fluorescentes (isotiocianato de fluoresceína, rodamina B de lisamina o ácido 1-dimetilaminonaftalen-5- sulfónico) con anticuerpos o antígenos, exponiendo después este conjugado a los antígenos correspondientes en cortes de tejidos, frotis de microorganismos, o cultivos de tejidos en capa única. ventajas Rápida No es necesario realizar cultivos. Se puede identificar microorganismos específicos en un grupo mixto. Determina la identidad de un organismo muerto. desventajas Costos en reactivo y equipo Debe ser realizado por personal muy especializado. Los resultados no son 100% específicos TÉCNICA DIRECTA Sobre un porta depositamos una muestra en la que buscamos la presencia de un determinado antígeno. Añadimos un suero específico del antígeno problema marcado con isotiocinato de fluoresceína (conjugado). Si el antígeno problema se encuentra presente en la muestra, se une el conjugado. En caso contrario el conjugado se elimina con un lavado del porta. TÉCNICA INDIRECTA Sobre un porta que lleva pegado un antígeno conocido, añadimos el suero problema. Si éste contiene anticuerpos específicos, se unen al antígeno. Los anticuerpos del suero no específicos del antígeno del porta se eliminan mediante un lavado. Posteriormente se añade un suero anti- inmunoglobulina humana marcada con isotiocianato de fluoresceína (conjugado). El conjugado se une a los anticuerpos específicos o se elimina mediante lavado había anticuerpos específicos en el suero. Cuando la reacción es positiva y se expone a la luz ultravioleta se producirá fluorescencia observable bajo el microscopio de inmunofluorescencia Usos Esta técnica tiene múltiples aplicaciones en diagnóstico e investigación. Se ha utilizado en estudios bacteriológicos, virales, parasitológicos, así como en el diagnostico de enfermedades autoinmunes