Análisis Instrumental

ESPECTROSCOPÍA DE ABSORCIÓN MOLECULAR

UV-VISIBLE
 Integrantes:
Chunab Rejón Fátima Aralé
Dzul Piste Aldair
Jiménez Heriberto
Manzo Olán Gerardo Edel
Márquez Aarón

Profesor: Dr. Enrique Sauri Duch

INTRODUCCIÓN A LAS
TÉCNICAS CARACTERISTICAS DE LA
ESPECTROSCOPICAS RADIACIÓN
ELECTROMAGNETICA.

FUNDAMENTO DE LAS
TÉCNICAS INTERACCIONES
ESPECTROSCOPICAS ESPECTROSCOPICAS DE LA
RADIACION
ELECTROMAGNETICA Y LA
CLASIFICACIÓN DE LAS MATERIA
TÉCNICAS
ESPECTROSCÓPICAS

SEGÚN EL TIPO DE Absorción Emisión

FENOMENO Fotoluminiscencia
ESPECTROSCOPICO Quimioluminiscencia
SEGÚN LA NATURALEZA DE
LA ESPECIE QUIMICA Atómicas
INVOLUCRADA Moleculares

SEGÚN LA REGIÓN DEL Microondas Infrarrojo

ESPECTRO UV-visible
Rayos X
GLOSARIO:
Espectro. Gráfico que representa la radiación
absorbida o emitida en función de la frecuencia o
longitud de onda.
Onda transversal. Onda en la que la dirección de
oscilación es perpendicular a la dirección de
propagación.

FUNDAMENTO:
Las técnicas espectroscópicas se basan en los
fenómenos de absorción y emisión de energía que
tienen lugar en la interacción entre la radiación
electromagnética y la materia.
Se trata de un conjunto de técnicas que abarcan
conjuntamente un amplio campo de aplicación, son
fácilmente automatizables y ofrecen una
relativamente alta rapidez de operación
¿ Técnicas espectroscópicas?
Las técnicas espectroscópicas se basan en
los fenómenos de absorción y emisión de
energía que tienen lugar en la interacción
entre la radiación electromagnética y la
materia.
Se trata de un conjunto de técnicas que
abarcan conjuntamente un amplio campo
de aplicación, son fácilmente
automatizables y ofrecen una relativamente
alta rapidez de operación.
 Un poco de historia: los orígenes de la
espectroscopía
Los fundamentos de la espectroscopía hunden sus raíces
en el siglo XVII, cuando Isaac Newton observó cómo la
luz blanca del Sol era descompuesta al atravesar un
prisma dando lugar a los colores del espectro visible.
Newton postuló asimismo que los cuerpos opacos, al ser
iluminados, reflejan toda o parte de la luz incidente,
dando lugar así al color con el que se perciben.
A principios del siglo XIX el óptico alemán Joseph
Fraunhofer estudió el espectro solar identificando unas Figura 6.1
600 líneas oscuras, comprobando que eran inherentes a Espectro solar con algunas de las
la fuente de luz, el Sol. Estudió asimismo el espectro de líneas más intensas de las
otras estrellas descubriendo que la distribución de líneas identificadas por
oscuras no era la misma en todos los casos. También Fraunhofer
descubrió que el espectro de la luz proveniente de la
Luna y otros planetas del sistema solar tenían el mismo
patrón que la luz del Sol, demostrando así que se trata
de luz solar reflejada en estos cuerpos celestes
 ¿ Qué es una radiación electromagnética?
Las radiaciones electromagnéticas pueden
definirse como aquellos procesos en los que se
emite energía bajo la forma de ondas o
partículas materiales y pueden propagarse
tanto a través de un medio material como en
el vacío.

Otra definición:
La radiación electromagnética es una
combinación de campos eléctricos y
magnéticos oscilantes, que se propagan a
través del espacio transportando energía de un
lugar a otro. A diferencia de otros tipos de
onda, como el sonido, que necesitan un medio
material para propagarse, la radiación
electromagnética se puede propagar en el vacío
Características de la radiación
electromagnética:
La radiación electromagnética
es una forma de energía
radiante constituida por un
campo eléctrico y un campo
magnético combinados que
oscilan en forma de onda
transversal y que se
transmite en el espacio a una
velocidad aproximada de Figura 6.3 Representación de una onda
300.000 km/s electromagnética
 La radiación electromagnética puede entonces ser descrita
mediante los parámetros característicos de una onda:
Amplitud (A): es el valor de la elongación máxima de la onda.
Periodo (T): es el tiempo que dura una oscilación completa de la onda.
• Longitud de onda (𝜆): es la distancia entre dos puntos consecutivos de la
onda que estén en fase, es decir, que presenten el mismo valor de la magnitud
que oscila.
• Frecuencia (v): es el número de veces que una onda oscila por unidad de
tiempo; es una propiedad constante de la radiación, independiente del medio de
propagación.
• Número de onda (v= 1/𝜆 ): es el número de veces que vibra una onda en una
unidad de longitud. Se utiliza para caracterizar la radiación electromagnética en
determinadas espectroscopías en lugar de la frecuencia o la longitud de onda.
• Velocidad de propagación de la onda (V)
 Relación entre Frecuencia y Longitud de
Onda:
A mayor frecuencia, menor es la longitud de
onda y cuando la frecuencia es menor, mayor
es la longitud de onda. La velocidad de
propagación de una onda, se puede medir
como el tiempo que transcurre desde que es
emitida hasta que se recibe.
Todas las ondas electromagnéticas se propagan
en el vacío a una velocidad constante de
300.000.000 m/s, la velocidad de la luz. Debido
a la poca diferencia que existe entre la
velocidad de propagación en el vacío y en el
aire, se considera que en el aire también se
propagan a una velocidad de 300.000.000 m/s.
Longitud de Onda, Frecuencia y
velocidad de propagación
 Relación entre Frecuencia y Longitud
de Onda:
Si conocemos la velocidad de transmisión de una onda (λ) y su frecuencia (f),
podemos calcular la longitud de onda (λ) a partir de la siguiente relación:

Si sabemos que una onda electromagnética tiene una frecuencia de 20000 Hz, su
longitud de onda en el vacío puede calcularse como:
¿ Qué es el espectro electromagnético?
El espectro electromagnético es el conjunto de longitudes de onda de todas las
radiaciones electromagnéticas.
Incluye:
Los rayos gamma
tienen las longitudes de onda más
cortas y las frecuencias más altas
conocidas. Son ondas de alta
energía capaces de viajar a larga
distancia a través del aire y son las
más penetrantes.
Los rayos X 
tienen longitudes de onda más largas que los rayos gamma,
pero menores que la radiación ultravioleta y por lo tanto su
energía es mayor que la de estos últimos. Se utilizan en
diversas aplicaciones científicas e industriales, pero
principalmente utilizan en la medicina como la radiografía.
Consisten en una forma de radiación ionizante y como tal
pueden ser peligrosos. Los rayos X son emitidos por
electrones del exterior del núcleo, mientras que los rayos
gamma son emitidos por el núcleo.
La radiación ultravioleta (UV) se
define como la porción del espectro
electromagnético que se encuentra
entre los rayos X y la luz visible.
Para más información haga clic
aquí.
La radiación infrarroja (IR)
también radiación térmica es la
parte del espectro electromagnético
que se encuentra entre la luz visible
y las microondas. La fuente natural
más importante de radiación
infrarroja es el Sol.
La luz visible también espectro
visible es la parte de espectro
electromagnético que los ojos
humanos son capaces de detectar.
Cubre todos los colores del azul a
400 nm al rojo a 700 nm. La luz
azul contiene más energía que la
roja.
Las ondas radioeléctricas tienen
longitudes de onda largas que
varían unos pocos centímetros a
miles de kilómetros de longitud.
Sus principales usos son en la
televisión, los teléfonos móviles y
las comunicaciones por radio.
 ¿Cuáles son las principales zonas del espectro
electromagnético que se suelen utilizar para realizar análisis
cualitativos y cuantitativos?

Espectroscopía Espectroscopía atómica

Molecular
• Ultravioleta visible • Con mercurio (en la
(180 – 800 nm) tabla se ejemplifica)
• Infrarrojo medio
(4000-400 cm-1)
 “Intervalos de longitud de onda que cubre
el visible, el infrarrojo y el ultravioleta”
Espectro visible :
Es el espectro de radiación electromagnética que es visible para el ojo humano. Cuando estamos
viendo un objeto, es porque ese objeto está siendo iluminado por la luz visible. El intervalo visible se
considera de los 380 a los 750 nm.
Todos los cuerpos emiten radiación electromagnética cuya frecuencia depende de la temperatura a la
que se encuentren: a mayor energía mayor frecuencia.
Las ondas infrarrojas están entre el intervalo de 0,7 a 100 micrómetros.
Esta radiación se asocia generalmente con el calor.
Ultravioleta
La luz ultravioleta cubre el intervalo de 4 a 400 nanómetros. El Sol es una importante fuente emisora
de esta radiación, la cual causa cáncer de piel en exposiciones prolongadas. Este tipo de onda se usa
en aplicaciones del campo de la medicina.
 “Ejemplos de cambios o fenómenos que pueden ocurrir
cuando una radiación electromagnética interaccione con
materia”

Existen dos tipos de radiaciones, las radiaciones no ionizantes y las ionizantes. Las no
ionizantes tienen niveles de energía no suficientes para ionizar o para romper enlaces
químicos.
Las radiaciones ionizantes, en cambio, tienen niveles de energía suficientes para ionizar
los átomos de la materia sobre la que inciden y pueden excitar y romper enlaces químicos
en moléculas orgánicas. 
“Ejemplos de cambios o fenómenos que pueden ocurrir cuando
una radiación electromagnética interaccione con materia”
 Radiación electromagnética
monocromática
La radiación monocromática es radiación
electromagnética con una única frecuencia
constante .
Cuando esa frecuencia es parte del espectro
visible (o cerca de él) , a menudo se usa el
término luz monocromática . La luz
monocromática es percibida por el ojo
humano como un color espectral .
Cuando la radiación monocromática se
propaga a través del vacío o de un medio
transparente homogéneo, tiene una sola
longitud de onda constante .
 Radiación electromagnética Policromática

Luz policromática:
La que contiene radiaciones
electromagnéticas de diferentes
longitudes de onda. Cada longitud
de onda equivale a un color.
 Refracción de la luz
Cuando se introduce un lápiz en un vaso lleno de
agua se observa que este parece estar partido. Si
se pone una lupa a la luz del Sol o de una bombilla
se observa que el rayo cambia de dirección. Estos
son fenómenos de refracción.
La refracción de la luz consiste en el cambio de
dirección que experimenta el rayo luminoso al
pasar de un medio a otro.
Si la luz pasa de un medio a otro disminuyendo su
velocidad, el rayo refractado se acerca a la
normal, si es al contrario se aleja. Comprueba
esta afirmación con la siguiente actividad
interactiva.
 POLARIZACIÓN DEA# POLARIZACIÓN DE LA LUZ”

De acuerdo con el modelo clásico la luz es una onda transversal electromagnética que puede
viajar en el vacío, como se muestra en la siguiente figura dicha onda tiene una componente
eléctrica (en azul) y una componente magnética (en rojo) cuyas direcciones forman un
ángulo de 90°.

Las vibraciones eléctricas y magnéticas de una onda luminosa se producen en varios planos, una onda
luminosa que vibra en más de un plano es una onda no polarizada, dentro de las ondas luminosas no
polarizadas se encuentra la luz emitida por una vela o un bombillo, la luz no polarizada puede
transformarse en luz polarizada confinando sus vibraciones a un solo plano empleando diversos
métodos (transmisión, reflexión y refracción).

La polarización es entonces el fenómeno en el que las ondas de luz u otra radiación están restringidas a
una dirección de vibración, es una propiedad de las ondas que describe la orientación de sus
oscilaciones.
 Fluorescencia
• La fluorescencia es la propiedad de algunos átomos y moléculas de absorber luz a una longitud de
onda determinada (la excitación: Ex) seguido por la emisión (Em) de luz de corta duración a una
longitud de onda más larga (figura 2). La distancia entre los picos de excitación y de emisión se
conoce como desplazamiento de Stokes y depende del fluoróforo (figura 1).
• La fluorescencia implica una fuente de luz externa para excitar la muestra a una longitud de onda
en particular. Cuando se excita a la longitud de onda adecuada, la molécula pasa de un estado
básico a otro excitado. A medida que la molécula vuelve al estado fundamental, se libera energía
en forma de calor (pérdida de energía) y luz a una longitud de onda diferente de menor energía
(figura 3)
Variables que afectan:
1.- Rendimiento cuántico: El rendimiento cuántico o la eficacia cuántica de la fluorescencia es
simplemente las relación entre el número de moléculas que emiten fluorescencia respecto al
número total de moléculas excitadas.

2.- Estructura: La fluorescencia más intensa y la más útil es la que presentan los compuestos
que contienen grupos funcionales aromáticos.

3.- Rigidez estructural: Empíricamente se encuentra que la fluorescencia está particularmente

favorecida en moléculas que poseen estructuras rígidas.

4.- Temperatura y disolvente: La eficacia cuántica de la fluorescencia disminuye en muchas moléculas con el
aumento de la temperatura, ya que el aumento de la frecuencia de las colisiones a temperatura elevada hace
aumentar la probabilidad de desactivación no radiante ( conversión externa ). Una disminución en la
viscosidad del disolvente también aumenta la probabilidad de conversión externa y produce el mismo
resultado
 Fosforescencia
Es el fenómeno en el cual el fotón es absorbido, excitando un electrón hacia un
nivel de energía mayor y luego al volver el electrón al nivel de energía que le
corresponde, libera el fotón. En el caso de la fosforescencia, la energía aportada
por el fotón trasladaría al electrón a un estado de excitación de energía
metaestable, en el cual permanece por un cierto tiempo, ya que no puede
regresar inmediatamente a Su estado de reposo.
Cuando una determinada cantidad de tiempo pasa, el electrón vuelve a su
estado original emitiendo luz en el proceso.
Espectrofotometría de absorción
La espectroscopia de absorción se refiere a técnicas espectroscópicas que miden
la absorción de radiación, en función de la frecuencia o longitud de onda, debido
a su interacción con una muestra. La muestra absorbe energía, es decir, fotones,
del campo radiante. La intensidad de la absorción varía en función de la
frecuencia y esta variación es el espectro de absorción. La espectroscopia de
absorción se realiza a través del espectro electromagnético.
 La espectroscopia de absorción también se emplea en estudios de física
molecular y atómica, espectroscopia astronómica y teledetección.
Los siguientes son los tipos principales
de espectroscopia de absorción
APLICACIONES
• La espectroscopia de absorción es útil en el análisis químico 5​debido a su
especificidad y su naturaleza cuantitativa. La especificidad de los espectros de
absorción permite que los compuestos se distingan entre sí en una mezcla, lo que
hace que la espectroscopia de absorción sea útil en una amplia variedad de
aplicaciones. Por ejemplo, los analizadores de gases infrarrojos se pueden utilizar
para identificar la presencia de contaminantes en el aire, distinguiendo el
contaminante del nitrógeno, oxígeno, agua y otros componentes esperados.
• La especificidad también permite identificar muestras desconocidas comparando
un espectro medido con una biblioteca de espectros de referencia. En muchos
casos, es posible determinar información cualitativa sobre una muestra incluso si
no está en una biblioteca. Los espectros infrarrojos, por ejemplo, tienen bandas de
absorción características que indican si están presentes enlaces carbono-hidrógeno
o carbono-oxígeno.
Espectrofotometría de emisión
La espectrometría de emisión es una técnica espectroscópica que analiza las
longitudes de onda de los fotones emitidos por los átomos o moléculas durante su
transición desde un estado excitado a un estado de inferior energía. Cada
elemento emite un conjunto característico de longitudes de onda discretas en
función de su estructura electrónica. Mediante la observación de estas longitudes
de onda puede determinarse la composición elemental de la muestra.
Hay muchas maneras en que los átomos pueden ser llevados a un estado
excitado. El método más simple es calentar la muestra a una temperatura alta,
produciéndose las excitaciones debido a las colisiones entre átomos de la
muestra. Este método se utiliza en la espectrometría de emisión de llama
TÉCNICA EXPERIMENTAL EN LA
ESPECTROMETRÍA DE EMISIÓN POR LLAMA

• La solución que contiene la sustancia que va a ser analizada se conduce al

quemador y se dispersa en la llama como un spray fino. El solvente se evapora
en primer lugar, dejando partículas sólidas finamente divididas que se
desplazan a la región más caliente de la llama, donde se producen átomos e
iones gaseosos. Los electrones son entonces excitados, tal como se describió más
arriba. Es común usar un monocromador para permitir una detección fácil.

En un nivel simple, la espectrometría de emisión por llama se puede observar

utilizando sólo un mechero Bunsen y muestras de metales. Por ejemplo, el
metal sodio colocado en la llama se iluminará de amarillo, el metal calcio de
rojo y el cobre creará una llama verde.
Hay cuatro etapas principales durante
la espectrometría de emisión por llama:
• 1. Evaporación: La muestra que contiene partículas metálicas se deshidrata
por el calor de la llama, y el disolvente se evapora.

2. Atomización: En esta etapa, los iones metálicos que se encontraban en el

disolvente se reducen a átomos de metal. Por ejemplo, Mg2 + (aq) + 2e → Mg
(g). Los electrones en los átomos de metal absorben la energía del calor de la
llama y pasan a niveles más altos de energía.
• 3. Excitación: Los electrones en estado basal de los átomos de metal son ahora capaces
de absorber la energía del calor de la llama. El cuanto (cantidad) de energía absorbido
depende de las fuerzas electrostáticas de atracción entre los electrones con carga
negativa y el núcleo de carga positiva. Esto, a su vez, depende del número de protones en
el núcleo. Como los electrones absorben energía, se desplazan a niveles más altos de la
energía y pasan a estado excitado.

4. Emisión de radiación: Los electrones en estado excitado son muy inestables y se

mueven hacia un estado basal con bastante rapidez. Cuando lo hacen, emiten la energía
que absorbieron. Para algunos metales, esta radiación corresponde a longitudes de onda
de luz en la región visible del espectro electromagnético, y se observan como un color
característico del metal. Como los electrones de diferentes niveles de energía son capaces
de absorber luz, el color de la llama será una mezcla de todas las diferentes longitudes
de onda emitidas por los distintos electrones en el átomo de metal que se investiga.
 Espectro de absorción y un espectro de Emisión y su relación
para un mismo compuesto o elemento químico.
Para ilustrar esta relación utilizamos una herramienta flash para visualizar los espectros de
manejo sencillo, tanto de emisión como de absorción, de los elementos químicos que van
desde el hidrógeno, con Z=1, hasta el californio, con Z=98.
Se puede elegir entre el espectro de emisión y el espectro de absorción para cada elementos
registrado en la base de datos, lo que permite ilustrar fácilmente el hecho de que el espectro
de emisión y el espectro de absorción de un mismo elemento son complementarios. Por
ejemplo, si consideramos el caso del fósforo, sus espectros son:

Espectro de emisión del fósforo

Espectro de absorción del fósforo

• El motivo por el cual ambos espectros son complementarios es que las
transiciones electrónicas que dan lugar a ambos espectros son las mismas.
• Cuando nosotros hacemos incidir radiación electromagnética sobre una
muestra de átomos en estado gaseoso y fundamental (en este caso luz visible,
como vemos en los espectros registrados), provocaremos la excitación de los
electrones, esto es, se producirán transiciones electrónicas en las que los
electrones pasan de un nivel inferior a un nivel superior. Los átomos pasarán
de estar en un estado fundamental a un estado excitado. En este proceso los
átomos absorben energía de unas longitudes de onda determinadas para cada
elemento (de ahí que el espectro, tanto de emisión como de absorción de un
elemento, sea su huella dactilar, porque las transiciones electrónicas de cada
átomo son distintas y únicas). Cuando registramos la luz que no ha sido
absorbida por los átomos, lo que obtenemos es el espectro de absorción.
• Si después dejamos que estos átomos excitados se relajen emitiendo la
energía que previamente absorbieron y nuevamente hacemos un registro
de esta radiación, entonces tendremos el espectro de emisión, formado
por líneas discretas. Es lógico, por tanto, que sean complementarios: la
radiación que absorbieron en un principio (y que no estará por tanto
contemplada en el espectro de absorción) es la misma (misma longitud de
onda) que emitirán después para dar el espectro de emisión.
 A modo ilustrativo, les dejamos una secuencia de 3 espectros de emisión: el
hidrógeno (Z=1), el carbono (Z=6) y el cloro (Z=17).
 Dispersión de la luz
La dispersión de la luz es el fenómeno por el cual
distintas longitudes de onda se refractan con ángulos
distintos al atravesar medios materiales.

Sabemos que la velocidad de la luz en el vacío es

constante e independiente de su longitud de onda. Sin
embargo, su velocidad en cualquier otro medio distinto
del vacío sí que depende de la longitud de onda que
tenga.
Esta dependencia se debe a las estructuras moleculares
de los materiales y es la responsable de que, en última
instancia, el índice de refracción dependa de la longitud
de onda. • Índice de refracción de distintos medios en función de la
longitud de onda.
• Las curvas azules de la figura representan la
variación con la longitud de onda del índice de
refracción de distintos cristales. La luz visible se
encuentra en el rango aproximado de 400 - 700
nm
• El ángulo de refracción de un rayo de luz al
atravesar un medio material depende de su
longitud de onda. En el fenómeno de la dispersión
de la luz las distintas longitudes de onda que
componen un rayo tomarán un ángulo de
refracción ligeramente distinto.
• Observa que para que se produzca dispersión la
luz debe estar compuesta por varias longitudes de
onda. A este tipo de luz se la denomina
luz policromática y como ejemplo más claro
podemos señalar la luz que proviene del sol.
 Difracción de la luz

• La difracción es un fenómeno característico

de las ondas que consiste en la dispersión y
curvado aparente de las ondas cuando
encuentran un obstáculo.
• La difracción ocurre en todo tipo de ondas,
desde ondas sonoras, ondas en la superficie
de un fluido y ondas electromagnéticas
como la luz y las ondas de radio.
Bibliografía:
• Kumar, Pranav (2018). Fundamentals and Techniques of Biophysics and Molecular
biology. New Delhi: Pathfinder publication. p. 33. ISBN 978-93-80473-15-4
• ESPECTROMETRIA .COM. Autor: Guillermo Pérez (Biólogo colegiado nº 003257)
revisado el 24 de octubre 2022.
• https://www.quimitube.com/espectro-emision-y-absorcion-distintos-elementos-quimicos/
revisado el 23 de octubre 2022
• https://www.xtal.iqfr.csic.es/Cristalografia/parte_05_2.html revisado el 24 de octubre
2022
• https://www.educaplus.org/luz/espectros.html revisado el 24 de octubre 2022
• (Espectroscopía de Fluorescencia de Tiempos de Vida Media (FTVM) | Universidad de
Burgos, s. f.)