CATEDRTICA M.E.M.

Josefina Salomn Cruz

Tcnicas que apoyan el estudio de la Microbiologa

(Tinciones y medios de cultivo)

Equipo 4

IMPORTANCIA DE LAS TECNICAS microbiolgicas

A causa del tamao imperceptible de las bacterias por la falta de contraste que hay entre estos organismos usualmente transparentes y el medio que les rodea existe gran dificultad para observarlos con el microscopio ptico, en su estado natural

QU SON LAS tcnicas de tincin?

Tincin Simple Tincin Diferencial Tincin Rodamina- Auramina Tincin Naranja Acridina Tincin Gram Tincin de Ziehl Neelsen

TINCIN de Gram

Creada por Hans Christian Gram Se dividen en Gram Positivas y Gram Negativas La coloracin depende de la pared celular

SUSTANCIAS utilizadas
Cristal violeta

Solucin yodada, lugol o solucin Gram

Alcohol etlico al 95

Safranina

TINCIN de Gram

BACTERIAS Gram Positivas

Cocos Gram-positivos Bacilos Gram-positivos

BACTERIAS Gram Negativas

Cocos Gram-negativos Bacilos Gram-negativos

TINCIN de Ziehl Neelsen

Propuesta por Franz Ziehl y Friedrich Neelsen Identifican a las microbacterias acido alcohol resistentes
Mycobacterium tuberculosis visualizacin usando la tincin de Ziehl-Neelsen

SUSTANCIAS utilizadas

Colorante 1: fucsina fenicada (carbolfucsina)

Contracolorante: azul de metileno o verde malaquita

Visualizacin con x1000

BAAR de 1-10m de largo y 0.2-0.6m de ancho

QU ES UN cultivo?
Es un mtodo para la multiplicacin de microorganismos, tales como bacterias , hongos y parsitos, en el que se prepara un medio ptimo para favorecer el proceso deseado

MEDIOS DE CULTIVOS complejos

Composicin de un medio complejo Peptona5g Extracto de carne..3g Cloruro de sodio8g Agar15g Agua1g

MEDIO DE CULTIVO qumicamente definido

Glucosa5g Fosfato de amonio, monobsico..1g Cloruro de sodio (NaCl)..5g Sulfato de magnesio.0.2g Fosfato de potasio bsico..1 Agua.1L

CULTIVO DE ESPECIES anaerbias

Medios reductores
Placas de cultivo en jarras

Tioglicalato de sodio

Eliminacin eficaz de oxigeno y cultivo desarrollado

Se agrega sorbre (con quimicos)

produce hidrogeno y bioxido de carbono

Se agrega mililitros de agua

TCNICAS ESPECIALES de cultivo

Mycobacterium leprae Espiroqueta de la sfilis

Bacterias aerobias con alto o bajo CO2 Bacterias con alto CO2 (capnofilos)
Antes: El proceso de la vela .

actualidad: Bolsas plsticas hermticas y bolsa de qumicos.

MEDIO selectivo
Olwestein-jense

Suprime el crecimiento de bacterias. aisla las bacterias gram negativa. aisla hongos. favorece el crecimiento de las deseadas.

Agar sulfito de bismuto

Agar dextrosada sabouraud con ph 5 Agar sangre telurita

composicin Digestivo pancretico de casena5g Peptona de tejido digestivo -5 g Dextrosa -40g Agar- 15g

MEDIO diferencial
Agar de sangre: identifica streptoccus pyogenes que destruyen eritrocitos,

Desarrollo de bacterias en colonias diferenciadas

Ejemplo:

se manifiesta alrededor de las colonias

Composicin : Digestivo pancretico de casena -15g Peptona de soja - 5g Cloruro sdico-5g Agar-15g

EQUIPO # 4 tinciones y medios de cultivo