UNIVERSIDAD POLITCNICA DE QUINTANA ROO

INGENIERA EN BIOTECNOLOGA

METODOLOGA DE LA INVESTIGACIN

PROYECTO -FINAL-

EDGAR NOE TEC CAAMAL

15 DE AGOSTO DE 2011

DR. VERNICA VIZCANO OCHOA

Qu tan confiables son los resultados obtenidos en una prueba (test) de deteccin de VIH?

Introduccin
El Virus de inmunodeficiencia adquirida -VIH- provoca la destruccin de las defensas del organismo y puede desarrollar el Sndrome de Inmunodeficiencia Adquirida SIDA-. Que es la etapa en que el organismo indefenso puede desarrollar graves enfermedades. (CENSIDA, 2010) La prueba de VIH es un sencillo anlisis de sangre. Debe hacerse 3 meses despus del ltimo contacto de riesgo, antes de esperar a qu aparezcan los primeros sntomas del VIH (Cruz Roja, 2008) Un test es un patrn uniforme que sirve como norma para medir cosas de la misma especie. En este caso se tratar de dos Test: Test ELISA (Enzyme Linked Inmunoabsorvent Assay) Western Blot Cuando una persona est infectada con el virus del VIH, el cuerpo responde con la produccin de protenas especiales que combaten la infeccin. Estas protenas se denominan anticuerpos. Una prueba de anticuerpos contra el VIH busca tales anticuerpos en la sangre, la saliva o la orina. (AVERT) ELISA es sinnimo de inmunoensayo enzimtico. Se trata de un examen de laboratorio comnmente usado para detectar anticuerpos en la sangre. (Vorvick, 2011) El Western Blot, es la prueba de confirmacin ms utilizada actualmente debido a su especificidad. Este test emplea antgenos virales obtenidos por cultivo celular; despus, mediante electroforesis* se separan las distintas protenas vricas segn sus pesos moleculares y se transfieren a un papel de nitrocelulosa, ponindose ste en contacto con el suero problema. Los anticuerpos se detectan aadiendo una anti-IgG humana marcada con una enzima (peroxidasa) que produce unas bandas coloreadas al aadir un substrato. De esta forma se detectan anticuerpos especficos frente a las distintas protenas del VIH-1 (Martn, 2000-2007)

*La electroforesis es una tcnica habitual en el laboratorio clnico. Permite separar especies qumicas (cidos nuclicos o protenas) a lo largo de un campo elctrico en funcin de su tamao y de su carga elctrica.

Hiptesis
Al conocer sobre la deficiente confiabilidad de las pruebas de VIH (ELISA Y Western Blot), se lograr la concientizacin de las personas sobre estos test.

Objetivos
Identificar los puntos por los que pierde validez los resultados obtenidos en los test de VIH (Elisa y Western Blot). Brindar informacin acerca de los test de VIH.

Justificacin
El presente proyecto nace de la intencin de mostrar la realidad acerca de los test de VIH, siendo que este virus ha afectado no solo biolgicamente sino tambin psicolgicamente a millones de personas, ya que los test de esta enfermedad no son confiables (Giraldo, 1999) y al ser diagnosticados seropositivos, afecta su sistema psicolgico (Olvera-Mndez, 2008), lo que es realmente deplorable. La informacin presentada en este proyecto puede ayudar a las personas con esta enfermedad y a las que ya han sido diagnosticadas con esta misma, ya que podrn saber que la confiabilidad de los test de VIH es baja.

Resultados
Lo obtenido en la investigacin de las pruebas de VIH test ELISA fue lo siguiente: Los test que buscan los anticuerpos de los virus de la hepatitis A y B, los de la rubola, sfilis, histoplasma y cryptococos, por mencionar slo unos pocos, utilizan el suero sanguneo directamente (sin diluir). Sin embargo, para intentar evitar reacciones positivas falsas, algunos test serolgicos usan suero sanguneo diluido; por ejemplo este es el caso de los test

que averiguan los anticuerpos de los virus del sarampin, varicela y paperas, los cuales utilizan una dilucin de 1:16, para los citomegalovirus (CMV) 1:20 y para los Virus de Epstein Barr (EBV) 1:10. (Giraldo, 1999) El test ELISA testa los anticuerpos contra lo que se supone es el Virus de la Inmunodeficiencia Adquirida Humana. Para realizar este tests, el suero sanguneo de un individuo se disuelve en la proporcin de 1:400, con un determinado diluyente. (Abbott, 2002) El mdico Roberto Giraldo realiz un experimento en un laboratorio mdico en Nueva York. Lo llev a cabo utilizando el mismo kit del test ms utilizado en los laboratorios clnicos de todo el mundo. Primero tom muestras de sangre que, a una proporcin de 1:400, el resultado fue negativo con respecto a los anticuerpos del VIH. Despus tom las mismas muestras de suero sanguneo y las analiz de nuevo, esta vez sin diluirlas, y el resultado dio en todas positivo. A partir de esto ha llevado a cabo 100 experimentos y obtuvo siempre el mismo resultado. Incluso analiz su propia sangre, la cual a 1:400 daba un resultado negativo. A 1: 1 (no diluida) el resultado fue positivo. Siguiendo el procedimiento del Banco Metropolitano de Sangre, de la Ciudad de Bucaramanga en Colombia, para el anlisis de muestras en donantes, se gener un estudio descriptivo para detectar el grado de confiabilidad de las pruebas serolgicas para el VIH. Observamos una cantidad importante de falsos positivos (10/12; 83%), por los test ELISA y Western Blot. (PIEROS, 2001) Por otra parte, llama la atencin que en el instructivo del test ELISA, se extiende una afirmacin que nos muestra que no hay un estndar establecido para establecer la presencia o ausencia del anticuerpo VIH-1 en la sangre humana (Abbott, 2002)

-Actualmente no existe un estndar reconocido para establecer la presencia o ausencia del anticuerpo VIH-1 en la sangre humana. La sensibilidad se ha determinado a partir de diagnsticos clnicos de SIDA. La especificidad se ha establecido en base a donantes aleatorios.- (Abbott, 2002)

Del Western Blot se hallo lo siguiente: An no se ha estandarizado un solo criterio para establecer la seropositividad o seronegatividad de un aprueba de Western Blot; es decir existen varios criterios en el mundo para dar un resultado. Los criterios varan segn las diferentes organizaciones de tipo mundial e incluso varia de un pas a otro. (Alberto Castillo, 2010) (WHO, 1990)

Conclusiones
Del test ELISA no se puede tener una completa seguridad de qu lo obtenido en la prueba es realmente lo certero en cuanto a resultados se refiere. Siendo qu an no hay un estndar establecido para poder afirmar la presencia o ausencia de anticuerpos de VIH-1. En cuanto al Western Blot, no se puede tener la certeza de que el resultado de este prueba de confirmacin de VIH, sea el verdadero; ya qu los criterios para determinar la seropositividad o seronegatividad de un paciente no estn homogeneizados; pudiendo variar los resultados segn los criterios de alguna organizacin o incluso de otro pas.

Recomendaciones
Realizarse la prueba de VIH con dilucin normal (1:400) y una dilucin 1:1. De esta forma se podr ver si el resultado vara respecto a las diluciones. Si es as, es visible a simple vista qu no es confiable una prueba de estas.

Trabajos citados
Abbott, L. (2002). HUMAN IMMUNODEFICIENCY VIRUS TYPES 1 AND 2. (E. COLI, B. MEGATERIUM, RECOMBINANT ANTIGEN) HIVAB HIV-1/HIV-2 (rDNA) EIA . U.S.A. Alberto Castillo, A. E. (2010). Gua de atencin inegral en VIH/SIDA 2010. GUA DE ATENCIN INTEGRAL EN VIH/SIDA 2010 . Ecuador. AVERT. (s.f.). Pruebas De Deteccin De VIH. Recuperado el 15 de Agosto de 11, de http://www.avert.org/pruebas-vih.htm CENSIDA. (9 de Junio de 2010). Recuperado el 15 de Agosto de 2011, de http://www.censida.salud.gob.mx/interior/pruebadelsida.html Cruz Roja, E. (2008). Recuperado el 15 de Agosto de 2011, de http://www.cruzroja.es/vih/ Delgado Vzquez, R., Garca, G., Eiros Bouza, J. M., Lpez Bernaldo de Quirs, J. C., & Ortiz de Lejarazu, R. (2006). Procedimientos en Microbiologa Clnica. Espaa: eimc. Giraldo, R. (1999). Todos reaccionan positivo en la prueba de Elisa para VIH. Continuum , 8-11. Martn, C. R. (2000-2007). dermocosmos. Recuperado el 15 de Agosto de 2011, de http://www.dermocosmos.com/espanol/libros/SIDA%205.htm Olvera-Mndez, J.-T. (2008). La importancia de la Psicologa de la salud y el papel del psiclogo en la adherencia al tratamiento de pacientes infectado con VIH. Revista Electrnica de Psicologa de Iztacala , 149-158 pg. OMS. (Diciembre de 2009). HIV/AIDS. Recuperado el Mayo de 2011, de World Health Organization: http://www.who.int/hiv/data/en/index.html PIEROS, J. E. (2001). CONFIABILIDAD DE LAS PRUEBAS DEL VIH. Bogot D.C., Venezuela. Recuperado el 15 de Agosto de 2011, de http://acuarianguru8m.tripod.com/pruebasdesida3.htm Vorvick, L. (02 de Agosto de 2011). MedlinePlus. Recuperado el 15 de Agosto de 2011, de http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/ency/article/003332.htm WHO. (1990). AIDS: proposed WHO criteria for interpreting results from Western blot assays for. 37: 281-288.