Seminario

Interaccin de sulfonamidas con iones metlicos y con nitrito

Facultad de Qumica Universidad de la Repblica Octubre 2010 Marcela Rizzotto

ALGUNAS APLICACIONES DE LAS SULFONAMIDAS Y/O SUS COMPLEJOS METLICOS * Antibacterianos * Inhibidores de anhidrasa carbnica * Actividad superxidodismutasa * Antifngicos * Amplio uso en medicina veterinaria * Reactivos analticos (Posibilidad de contaminacin ambiental)

propiedades antibacterianas estudios en solucin acuosa propiedades antifngicas complejo in metlico

estudios estructurales interaccin con albmina

+
Sulfonamida

test de Ames (mutagenicidad)

nitrito en medio cido

potenciales mutgenos

Allium test (toxicidad) antimutgenos

* Obtencin y propiedades FQ de complejos metlicos de sulfas * Propiedades biolgicas de los complejos obtenidos
antimicrobianas
mutagenicidad (test de Ames) fito y genotoxicidad (Allium test)

* Interaccin sulfas-nitrito en medio cido

Iones metlicos: Hg(II), Co(II), Co(III), Ag(I) Ligandos

R1HN SO 2NHR2

S
H2N SO 2NH2

H2N

SO2NH N

sulfanilamida (SA)

sulfatiazol (HST), como sal sdica: NaST

OCH3 N
S

COOH

H2N

SO2NH

N OCH3

CO

HN

SO2NH N

ftalilsulfatiazol (H2FST)

sulfadimetoxina (HSDM), como sal sdica: NaSDM

Mercurio
* antiguo uso farmacutico * efecto txico acumulativo

Cobalto
* vitamina B12 * catlisis industrial * antimicrobiano

Plata
* antibacteriano * antifngico * antituberculoso

Obtencin de los Complejos Metal-Sulfa: esquema general

M: Hg(II), Co(II), Ag(I)

2 L- (ac) + Mn+ (ac) = M-L (s)

L- (ac) + [Co(II) + H2O2](ac) = Co(III)-L (s)

Complejos sulfa-Hg(II)
H2N
H2N SO 2NH2

S SO2NH N

Sulfanilamida, SA

Sulfatiazol, HST; sal sdica: NaST

En el complejo Hg(SA)2, [C12H14N4S2O4Hg] (slido blanco, 61.8 %), el Namdico sera el responsable de la coordinacin de Hg(II) con sulfanilamida, mientras que en Hg[(ST)2(OH)2], [C18H20N6S4O6Hg] (slido blanco, 99.4 %) la coordinacin del Hg(II) con sulfatiazol sera a travs del Ntiazlico, contrariamente a lo observado en compuestos relacionados. Dos grupos oxhidrilo completan la geometra local tetradrica alrededor del tomo de mercurio. Ambos complejos mostraron mejor actividad antibacteriana contra Escherichia coli que los respectivos ligandos.
S. Bell, E. M. Hure, M. Trap, M. Rizzotto*, E. Sutich, M. Sigrist, V. Moreno "The Interaction between Mercury(II) and Sulfathiazole" Qumica Nova 26 (2003) 188-192.

Complejo Hg(II)-ST muy insoluble en agua: posibilidad de remocin de Hg(II) a partir de agua contaminada NaST (ac), 0,22 mmol
T y luz ambiente

[Hg(HST)2(OH)2] (s) HgCl2 (ac) 0,1 mmol de Hg(II) (ac) (derrame de Hg(II))
Determinacin de mercurio: espectroscopa de absorcin atmica (espectrmetro Perkin-Elmer 3110, con sistema de inyeccin de flujo FIAS 100 Perkin-Elmer), previa mineralizacin de las muestras (alcuotas sobrenadante)

Evolucin del contenido de mercurio (ppm) con el tiempo a partir del agregado de 5 mL de NaST 0,074 M a 5 mL de HgCl2 0,014 M
t (h) 0 Hg total (ppm) en sobrenadante (1 mL) 2445,5 (sobrenadante turbio) 79,06 (sobrenadante turbio) 22,25 (sobrenadante turbio) 8,0 (sobrenadante turbio) 0,7* (sobrenadante turbio) < 0,5 (sobrenadante lmpido) log[Hg(II)] 3,39 1,90 1,35 0,90 - 0,15 < -0,30

4 3

0,5 1 1,5 4 24

log [Hg(II)], ppm

2 1 0 -1 -10

48
72

< 0,5 (sobrenadante lmpido)

< 0,5 (sobrenadante lmpido)

< -0,30
< -0,30

10

20

30 40 t (h)

50

60

70

80

Complejos sulfa-cobalto
Sulfatiazol-Co(II)

S H2N SO2NH N

La reaccin entre sulfatiazol y Co(II) llev a un slido rosa, [CoII(ST)2(H2O)4], (1) el cual, al cabo de 7-10 das en la solucin madre se transform en cristales rojos de [CoII(ST)2(H2O)3]n, (2). El in Co(II) se encuentra en un ambiente octadrico en ambos compuestos. En los espectros IR de ambos se notan deferencias en la regin correspondiente a las seales del grupo amino. La 6ta. posicin en la esfera de coordinacin del Co(II) en (2) la ocupa el grupo amino de otra molcula de sulfatiazol. (1) mostr moderada actividad contra Aspergillus fumigatus (igual que el ligando) y contra Aspergillus flavus (mejor que el ligando, que fue inactivo).

Complejos sulfa-cobalto
Sulfatiazol-Co(II) Estructura de la unidad monomrica (1) y empaquetamiento cristalino (2) en [Co(ST)2(H2O)3]n

(1)

(2)

S. Bell, E. M. Hure, M. Trap, C. Trossero, G. Molina, C. Drogo, P. A. M. Williams, A. M. Atria, J. C. Muoz Acevedo, S. Zacchino, M. Sortino, D. Campagnoli and M. Rizzotto* "Synthesis, Structure and Antifungal Properties of Co (II)-sulfathiazolate complexes" Polyhedron, 2005, 24, 501-509.

Estudios en solucin en el sistema sulfatiazol-Co(II)

Tesina Sebastin Bell (LQ, 2004)
Curvas de equilibrio potenciomtrico para sulfatiazol y sulfatiazol + Co(II) en funcin del NaOH agregado
12 10 8

Grfico de concentracin relativa de especies en el sistema sulfatiazol/Co(II): 2/1, en funcin del p[H], a 25 C, I = 0,10 M (KCl)
sulfatiazol

pH

6 4 2 0 -2,0

sulfatiazol + Co(II)

-1,5

-1,0

-0,5

0,0

0,5

a = moles de base/moles de ligando

Log de las constantes de estabilidad para las especies formadas Entre sulfatiazolato (L) y Co(II) a 25 0.1 C, = 0.10 M (KCl)
_____________________________________________________________________________________

Especie ML ML(OH)

log

____________________________________________________________________________________

[ML]/[L].[M] [ML(OH)]/[L]. [M].[OH]

15,11 7,67

S. Bell, M. Rizzotto*, N. Okulik, A. Jubert "Interaction sulfathiazole-cobalt: potentiometric determination of species". Qumica Nova (2007) 30, N5, 1136-1142.

Complejos sulfa-cobalto
Sulfatiazol-Co(III)
H2N SO2NH

S N

[CoIII(ST)2OH(H2O)3], CoC18H23N6S4O8, slido marrn (60% rendimiento), paramagntico

* Puente superoxo uniendo tomos de Co(III)?? Descartado por Raman * La susceptibilidad magntica, determinada entre 300 y 2 K, disminuy al disminuir la temperatura, indicando un complejo de Co(III) de espn alto, descartndose la transicin de espn. No se obtuvo seal de resonancia paramagntica electrnica entre 100 y 300 K. Estudios biolgicos: Tanto Co(III)-ST como NaST 4,0 mostraron los mismos valores de 3,5 concentracin inhibitoria mnima contra Aspergillus 3,0 fumigatus, lo cual sugiere que la 2,5 actividad podra deberse al sulfatiazol. En contraste, A. 2,0 flavus no fue inhibido por NaST 0 50 100 150 200 250 300 temp, K pero s por el complejo.
, MB
ef

Complejos sulfa-cobalto
Ftalilsulfatiazol, H2FST
Ftalilsulfatiazol-Co(II), [CoII(FST)(H2O)4]2H2O, CoC17H23N3S2O11, slido rosa obtenido por reaccin entre la sulfa y nitrato de Co(II) en medio alcalino. Ligando doblemente deprotonado. Co(II) en ambiente octadrico. Puntos de coordinacin FST-Co(II): N tiazlico y sulfonamdico. Mostr actividad antibacteriana similar al H2FST. La anticndida, si bien moderada, fue mejor que la del ligando libre (H2FST inactivo). No se pudo analizar su interaccin con ASB por UV-Vis. No mostr mutagenicidad directa en el test de Ames; la fitotoxicidad fue similar a la demostrada por el ftalilsulfatiazol.
Laura Monti, Ana Pontoriero Natalia Mosconi, Cecilia Giulidori, Estela Hure, Patricia A. M. Williams, Mara Victoria Rodrguez, Gabriela Feresin, Daro Campagnoli and Marcela Rizzotto* Synthesis, characterization and antimicrobial properties of a Co(II)-phthalylsulfathiazolate complex Biometals (2010), en prensa

actividad

Complejos sulfa-plata
(tesina Laura Monti, LBT)
H2N SO2NH N

OCH3 N OCH3

sulfadimetoxina, HSDM; sal sdica: NaSDM

* La reaccin entre NaSDM y AgNO3 en solucin acuosa llev a la obtencin de un complejo insoluble en agua, color blanco, cuya frmula molecular correspondi a (AgSDM) [Ag(C12H13N4O4S)] * Los estudios espectroscpicos realizados permiten sugerir que un punto de coordinacin del catin Ag+ es el N heterocclico indicado. * Mostr propiedades fungicidas y fungistticas, mientras que ninguno de los microorganismos ensayados fue sensible al ligando libre (NaSDM).

INTERACCIN CON ALBMINA SRICA BOVINA (ASB)

L k x 10-5 n NaST Co(II)-ST Co(III)-ST 1,40 3 1,21 2 2,60 2 NaSDM 13,77 1

k, (M-1 ): constantes de afinidad ASB-Ligando n: nmero promedio de molculas de ligando unidas por mol de protena NaST y sus complejos de cobalto: Dado que la fluorescencia nativa de la ASB no tiende a cero para concentraciones elevadas de ninguno de los L, stos accederan slo a uno de los triptofanos de la albmina.

Isoterma para para la interaccin NaSDM + ASB

2,4 2,2 2,0 1,8 1,6 1,4 1,2 1,0 0,8 0,6 0,4 0,2 0,0 250

Abs

ASB 25M ASB 25M + 5M AgSDM ASB 25M + 15M AgSDM ASB 25M + 30M AgSDM ASB 25M + 40M AgSDM ASB 25M + 50M AgSDM ASB 25M + 70M AgSDM

AgSDM + ASB: no sigue modelo

275

300

325
(nm)

350

375

400

Capacidad antibacteriana de sulfas seleccionadas y algunos de sus complejos metlicos sulfa-Hg(II)

30

C.I.M, g/mL

20

SA-Hg SA ST-Hg NaST

10

E.coli25922
Bacterias

HC-E.coli

Capacidad antibacteriana de sulfas seleccionadas y algunos de sus complejos metlicos

sulfatiazol-cobalto
ST-Co(II) ST-Co(III) NaST

30

C.I.M, g/mL

20

10

me us ure S.a

ME 922 us re li25 u o S.a E.c

Bacterias

i col -E. 1 LM

i col -E. 2 LM

osa gin eru P.a

Capacidad antibacteriana de sulfas seleccionadas y algunos de sus complejos metlicos ftalilsulfatiazol-Co(II)

FST-Co(II) H2FST

30

Co(II) cefotaxime

C.I.M, g/mL

20

10

me us re .au S

E sM eu ur S.a

2 92 i25 ol E.c

li .co 1-E LM

li .co 2-E LM

a os gin ru .ae P

Bacterias

Capacidad antifngica de sulfas seleccionadas y algunos de sus complejos metlicos

sulfatiazol-cobalto
300 250
ST-Co(II) ST-Co(III) NaST

CIM, g/mL

200 150 100 50

s y te ns e ph s a 0 m tu gro ns isia alis s eu orm iga ica ps pic er nta rum vu rev neof alb tro gy ce f um . f la nig rub me C. C. S. C. A. A A. M. T. T.

hongos patgenos oportunistas humanos

Capacidad antifngica de sulfas seleccionadas y algunos de sus complejos metlicos ftalilsulfatiazol-Co(II)

300 250

CIM, g/mL

200 150 100 50 0

tes s hy n iae rop s lis ma gatus um an m v is i us se ica r tag f or op en bru lbic eo yp ere ige um lav .a . tr .n .g .c .f .f .n . ru .m C C S C A A A M T T

FST-Co(II) H2FST Co(II)

hongos patgenos oportunistas humanos

Capacidad antifngica de sulfas seleccionadas y algunos de sus complejos metlicos sulfadimetoxina-Ag(I)

300 250

CIM, g/mL

200 150 100 50 0

SDM-Ag NaSDM AgNO3

tes hy ns iae rop lis ma gatus um ns v is i us se ica r tag f or ca um i p p e n r o v re alb tro ne gy ce f um . f la nig rub me C. C. S. C. A. A A. M. T. T.

hongos patgenos oportunistas humanos

antifngicos control

14 12 10
ampicilina ketaconazol terbinafina

CIM, g/mL

8 6 4 2 0
tes hy ns e p a m tus gro ns isia f orm alis eu iga us um ev ica ps pic er nta r o v r alb tro ne gy ce f um . f la nig rub me C. C. S. C. A. A A. M. T. T.

hongos patgenos oportunistas humanos

AgSDM
CIM levaduras
CC (g/mL) 101.76 50.88 25.44 12.72 Ca Ct Sc Ca Ct Sc CC (g/mL) 250 125 62.5 31.25

6.36
3.18 1.59 Blanco

15.75
7.875 3.94 Blanco

AgNO3

AgSDM

Ca: Cndida albicans; Ct: Cndida tropicalis; Sc: Saccharomyces cereviciae

Concentracin fungicida mnima: CFM

Aspergillus

Levaduras

Evaluacin de Genotoxicidad/Antigenotoxicidad

Estudios a Corto Plazo

Estudios a Largo Plazo en animales

Altamente predictivos de carcinogenicidad

Evaluacin de capacidad genotxica/antigenotxica

Pruebas a corto plazo * Test de mutaciones gnicas en bacterias # Test de Ames

* Test de mutaciones cromosmicas

# Aberraciones cromosmicas en vegetales Test de Allium cepa # Formacin de microncleos en clulas vegetales Test de Allium cepa

Test de Ames
Salmonella typhimurium TA98 TA100

MUTGENO

His dependientes (sin His la cepa no crece)

His independientes (sin His la cepa crece: colonias revertidas

Cepas de Salmonella typhimurium empleadas en este trabajo Cepa Tipo de ejemplos de mutgenos mutgenos que detecta Mutgenos * 2-nitrofluoreno que producen corrimiento NO2 del marco de * nitrosoderivados de aminas lectura
aromticas carcinognicas

TA98
hisD3052

TA100
hisG46

Mutgenos que producen sustitucin de pares de bases

NaN3, aflatoxina B1

Test de Ames
CEPA BACTERIANA (S. typhimurium TA 98 y TA 100)

+/-S9

Diversas concentraciones de muestra (dosis crecientes)

MEDIO MINIMO

INCUBACIN RESULTADOS

Control negativo

.. ..

A MAYOR DOSIS DE MUESTRA MAYOR N MUTANTES (mayor actividad mutagnica)

Expresin de resultados
* curva dosis respuesta: N revertantes/placa vs dosis * C.R.: N revertantes placa ensayada/N revertantes placa control CR 2 significa material mutagnico
Revertantes por placa (miles)

Maron, D.M. and Ames, B. (1983). Mutation Research 113, 173-215. g mutgeno por placa

ENSAYO DE REVERSION CON LA CEPA TA100 DE Salmonella typhimurium

control (sin mutgeno)

con azida sdica

Test de Allium cepa Ventajas

* Sistema eucariota, con estrecha relacin con sistemas animales y humanos. Las plantas tienen una activacin metablica, semejante
a animales y una capacidad de reparar su DNA ante alteraciones genticas por mecanismos similares a los humanos.

* Simplicidad en el manejo de las tcnicas, realizables en cortos perodos de tiempo

* Rpidos resultados
* Bajo costo * Alta sensibilidad

* Las plantas pueden manifestar efectos genotxicos y daos fisiolgicos visibles causados por sobredosis. Estos parmetros
secundarios pueden ser usados para determinar la dosis apropiada para los mutgenos y antimutgenos usados en experimentacin.

Tcnica operatoria
Bulbos de cebolla amarilla, limpios, sin catfilas externas, 48 h en agua mineral

24 horas en sustancia a ensayar (2-4 ciclos de divisin celular) + control positivo (K2Cr2O7 1-100 ppm) + control negativo
Anlisis macroscpico * Fitotoxicidad: LC50: concentracin inhibitoria de longitud de races al 50%. Anomalas (necrosis, tumores, ganchos ,etc.) Anlisis microscpico (MO 400x, 1000x) * Genotoxicidad # aberraciones cromosmicas # microncleos (MN): tratamiento 24 h + 24 h recuperacin

ANALISIS CITOGENETICO

* 5 - 15 pices radiculares (Fijacin: etanol-cido actico (3:1, v:v) durante 18 a 24 horas. Conservacin: etanol 70 % a 4 C.
Para observacin:

* Hidrlisis: HCl 1M a 60 C (5-10 min) o a 25C (20-60 min)

* Tincin: Reactivo de Schiff (15 min, oscuridad). * Preparado: tcnica de aplastado (squash), en orcena actica, o carmn actico. Se analizan 10 campos por muestra, observando microscpicamente 1000 clulas/preparado (5 muestras/dosis: 5000 clulas). Se calcula el ndice mittico ( % IM ), ndice de fases mitticas y frecuencia de anomalas microscpicas (clulas binucleadas, citoplasma granuloso, microncleos, c- mitosis, puentes, cromosomas fragmentados, etc.)

Esquema del ciclo celular

Ciclo celular y condensacin/descondensacin de la cromatina M: mitosis; G1: fase de crecimiento postmittica; D: diferenciacin para formar clulas hsticas, cuyo DNA permanece sin replicarse; G0, R: reembrionalizacin (por ej., en la regeneracin); S: replicacin del DNA; fase premittica

B-C-D. Profase. Comienza la mitosis. Los cromosomas son claramente distinguibles bajo el microscopio ptico. Son de Naturaleza doble. Se comienzan a formar los microtbulos del huso mittico. La membrana nuclear se colapsa totalmente. El nucleolo desaparece.

E. Metafase temprana. El centrmero de cada cromosoma se adhiere a los microtbulos del huso en formacin. Cada cromosoma es conducido hacia el ecuador celular por los microtbulos.

F. Metafase Tarda. Se han completado en este momento las fibras del aparato del huso. Los microtbulos mas cortos se adhieren en el centrmero para conectar cada cromtida con un polo. Otros microtbulos corren de un polo al otro.

G. Anafase. Cada centrmero se divide, lo cual permite la separacin de las cromtidas hermanas. Los microtbulos del aparato del huso guan a las dos cromtidas de cada cromosoma hacia los polos.

H. Telofase Temprana. Se comienzan a condensar vesculas en la nueva placa celular. Comienzan a formarse tambin las nuevas membranas celulares cuando los cromosomas llegan a los polos.

I. Telofase tarda. La nueva membrana nuclear ya est completa y la cromatina de los cromosomas se despliega. Tambin se termina la nueva pared celular entre las dos clulas recin formadas.

Efluentes industriales Tucumn 2008, Dra. Mara Ins Isla y col.

Biotest de Allium cepa utilizando distintas muestras de efluentes:
(1) Control negativo
1 2
3

(2) Muestras de efluentes de las diferentes industrias

(3) Control positivo: K2Cr2O7 100 mg/L

A
B D

Elongacin radicular de Allium cepa tratadas con efluentes industriales luego del perodo de recuperacin de 24 h en agua mineral (A) Efluente de una industria azucarera, (B) Efluente de una industria papelera, (C) Efluente de una industria citrcola, (D) Efluente de una industria minera, (E) Control negativo.

metafase; telofase precoz (1000 X) anafase y telofase normal

C-mitosis

anafase multipolar

Dra. Mara Ins Isla, Instituto de Estudios Vegetales Dr Antonio Rodolfo Sampietro Facultad de Bioqumica, Qumica y Farmacia, Universidad Nacional de Tucumn, Ayacucho 461, 4000 San Miguel de Tucumn, Argentina

A: anafase normal B: anafase con fragmento

C: telofase con 2 puentes y fragmento

Allium test. Aberraciones cromosmicas

observadas en clulas meristemticas de Allium cepa expuestas a agentes qumicos

(A1) Metaphase with chromosome break; (A2) C-metaphases; (A3) Metaphase with chromosome loss; (A4) Binucleated cell in metaphase; (A5)Metaphase with chromosome adherence

Allium test. Aberraciones cromosmicas

observadas en clulas meristemticas de Allium cepa expuestas a agentes qumicos

(B) Normal anaphase; (B1) Anaphase with chromosome bridge; (B2) Anaphase with chromosome breaks; (B3) Anaphase with bridge and chromosome loss; (B4) Anaphase with chromosome loss; (B5) Multipolar anaphase

Allium test. Aberraciones cromosmicas

observadas en clulas meristemticas de Allium cepa expuestas a agentes qumicos

(C) Normal telophase; (C1) Telophase with chromosome bridge; (C2) Telophase with bridge and chromosome loss; (C3) Telophase with chromosome break; (C4) Multipolar telophase; (C5) Multipolar telophase with chromosome bridge.

Allium cepa meristematic cells carrying MN (A) Normal interphase; (A1) micronucleated cell in interphase; (B) Normal prophase; (B1) MN in prophase.

Allium cepa test in environmental monitoring: A review on its application. Daniela Morais Leme, Maria Aparecida Marin-Morales, Dto de Biologia, Instituto de Biociencias, Universidade Estadual Paulista (UNESP), Rio Claro, SP, Brazil; Mutation Research 682 (2009) 7181

Allium cepa meristematic cells carrying MN. (C) Normal metaphase; (C1) MN in metaphase; (D) Normal anaphase; (D1) Anaphase with MN; (E) Normal telophase; (E1) Telophase with MN and chromosome loss.

Allium test en Rosario

Mutagenicidad (test de Ames) del complejo Co(II)-FST

Fitotoxicidad (Allium test) de H2FST y de su complejo de Co(II), Co(II)-FST. Elongacin de races

120

root lenght (% of control)

100 80 60 40 20 0 0,0 0,5 1,0 1,5

Co(II)-PST H2PST

2,0

2,5
6

3,0

log [tested substance], M x 10

Fitotoxicidad (Allium test) de H2PST y de su complejo de Co(II), Co(II)-FST. ndice mittico

9 8 7 6 5 4 3 2 1 0 0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5

6

Co(II)-PST H2PST

mitotic index (%)

3,0

log [tested substance], M x 10

Mitosis en clulas meristemticas de cebolla amarilla, 400x, microscopio ptico (tesina Cecilia Giulidori, en curso)
H2PST

Co(II)-FST

propiedades antibacterianas estudios en solucin acuosa propiedades antifngicas complejo in metlico

estudios estructurales interaccin con albmina

+
Sulfonamida

test de Ames (mutagenicidad)

nitrito en medio cido

potenciales mutgenos

Allium test (toxicidad) antimutgenos

Nitrosacin por interaccin de drogas con nitrito

De 182 drogas analizadas, 173 (95%) formaron compuestos N-nitroso (mutagnicos y/o cancergenos)

La nitrosacin endgena de drogas es, an hoy, un tema ampliamente ignorado

G. Brambilla et al, Mutation Research 635 (2007) 17-52

Mezclas sulfa-nitrito-HCl 1M (sulfatiazol sdico, ftalilsulfatiazol, complejo Co(II)-ST)

Comportamiento mutagnico (test de Ames)

Tesis Claudia Trossero (2005)

Antimutgenos
Tesis Ana Pontoriero, en curso

cido L-ascrbico

Inhibidores de las reacciones de nitrosacin

T verde

Epigalocatequina galato, principal polifenol del t verde

Mutagenicidad del sistema NaST + NaNO2 + HCl 1M

3,0

TA98 TA100

reversion coefficient

2,5 2,0 1,5 1,0 0,5 0,0 0 5 10 15 20 25 30

initial g NaST/plate
(C. Trossero; A. Pontoriero, E. Hure, L. Monti, C. Gorr, N. Mosconi, M. Rizzotto*, G. Caffarena, Reaction mixtures formed by nitrite and selected sulfa-drugs showed mutagenicity in acidic medium Qum. Nova 32, 5 (2009) 1151-1156)

Inhibicin de la mutagenicidad del sistema NaST + NaNO2 + HCl 1M por cido L-ascrbico en el test de Ames

4,0 3,5

reversion coefficient

3,0 2,5 2,0 1,5 1,0 0 500 1000 1500 2000

L-ascorbic acid, nmol/plate

(Pontoriero AC, Rizzotto M* 2010 Inhibition of the mutagenic effects of sulfatiazole-nitrite mixture by Lascorbic acid and green tea AAPS Pharm Sci Tech, Ed. Springer, en prensa)

Inhibicin de la mutagenicidad del sistema NaST + NaNO2 + HCl 1M por cido L-ascrbico en el test de Ames

100 80 60
baja conc. conc. media conc. alta

% inh.

40 20 0 0 1000 2000 3000

4000

L-ascorbic acid, nmol/plate

% inh. = [(CRsinAM - CRconAM)/ (CRsinAM - 1)]100

Inhibicin de la mutagenicidad del sistema NaST + NaNO2 + HCl 1M por extractos de t verde en el test de Ames

100

% mutagenicity inhibition

80 60 40 20 0 0 20 40 60 80

strong green tea (aqueous extract) L/plate

Inhibicin de la mutagenicidad del sistema NaST + NaNO2 + HCl 1M por extractos de t verde en el test de Ames

100

% mutagenicity inhibition

80 60 40 20 0 0 20 40 60 80

green tea aqueous extract (dilution 1/10), L/plate

Mutagenicidad del complejo Co(III)-ST en el test de Ames

180 160 140

revertants/plate

120 100 80 60 40 20 0 0 100 200 300 400 500 600 Co(III)-ST, nmol/plate
TA98 TA100

Mutagenicidad del sistema Co(III)-ST + NaNO2 + HCl 1M en el test de Ames

TA98 TA100

Coeficiente de reversin

5 4 3 2 1 0 200 400 600 800 1000 1200 [ST-Co(III)]0, nmol/placa

Inhibicin de la mutagenicidad del sistema Co(III)-ST + NaNO2 + HCl 1M por cido L-ascrbico en el test de Ames

120

TA98 TA100

% inhibicin mutagenicidad

100 80 60 40 20 0 0 500 1000 1500 2000

cido L-ascrbico, nmol/placa

Fitotoxicidad (Allium test) de ST-Co(III) y de su mezcla con nitrito en medio cido. Elongacin de races

120

ST-Co(III) + nitrito ST-Co(III)

% elongacin races

100 80 60 40 20 0 -50 0 50 100 150 200 250 300 350

[ST-Co(III)]0, M x 10-6

glibenclamida (glib)

Mutagenicidad del sistema glib + NaNO2 + HCl 1M en el test de Ames

250
TA98 TA100

2,0

N revertantes/placa

200 150 100 50 0 -20

C.R.

1,5

1,0

0,5

0,0

20

40

60

80

100 120 140

500

1000

1500

2000

[glibenclamida]0, nmol/placa

[glibenclamida]0, nmol/placa

Fitotoxicidad (Allium test) de glibenclamida y de su mezcla con nitrito en medio cido. Elongacin de races

200 180
glib+nitrito glibenclamida

% elongacin races

160 140 120 100 80 60 40 20

0 10 20 30 40

[glibenclamida]0, M x 10-6

Comparacin de IM para las distintas sustancias ensayadas con el Allium test

60

ndices mitticos x 1000

50 agua m ineral K2Cr2O7 NaNO2 ST-Co(III) ST-Co(III) + nitrito glibenclam ida glib + nitrito

40

30

20

10

metafases

anafases

telofases

IM total

Fases Mitticas

Aberraciones cromosmicas detectadas en las mezclas de nitrito en medio cido con Co(III)-ST (a) y con glibenclamida (b)

(a) Co(III)-ST + nitrito (b) glib + nitrito

Aspectos destacables
* Un punto de coordinacin metal-sulfa es el N heterocclico y/o sulfonamdico * Los complejos mostraron en general igual o mejor capacidad antimicrobiana que los respectivos ligandos * La mutagenicidad de la mezcla sulfatiazol-nitrito en medio cido fue inhibida por cido L-ascrbico y por extractos de t verde.

Agradecimientos
* Grupo de Investigacin
Lic. BT. Ana Pontoriero (tesista) Bioq. Estela Hure (tesista) Lic. BT. Laura Monti Bach. Univ. Cecilia Giulidori (tesinista) Bach. Univ. Natalia Mosconi

Instituciones
* FCByF, FCM, CIC-UNR * CONICET, beca Tipo I Lic. Ana Pontoriero * Fundacin Josefina Prats

Colaboradores
* Dra. Ana Mara Atria (UChile) * Dra. Patricia A. M. Williams (UNLP) * Dra. Susana Zacchino (UNR)

Muchas gracias