cetocido, y pierde el carboxilo de la posicin y pasa de 6 a 5 C). Da lugar al -cetoglutarato. -El -cetoglutarato, mediante la -cetoglutarato deshidrogenasa, es descarboxilado, reduciendo un NAD, y se genera succinil co-A. Se trata de la misma reaccin que realiza la piruvato deshidrogenasa. El -cetoglutarato es un complejo proteico con 4 aminocidos y 5 coenzimas. -La hidrlisis del tioster (succinil Co-A), se acopla a la sntesis de una molcula de GTP a partir de GDP. Lo hace la Succinil Co-A sintetasa). El GTP est informando a la piruvato deshidrogenasa de como va el metabolismo. El GTP pasa a ATP gracias a la nuclesidodifosfoquinasa:

-Lo que queda del ciclo, sirve para regenerarel oxaloacetato. El succinato con grupo ceto, da lugar a un oxaloacetato. Se va a oxidar este C a cetona. Se hace introduciendo 1 doble enlace entre los C centrales del succinato mediante la succinato deshidrogenasa. Se reduce FAD a FADH2. Es el nico enzima que est en la membrana interna mitocondrial. Se relaciona con la cadena de transporte de electrones. Se forma el cido fumaral. -El fumaral es hidratado por la fumarasa, que es estereoespecfica. Forma la LMalato, que es oxidada a cetona para dar oxaloacetato mediante la malatodeshidrogenasa, que reduce NAD a NADH.

BALANCE ESTEQUIOMTRICO

La energa sale cuando las formas reducidas de FADH2 y NADH van a la cadena de transporte de electrones. Cada NADH rendir 25 y cada FADH2, 15. El ciclo de Krebs no requiere O2 en ningn lado. Slo se necesita para regenerar FAD y NAD. Es un mecanismo anaerbico. Los Carbonos que entran en el ciclo de Krebs no son los mismos que salen en forma de CO2. RELACIN DEL CICLO DE KREBS Y OTRAS VAS El ciclo de Krebs es un punto intermedio para formar molculas de otras vas.Es una va anfiblicas (catablica o anablica). El Acetil Co-A es tambin inicio de sntesi de cidos grasos. El oxaloacetato es inicio para la sntesi de algunos aminocidos. El -cetoglutarato produce el esqueleto carbonado de la sntesi de algunos aminocidos y la sntesi de purina (DNA y RNA). El succinato es sobretodo para formar algunas porfirinas. El fumarato se usa en la sntesi de aminocidos y esqueletos de las pirimidinas. La capacidad del ciclo de Krebs para regular, depende de: -La cantidad de molculas de oxaloacetato. -Regulacin de algn enzima. La manera de meter Carbonos en el ciclo de Krebs es a nivel del oxaloacetato. Son 2 reacciones de relleno del ciclo de Krebs. Tambin se llaman reacciones anaplerticas. El paso de Acetil co-A a oxaloacetato no es posible en animales. 1. Se transforma el piruvato en oxaloacetato, catabolizado por el enzima piruvatocarboxilasa. Esta reaccin es muy importante, sobretodo, cuantitativamente en rin e hgado de mamfero.

2. Del fosfoenolpiruvato (PEP), se transforma en oxaloacetato. El PEP capta CO2 y utiliza GTP en vez de ATP. Da lugar a OAA. Esta reaccin puede ser reversible. Se da en msculo esqueltico y cardaco. La reaccin es catalizada por la fosfoenolpiruvatocarboxiquinasa (PEPCK).

Estos Carbonos pueden venir de glucosa y pueden rellenar componentes del ciclo de Krebs. Dota a la clula de un mecanismo que permite retroceder la gluclisis a travs de PEP. El Pyruvato puede pasar a OAA y luego a PEP invirtiendo un poco de energa. REGULACIN DEL CICLO DE KREBS Hay varios puntos de control: 1. Las tres reacciones importantes (2 descarboxilaciones y entrada de Acetil co-A), se inhiben por carga energtica alta (ATP). 2. La -cetoglutaratodeshidrogenasa (oxida citrato en -cetoglutarato) y la succinil coA deshidrogenasa (oxida -cetoglutarato en succinato) tambin se inhiben por concentraciones elevadas de NADH. 3. La regulacin definitiva es si hay o no acetil co-A disponible. La capacidad del ciclo suele venir dada por la cantidad de acetil co-A. Viene regulada por la actividad de la piruvatodeshidrogenasa (desde el punto de vista de la glucosa). La piruvato

deshidrogenasa puede ser regulada por su producto (Acetil co-A y NADH). Un incremento en los triglicridos da un aumento en Acetil co-A. La piruvatodeshidrogenasa, nota que hay mucho acetil co-A y deja de gastar glucosa como fuente energtica .Se activa cuando hay mucha concentracin de AMP y se inhibe por altos niveles de GTP. Los altos niveles de GTP son captados como hiperactividad debido al ciclo de Krebs. La fosforilacin tambin inhibe la actividad piruvatodeshidrogenasa. El acetil co-A es un producto de degradacin de los cidos grasos y de los esqueletos cidos carbonados. Cuando hay un excesode Acetil co-A, se frena el uso de glucosa para fabricar Acetil co-A porque los diferentes rganos de un animal son diferentes metablicamente. La forma de obtener energa es diferente. Hay rganos que pueden obtener energa usando acetil co-A, productos de aprovechamiento de acetil coA (cuerpos cetnicos). Otros tejidos son muy dependientes de glucosa y se avienen muy mal a otras molculas. Ej: cerebro. Siempre que se pueda evitar malgastar Glucosa, se evitar, usando combustibles alternativos. El acmulo de Acetil co-A informa a la piruvatodeshidrogenasa de que se acumula acetil co-A. Esto provoca que no se use ms glucosa para formar Acetil co-A, porque hay rganos glucosadependientes. Ciclo del Glyoxilato Es una variante del ciclo de Krebs que se da en algunos tejidos vegetales. Introduce materia neta en el sistema. Es menos oxidativo que Krebs. Slo tiene 2 reacciones extras a Krebs. A partir del isocitrato es diferente. La isocitratoliasa rompe la molcula de isocitrato en succinato y glyoxilato. El glyoxilato acta como receptor de un segundo Acetil co-A y da una molcula de 4 C, que es el malato. El malato se oxida por la malatodeshidrogenasa a oxaloacetato.

Puede fabricar succinato a partir de 2 molculas de Acetil co-A. El succinato puede dar por s mismo OAA. El OAA puede dar lugar a PEP, que en ltima estancia, puede regenerar gucosa. Los animales no lo pueden hacer. Ej: semillas vegetales meten Acetil co-A de sus reservas lipdicas en los glioxisomas y acaban haciendo glucosa. Los Carbonos que entran por el acetil co-A son diferentes a los que salen por CO 2. El primero que se pierde es y el segundo es . En 1 ciclo de Krebs, ninguno de los Carbonos del Acetil co-A se pierde en CO 2 Y en el segundo ciclo? Energticamente: En un organismo aerbico, los electrones que se desprenden del NADH y FADH 2 se utilizan para respirar. El NADH y FADH transfieren electrones al Oxgeno y forman H2O (O2 reducido) y forma energa.