Cromatografa Liquida de Alta resolucin HPLC Realizar la curva de Calibracin de la glucosa si por el mtodo de cromatografa Liquida HPLC, se tienen

n los siguientes resultados de estndares de Glucosa, Xilosa, Arabinosa y manosa. Los tiempos de retencin se encuentran por: (recuerden que los tiempos de retencin varan en un cierto rango para cada Cromatograma)

Glucosa: 12,5 a 13,1 min Xilosa: 14,03 a 14,42 min Arabinosa: 17,04 a 17,68 min Manosa : 18,1 a 18,30min

CROMATOGRAMA DE ESTANDARES DE CARBOHIDRATOS

Concentracin de estndares C(g/l)) S1 S2 S3 S4 S5

(g/l) 10 8 6 4 2

GLUCOSA AREA 3501570 2767953,33 2088435,67 1393183,33 725882,667

Determinar la concentracin de la glucosa por HPLC de una muestra de fermentacin, si ste se diluye de 1 a 10 ml acondicionando el pH en la Columna HPX-87P (especfica para carbohidratos) y filtrando con una membrana Millipore (filtro), el resultado del cromatograma nos da los siguientes resultados:

Que pH de trabajo se debe acondicionar la muestra para la utilizacin de la columna HPX-87P? (marca Biorad) Qu cuidados se debe tener con muestras para la determinacin por HPLC? Qu Tamao poro de filtro es recomendable utilizar para acondicionar las muestras analizadas por HPLC? Describir el funcionamiento de una Bomba de HPLC. Describir tipos de detectores de una mquina HPLC.