Universidad Veracruzana 1 Anlisis Instrumentales

Anlisis Instrumental
Introduccin:
Despus de analizar un mtodo para la produccin de un producto de consumo, se conocen algunas particularidades de este proceso, desde el anlisis a las materias primas incluyendo todos los puntos crticos de su proceso de elaboracin, as como al producto final y subproductos. Todo este monitoreo para asegurar la calidad final de este producto con especificaciones precisas, se logra mediante un laboratorio de control de calidad, en ste se han configurado y estandarizado un sin nmero de procesos analticos qumicos, fsicos e instrumentales con esta meta. Un laboratorio de estas caractersticas cuenta con sistemas tcnico-administrativos y una infraestructura acorde a las necesidades del mercado y la competencia. Sus polticas de aseguramiento de calidad son requeridas bajo una norma ISO de calidad y la organizacin, administracin, polticas y compromisos estn documentados claramente.

Mtodos analticos
Claudio Gonzlez Prez
Una parte importante de la infraestructura es el equipo instrumental para los anlisis y los mtodos analticos empleados, los cuales se clasifican en mtodos qumicos e instrumentales: Mtodos Qumicos Anlisis Cualitativo Mtodos Instrumentales Volumtricos Mtodos Qumicos Anlisis Cuantitativo Mtodos Instrumentales Gravimtrico s De separacin pticos Electroqumicos

Qumica Analtica

Los mtodos qumicos estn basados en interacciones materiamateria, esto es, en reacciones qumicas*. Estos mtodos fueron durante un gran periodo de tiempo esencialmente empricos, implicando, en la mayora de los casos, una gran destreza experimental. Actualmente, se utilizan

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Universidad Veracruzana 2 Anlisis Instrumentales conceptos, fenmenos y propiedades que han contribuido a aumentar y consolidar la base sobre la que se asientan los antiguos mtodos empricos, as como a desarrollar otros nuevos. Por otro lado, la revolucin tecnolgica e industrial, a la vez que plantea nuevos problemas, ha impulsado el desarrollo de nuevos mtodos, de forma que actualmente, puede afirmarse que todas las propiedades de la materia pueden utilizarse para el establecimiento de un mtodo de anlisis. Surgen as una gran cantidad de mtodos instrumentales, basados en interacciones materiaenerga, que emplean algn aparato distinto de la balanza y la bureta para realizar la medida y para los cuales no es esencial el concurso de una reaccin qumica. Un mtodo analtico se considera fsico cuando no incluye reaccin qumica alguna y la operacin de medida no modifica la composicin qumica del sistema, como, por ejemplo, cuando se trata de medir la intensidad del color de una disolucin de permanganato (la cual es proporcional a la concentracin). Sin embargo, en muchas ocasiones, simultneamente con la medida de la propiedad fsica elegida, es necesario emplear reacciones qumicas (por ejemplo, puede determinarse hierro colorimtricamente mediante la formacin del complejo Fe2+ofenantrolina). Por ello, a veces, se utiliza el trmino de mtodos fisco-qumicos de anlisis.

Instrumentos analticos
El objeto de la Qumica Analtica lo constituye la materia, y su finalidad es caracterizarla. Con este fin es necesario utilizar ciertas propiedades (propiedades analticas) que presente la propia materia y mediante las cuales se pueda establecer lo ms claramente posible su composicin cualitativa o cuantitativa. Estas propiedades pueden ser observadas directamente de la materia (algo con sustancial con ella) o, y en el caso ms general, pueden ser provocadas mediante un proceso fsico o mediante una reaccin qumica. En cualquier caso, puede afirmarse que la medida de la propiedad elegida es la etapa experimental definitiva en el proceso analtico, tanto si se trata de establecer la presencia (o ausencia) de un determinado grupo qumico, como si se trata de determinar la proporcin de un determinado componente en una muestra. La medida puede referirse a la simple percepcin sensorial de una propiedad (formacin de un precipitado, presencia de un color, etc.) o a la "determinacin" de la intensidad de dicha propiedad, con ayuda de un aparato ms o menos complicado. As, puede considerarse que un instrumento analtico es un dispositivo que convierte una seal, que no suele ser detectable directamente por el ser humano, en una forma que s lo es. Un instrumento analtico tpico consta de los cuatro componentes representados en la figura 1.1. El generador de seales produce una seal directamente relacionada con la presencia (y tambin, frecuentemente con la concentracin) del analito. En ocasiones es una especie producida por el propio analito, como cuando se trata de determinar el pH, donde la seal son los iones H+. Otras veces, el proceso de generacin de la seal es ms complicado, como, por ejemplo, en

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Universidad Veracruzana 3 Anlisis Instrumentales espectrofotometra, donde, adems de la propia muestra, se necesita una fuente de radiacin y un monocromador. El detector, tambin llamado transductor de entrada1 es un dispositivo que convierte un tipo de seal en otro. Cuando se trata de medir el pH, el detector es un electrodo de vidrio que transforma la actividad de los iones H+ en un potencial elctrico, mientras que en espectrofotometra ultravioleta o visible, el detector es un tubo fotomultiplicador que transforma la energa radiante en una corriente elctrica. La seal procedente del detector, se modifica en el procesador de seales, adaptndose al dispositivo de lectura. En muchas ocasiones se produce simplemente una amplificacin, si bien, a menudo, simultneamente las seales se filtran para reducir el ruido de fondo. PH Radiacin
Lmpara

Generador de seales
Seal analtica

Muestra
Actividad Iones H+

Monocromador Muestra

Radiacin electromagntica

Detector
Seal de entrada

Electrodos
Potencial elctrico

Fotomultiplicador

Fotones

Procesador de seales
Seal de salida

Amplificador Digitalizador
Corriente elctrica

Fototubo
Corriente elctrica

Dispositivo de lectura

Medidor de escala Unidad Digital

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Medidor de escala Unidad

Figura 1.1. Componentes bsicos de un instrumento analtico.

Finalmente, el dispositivo de lectura transforma la seal procesada en otra seal inteligible para el observador. Esta puede ser, por ejemplo, el desplazamiento de la aguja en una escala, una serie de nmeros, un trazo en un papel, el ennegrecimiento en una placa fotogrfica, etc.
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Douglas A. Skoog y James J. Leary, "Anlisis Instrumental". Ed. McGraw-Hill. Madrid (1993)

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Universidad Veracruzana 4 Anlisis Instrumentales CARACTERSTICAS DE LOS MTODOS INSTRUMENTALES Los mtodos qumicos cuantitativos tienen carcter absoluto. En ellos, la propiedad medida es funcin directa de la concentracin o de la cantidad, de acuerdo con una relacin de proporcionalidad, P=KC, donde P representa la magnitud de la propiedad medida, y C es la concentracin o la cantidad. Adems, la constante, K es nica, esto es, tiene un valor perfectamente definido, deducible de las leyes estequiomtricas. En estos mtodos, basta una simple medida para efectuar la determinacin. As, por ejemplo, en un mtodo volumtrico, una sola lectura del volumen de reactivo aadido desde la bureta puede ser suficiente para determinar la concentracin del componente de inters. Por su parte, los mtodos instrumentales tienen carcter relativo. Tambin se basan en la medida de una propiedad, P, (normalmente fsica), que es funcin de la concentracin, P=KC. Sin embargo, a diferencia de los mtodos qumicos, la constante de proporcionalidad no es nica, al depender de las condiciones experimentales. As, por ejemplo, en espectrofotometra, la absorbancia, A, (propiedad medida) est relacionada con la concentracin por: A=bC Donde es la absortividad molar y b el espesor de la muestra en cm. En polarografa, la relacin entre la propiedad medida (intensidad de corriente) y la concentracin es ms complicada: Id = 607nD1/2m2/3t1/6C Donde D es el coeficiente de difusin, m el flujo de mercurio y t el tiempo de goteo. Es evidente, que si se conocen todos los parmetros implicados en la constante K ( y b en espectrofotometra, y n, D, m y t en polarografa) estos mtodos adquieren carcter absoluto. Sin embargo, en la prctica, estas relaciones apenas se usan, muchas veces por la dificultad de medir las variables implicadas. Por ello, la concentracin de la muestra se determina preferentemente por comparacin con muestras patrn. En principio, puede utilizarse un solo patrn, llevando a cabo una medida, P1, sobre una muestra de concentracin conocida, C1, con lo que se obtiene el valor de K. A continuacin, manteniendo constantes las condiciones experimentales (es decir, K) se realiza la medida de la propiedad, P, sobre la muestra, C, con lo que se tiene que: P/P1=C/C1 Donde, P, P1 y C1 son magnitudes conocidas. En consecuencia, se deduce C por comparacin con C1, la cual se conoce exactamente, o se puede determinar con un mtodo qumico absoluto. De aqu, la importancia de estos mtodos en la puesta a punto de los mtodos instrumentales.

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Universidad Veracruzana 5 Anlisis Instrumentales Sin embargo, operando con una sola muestra patrn se tiene el inconveniente de que el resultado estar afectado del error indeterminado propio de la medida de ese patrn. Por ello, resulta ms conveniente comparar respecto a varias muestras patrn incluidas en un calibrado. Estos calibrados minimizan el efecto de los errores indeterminados propios de la medida con un patrn nico. TIPOS DE CALIBRADOS Los tres mtodos de comparacin con patrones empleados ms frecuentemente son los que utilizan curvas de calibrado obtenidas mediante series de patrones, el mtodo de las adiciones estndar y el mtodo del patrn interno. Curvas de calibrado La utilizacin de curvas de calibrado obtenidas a partir de series de patrones es, posiblemente, el mtodo ms utilizado. Consiste en medir la propiedad analtica de inters, P1, P2, P3, etc. en una serie de muestras de composicin conocida, C1, C2, C3, etc. y preparadas todas ellas en las mismas condiciones (figura 1.2.A.)

Figura 1.2. Curvas de calibrado

El calibrado obtenido se emplea para determinar la cantidad o concentracin en una muestra desconocida midiendo la magnitud de P en idnticas condiciones que los patrones y obteniendo C por interpolacin. La curva de calibrado se representa siempre con la respuesta del instrumento en el eje vertical (y) y las concentraciones sobre el eje horizontal (x). El valor de C se puede acotar teniendo en cuenta la precisin de las medidas para seal analtica (y) y la concentracin (x), tomando precauciones experimentales para asegurar que la linealidad de la respuesta se conserve en un amplio margen de concentraciones. En estos casos la forma de proceder consiste en obtener la recta de regresin de y sobre x (esto es, la "mejor" lnea recta a

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Universidad Veracruzana 6 Anlisis Instrumentales travs de los puntos de la grfica de calibracin, y que puede obtenerse, por ejemplo, por el mtodo de mnimos cuadrados) y utilizarla para estimar la concentracin de muestras problema por interpolacin, as como tambin para estimar el lmite de deteccin del procedimiento analtico. En la figura 1.2.B. se muestra la ecuacin de la recta de regresin de los primeros 8 puntos del calibrado que relaciona la absorbancia con la concentracin de FeSCN2+, as como el coeficiente de correlacin, r (parmetro que se utiliza para estimar el grado de ajuste de los puntos experimentales a la recta). En la prctica, es muy frecuente que la grfica de calibracin sea lineal a bajas concentraciones de analito y se vuelve curva a altas concentraciones. En este caso, se suele prescindir de los puntos que se apartan de la linealidad, para lo cual existen mtodos estadsticos adecuados*. En otras ocasiones, como por ejemplo, la respuesta de algunos electrodos selectivos de iones, la grfica es curva para todas las concentraciones. En estos casos, los problemas estadsticos son mucho ms complicados, aunque, si la curvatura no es demasiado severa, y los puntos experimentales no estn demasiado separados (lo que normalmente sucede), puede usarse un mtodo sencillo, aunque aproximado, consistente en trazar una lnea recta entre cada par de puntos y calcular las concentraciones utilizando la interpolacin lineal, es decir, trazar la curva como una serie de pequeos segmentos rectos2

Comparacin entre Mtodos Qumicos e Instrumentales

La comparacin de estos mtodos se puede realizar sobre la base de sus caractersticas de bondad, concretadas en la precisin, exactitud, sensibilidad, selectividad, rapidez y costo. Precisin La precisin de un conjunto de mediciones est ntimamente relacionada con la presencia de errores indeterminados (o aleatorios) y se considera como una medida de la reproducibilidad3 de los resultados. Para describir la precisin se utiliza fundamentalmente la desviacin estndar, si bien tambin se usa la desviacin estndar relativa de la media, el coeficiente de variacin y la varianza. En relacin con la precisin, los mtodos qumicos suelen ser ms precisos en trminos absolutos que los mtodos instrumentales.

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J. C. Miller y J. N. Miller. "Estadstica para Qumica Analtica". Ed. AddisonWesley Iberoamericana (1993). Existe una diferencia entre los trminos repetitividad y reproducibilidad. El primero se refiere a un conjunto de medidas repetidas en una sucesin rpida; por ejemplo, cinco valoraciones de la misma muestra utilizando la misma serie de disoluciones, el mismo material de vidrio, la misma disolucin de indicador, y en las mismas condiciones de temperatura, humedad, etc. Por su parte, la reproducibilidad se refiere a cuando cada una de las medidas se han realizado en situaciones diferentes. Por ejemplo, las cinco valoraciones anteriores realizadas con distintos recipientes de vidrio, distintas disoluciones de indicador, y en diferentes condiciones del laboratorio.

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Universidad Veracruzana 7 Anlisis Instrumentales Exactitud La exactitud mide el error sistemtico o determinado de un mtodo analtico. Se puede determinar por comparacin con muestras patrn y por comparacin con un mtodo patrn.

Comparacin con muestras patrn. Cuando se dispone de muestras patrn con una composicin conocida o aceptada, m, la forma de proceder es realizar n determinaciones, obtenindose el valor medio x. La exactitud vendr dada por la diferencia:

Esas diferencias se pueden atribuir nicamente a errores indeterminados cuando el valor de t deducido de la ecuacin ; s = desviacin estndar

Es menor que el tabulado para un determinado nivel de probabilidad (suele tomarse el 95%) Selectividad La selectividad hace referencia al grado de interferencia de unas especies sobre la identificacin de otras. El caso ms favorable de selectividad es aquel en el que ninguna otra sustancia interfiere y la reaccin o el mtodo son completamente caractersticos de la sustancia que se determina. Se dice entonces que el mtodo es especfico. La selectividad se representa cuantitativamente por el coeficiente de selectividad, el cual se define, para una sustancia B, potencialmente interferente sobre un determinado analito, A, como: kB,A = mB/mA Donde mB y mA son las pendientes del calibrado a la concentracin de inters, de B y de A respectivamente. El coeficiente de selectividad puede variar desde cero (no hay interferencia) hasta valores superiores a la unidad. Es un parmetro de bastante utilidad, si bien, su uso se centra casi exclusivamente, para caracterizar el funcionamiento de los electrodos selectivos de iones. La selectividad de los mtodos instrumentales es muy diversa, existiendo algunos muy selectivos, en especial, algunos mtodos pticos.

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Universidad Veracruzana 8 Anlisis Instrumentales Rapidez Con respecto a la rapidez, los mtodos instrumentales son ms rpidos para determinaciones en serie o de rutina. Requieren un tiempo de puesta a punto, pero luego suelen ser rpidos. Adems, suelen ser fcilmente automatizables, ya que muchos dan respuestas rpidas y continuas, haciendo posible su adaptacin a anlisis de control, lo cual permite, tras una interpretacin, pasar a la accin en poco tiempo. En la industria, normalmente se parte de unos materiales que, despus de someterlos a una serie de manipulaciones se transforman para originar unos productos finales.

Materiales de partida

Proceso Global

Productos finales

El control puede efectuarse en cualquier punto del proceso, para lo que se necesitan mtodos rpidos que permitan tomar decisiones en poco tiempo, por si es necesario alterar el proceso de fabricacin. Costo Finalmente, en cuanto a la economa, podra parecer, en principio, que los mtodos qumicos son ms econmicos que los instrumentales, y, si bien, sto es cierto en cuanto al material, no lo es tanto en relacin con el tiempo necesario para llevarlos a la prctica ni en relacin con el personal, pues, en contra de lo que pueda parecer a primera vista, se precisa mayor tiempo de adiestramiento para utilizar un mtodo clsico, que para aprender a manejar un instrumento. Esto hace que los mtodos instrumentales puedan ser rentables para trabajos en serie.

Ejercicios: 1. Investigue el organigrama de un laboratorio de control de calidad bajo normas ISO y describa en un diagrama de puestos las funciones de cada integrante. 2. Explique el carcter absoluto de los mtodos qumicos y el carcter relativo de los mtodos instrumentales; cmo se mide la exactitud y cul es la diferencia entre Repetibilidad y Reproducibilidad. 3. De los conceptos aqu descritos, realice un proyecto para construir un espectrofotmetro con la mnima instrumentacin, utilizando una fuente de luz, longitud de onda determinada y recipiente de muestra, as como el mtodo de leer la lectura que se obtenga ( el xito de este proyecto les aumentar un punto en su examen parcial).

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