BIOQUÍMICA II

REPLICACIÓN DEL ADN

M.C. ALFONSO DÁVILA LULE

 Replicación
DNA

Transcripción

Transcripción reversa

Traducción

Proteína
 Replicación
 Es el proceso por el cual el DNA madre
se copia y resultan dos moléculas de
DNA hijas exactamente iguales.
 Este proceso ocurre en la fase S (Síntesis)
del ciclo celular
¿Por qué se debe replicar el ADN?

Sin la replicación , las especies no podrían

sobrevivir y los individuos no podrían crecer ni
reproducirse satisfactoriamente.
La replicación es el proceso en el cual el ADN
se reproduce como lo es la mitosis para la
división celular o la meiosis para los gametos.
Características de la replicación
 Carácter semi-conservador
 Realización simultánea en ambas hebras, de forma
secuencial y bidireccional.
 Origen multifocal.
 Carácter semidiscontinuo
 Carácter semi-conservador
La replicación
Molécula de DNA semiconservadora es
progenitora coherente con el
modelo de doble
Nuevos nucleótidos hélice

Hebra
Conservadores Dispersante Semiconservadora nueva
Hebra
nueva

Hebra Hebra Hebra Hebra

hija paterna paterna hija
Síntesis simultánea, secuencial y
bidireccional.

(Luque et al., 2006)

 Requerimientos
 Molde o plantilla ADNA
 Cebador (primer) – fragmento pequeño con un
extremo 3’, comúnmente RNA, que se une al
DNA molde de forma complementaria y
antiparalela.
 nucleótidos.
Proteínas mas importantes

Helicasa Proteínas SSB Primasas

Topoisomerasas

ADN polimerasa III ADN polimerasa I Ligasa

Helicasa

 Rompe los puentes de

hidrógeno
que unen las
bases nitrogenadas.
 Esta enzima esta encargada de
separar la doble hebra de tal forma
que se puedan formar los primers y
luego se lleve a cabo la replicación.
Proteínas SSB (Single Strand DNA Binding
protein) o RPA
 Conjunto de proteínas encargadas de la
estabilización del ADN monocatenario, impide que
el DNA se renaturice o forme estructuras
secundarias (hairpin).
 Topoisomerasa
 Esta proteína endereza la molécula de ADN
evitando el superenrollamiento.
 Primasas
 Es una enzima que sintetiza
pequeños fragmentos de
RNA, de unos 5 a 10
nucleótidos, conocidos
como cebadores,
complementarios a la hebra
de ADN que se copia
durante la replicación.
“Síntesis de novo”
 Ligasas

 Es una enzima capaz de catalizar la unión entre dos

moléculas, dando lugar a un nuevo enlace químico.
 Une los fragmentos de Okasaki
 DNA polimerasa

 DNA polimerasas
• DNA polimerasa I : eliminación del cebador de
ARN. Reparación del ADN.
• DNA polimerasa II : reparación del ADN.
• DNA polimerasa III : duplicación cromosómica.
Etapas de la replicación
-Iniciación
-Elongación

-Terminación
Iniciación
 Reconocimiento de orígenes de replicación.
 En eucariontes existen numerosos orígenes de
replicación.
 Se inician dos horquillas de replicación de cada
origen (bidireccional).
 Separación de las hebras
 Posicionamiento de la maquinaria para la replicación.
 Elongación
 Crecimiento bidireccional de
las horquillas de replicación.
 Replicación semiconservativa,
semidiscontinua, coordinada.
 Polimerasas: solo pueden
elongar una hebra preexistente
 inicio de la elongación
requiere un cebador.
Dirección de la replicación
 Las DNA polimerasas solo pueden
agregar nucleótidos al extremo 3’ de la
cadena proliferativa.
 Esto implica que las cadenas de ADN
nuevas siempre se alargan en la misma
dirección 5’a 3.
 Los dos moldes de ADN de cadena
siempre son antiparalelos.
 Por lo tanto si la síntesis de un molde se
produce por ejemplo de derecha a
izquierda, la síntesis sobre el otro molde
deberá desarrollarse en dirección
contraria.
 A medida que le ADN se desenrolla , la
cadena molde se expone en dirección
3’5’ y permite una síntesis continua de
la cadena nueva en la dirección 5’3’.
 La cadena donde se produce una
replicación continua, se denomina la
cadena líder.
 La otra cadena molde se expone en
dirección 5’3’ , lo que implica que la
síntesis debe producirse en la dirección
opuesta al desenrollamiento.
 La cadena nueva que sufre replicación
discontinua se denomina cadena
retrasada.
 Los fragmentos cortos de ADN
producidos por la replicación
discontinua se denominan fragmentos
de Okazaki.
Elongación

3’
3’ 5’
5’
3’

5’ 3’
5’
Elongación

3’
3’ 5’

5’
3’

5’ 3’
5’

La DNA pol III sintetiza DNA en cadena continua, mientras que en la

cadena retardada la DNA pol III sintetiza los fragmentos de Okazaki
iniciando desde el extremo 3´ del cebador.
Elongación

3’
3’ 5’

5’
Okazaki fragment
3’

5’ 3’ 5’ 3’
5’
Síntesis continua de la cadena 5’ -3’

A T C G A A C C G T T G C A C C G T T G C A C
U A G C T T G G C A A C G T G

Síntesis continua de la cadena en dirección 5'3'. La síntesis de esta cadena no plantea ningún problema. Así,
una vez separadas ambas cadenas, se sintetiza el primer y la ADN pol. III (una de las enzimas que unen los
nucleótidos) va a elongar la cadena en dirección 5'3'.
Elongación
 La replicación en un ojo de replicación
primer
ADN

5’ 3’ 5’
3’
5’
3’

3’
3’ 5’
5’ 3’ 5’
Terminación
 Reconocimiento de terminales de replicación.
Terminación

3’
3’ 5’

5’
3’
5’ 3’5’ 3’5’ 3’
5’

La actividad de exonucleasa de la polimerasa I remueve los primers

 3’
3’

5’
3’
5’ 3’5’ 3’
5’

La DNA Polimerasa I rellena el lugar ocupado por el cebador e inserta bases

correspondientes.
Una ligasa une los extremos de cada fragmento mediante enlace
fosfodiester.
 Replicación

Procariontes

Eucariontes
 Mutación y Reparación de ADN
El material genético se halla en constante peligro de ser alterado no solo
por la acción de diversos agentes ambientales, sino también
espontáneamente, por ejemplo, como consecuencia de errores durante la
replicación. Ello se debe a que cuando se sintetizan las cadenas hijas
suelen insertarse nucleótidos incorrectos, o nucleótidos de menos o de
mas.
 Las mutaciones ocurren al azar, esto se descubrió en un experimento en el
que se hicieron 10 cultivos de 10 (8) células cada uno.
 Las mutaciones pueden afectar a uno (puntuales), unos pocos
(pseudopuntuales) o a un gran número de nucleótidos de una secuencia de
ADN (cromosómicas).
 La ADN polimerasa II puede corregir errores que ella misma comete
mediante una propiedad conocida como lectura de pruebas