GRUPO T.A.R.

PARAMETROS DETERMINANTES DE LA POTABILIDAD DE UN AGUA

ANLISIS DE AGUAS PARMETRO: ANLISIS MICROBIOLOGICO I: RECUENTO TOTAL DE MICROORGANISMOS AEROBIOS MESFILOS REF.: Legislacin de Aguas Potables CONC. MAX. ADMISIBLE: <200
UNIDADES: N Bacterias/100ml

HOJA N: 1 RANGO: NIVEL GUIA: 10/ml

1. FUNDAMENTO. Las bacterias aerobias son todas las bacterias hetertrofas, aerobias o anaerobias facultativas, mesfilas y psicotrficas capaces de crecer en un medio de agar nutritivo. Este mtodo se basa en contar el n de colonias desarrolladas en una placa de medio de cultivo slido, en el que se ha sembrado un volumen conocido de agua muestra, transcurrido un tiempo y una temperatura de incubacin determinados. 2. TOMA DE MUESTRA Y ALMACENAMIENTO. Se recoge el agua potable a analizar en un recipiente esterilizado y conservar en el frigorfico, un mximo de 6 horas antes del anlisis. 3. INTERFERENCIAS. Debido a la posibilidad de contaminacin por microorganismos del aire, se meter en el autoclave el material a utilizar envuelto en papel de aluminio, el agar y los tubos a 121C durante 20 min. Esperar que la temperatura descienda hasta 80C (2 horas en total), sacar el material y pasarlo a la campana de flujo laminar (dejar reposar hasta 45C). 4. MATERIAL. - 3 Placas de Petri de 90 a 120ml de dimetro estriles. - 5 Pipetas estriles de 1ml. - 3 Tubos de ensayos con tapn. - 1 rejilla. - Estufa regulada a 37C (+/-1C).

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PARAMETROS DETERMINANTES DE LA POTABILIDAD DE UN AGUA

ANLISIS DE AGUAS PARMETRO: ANLISIS MICROBIOLOGICO I : RECUENTO TOTAL DE MICROORGANISMOS AEROBIOS MESFILOS HOJA N: 2

5. MEDIOS DE CULTIVO Y LIQUIDO DE DILUCIN. -Medio de cultivo Plate Count Agar. Composicin: Triptona (5g), extracto de carne (2,5g), Dextrosa (1g), agar (15g) y agua destilada. Preparacin: Disolver 2,35g de medio de cultivo en polvo en 100ml de agua destilada y agitar con varilla de vidrio. -Agua peptonada (Liquido de dilucin). Composicin: Peptona (10g), cloruro de sodio (5g), y agua destilada. Preparacin: Disolver 0,525g de medio slido en 35ml de agua destilada y agitar con varilla de vidrio. 6. PROCEDIMIENTO. Preparar 3 tubos con 9ml de agua peptonada cada uno y meter en autoclave. Preparar el medio de cultivo en vaso de precipitado y meter en autoclave. Inocular el caldo de peptona con diluciones decimales de la muestra de agua problema expresados en 10-1, 10-2, 10-3. De cada dilucin depositar 1ml en cada placa de Petri. Verter 30ml de medio de cultivo de agar en cada placa y dejar solidificar (5-10min), invertir las placas y meterlas en la estufa a 37C (+/-1C), incubar durante 48h. 7.LECTURA Y EXPRESIN DE RESULTADOS. Transcurridos 48h (+/-3h) contar todas las colonias desarrolladas en cada placa. El resultado se expresar, como n de bacterias totales en 1ml.

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