CONTROL DEL CRECIMIENTO MICROBIANO

CONTROL DEL CRECIMIENTO MICROBIANO

ANTISEPSIA: eliminación de microorganismos patógenos de tejidos

vivos.

DESINFECCION: eliminación de microorganismos patógenos de

objetos inanimados

ESTERILIZACIÓN: eliminación por separación o muerte de todo

microorganismo viable de un objeto.
 Bacteriostático

Bactericida

Bacteriolítico
Curva de muerte

Factores que afectan el control de los

microorganismos

• El número de microorganismos
• El tiempo de exposición
• La concentración del agente de control
• El tipo de microorganismos
• El estado físico de el microorganismo
• Condiciones ambientales locales
• La temperatura
Efecto de la concentración del agente de
control

supervivientes por ml 3,48

mg/
l
Logaritmo de los

3,7
6m
g/l

3,
96
4,25
4,62 mg/l

m
6,04 mg/l

g/
l
mg/
l

Tiempo (minutos)
Efecto de diferentes concentraciones de fenol
sobre una población de E.coli
ESTERILIZACION POR CALOR

Cinética de esterilización por calor (K): Nº de microorganismos viables/tiempo

Tiempo de reducción decimal: D

Valor Z: Mide el cambio en la tasa de destrucción térmica en relación

con el cambio en la temperatura.
Valores D y z para microorganismos patógenos asociados a alimentos

Microorganismo Substrato D (°C) Minutos z (°C)

Clostridium botulinum buffer fosfato D121 = 0.204 10

Clostridium perfringens Medio de cultivo D90 = 3–5 6–8

(cepa resistente al calor)

Salmonella Pollo D60 = 0.39–0.40 4.9–5.1

Staphylococcus aureus Pollo D60 = 5.17–5.37 5.2–5.8

Pavo D60 = 15.4 6.8
0.5% NaCl D60 = 2.0–2.5 5.6
 La naturaleza del microorganismo

Desinfección por UV
http://www.cepis.ops-oms.org/eswww/fulltext/aguabas/ultravio/ultravio.html
 Condiciones Ambientales

• El calor es más eficaz en un medio ácido

que en uno alcalino.
• La consistencia del material, acuoso o
viscoso, influye marcadamente en la
penetración del agente.
• Las concentraciones altas de carbohidratos
aumentan, por lo general, la resistencia
térmica de los organismos.
 La presencia de materia orgánica extraña reduce
notablemente la eficacia de los agentes antimicrobianos

• No permite que el agente llegue a los

microorganismos
• Se combina con el desinfectante y lo precipita
• Se combina con el desinfectante y lo inactiva
dejando libres concentraciones tan bajas que no
logran el efecto deseado sobre la población
microbiana
 La temperatura

supervivientes por ml 30°C

Logaritmo de los

32
.5°
35°C C
38°C
42°C

Tiempo

Efecto de la temperatura en el control de E.coli

con fenol a una concentración de 4,62 g/l
 Métodos de esterilización

• Calor
• Agentes químicos
• Radiaciones
• Filtración
 CALOR
• Esterilización por calor húmedo:
– Sobrepresión
– Tindalización
• Esterilización por calor seco:
– Horno
– Incineración

Las esporas de Clostridium botulinum son destruidas:

• En 4 a 20 minutos a 120° C en calor húmedo
• En 2 horas de exposición al calor seco.
Calor Húmedo

Autoclave
• La esterilización comienza cuando se ha alcanzado la
temperatura óptima en el interior del aparato (autoclave o
estufa)
• Según el contenido, un autoclave puede requerir tiempos
más largos para alcanzar la temperatura de esterilización.
No se deben esterilizar en el autoclave:

• Sustancias que no se mezclan con el agua porque no pueden

ser alcanzadas por el vapor sobreviviendo los microorganismos
que contengan.
• Sustancias que se alteran o son destruidas por tratamientos
prolongados de calor.
 Pasteurización:
Pasteurización reducción de la población microbiana
(eliminación de microorganismos patógenos). Alimentos

Tipos de pasteurización:
- BAJA: 62 - 68ºC 30 minutos
Proceso discontinuo, volúmenes pequeños, envasados.

- ALTA o H.T.S.T. (high temperature, short time):

72 - 90ºC 15 - 30 segundos

- RELÁMPAGO (“flash”): 88 - 97 ºC 1 - 12 segundos

Sistemas de flujo continuo con intercambiadores de calor
 Tindalización

• Calentamiento del material de 80 a 100° C hasta 1 hora durante

3 días con sucesivos períodos de incubación.
• Se utiliza cuando las sustancias químicas no pueden calentarse
por encima de 100° C sin que resulten dañadas.
• Las esporas resistentes germinarán durante los períodos de
incubación y en la siguiente exposición al calor las células
vegetativas son destruidas.
 Calor Seco
Horno
• La esterilización seca se logra a 160-170 °C por 2-3 hrs.
• El calor seco se utiliza principalmente para esterilizar material de
vidrio y otros materiales sólidos estables al calor.
• Para el material de vidrio de laboratorio se consideran suficientes
dos horas de exposición a 160° C.

Incineración
• La destrucción de los microorganismos por combustión o
cremación.
• En los laboratorios, las ansas de siembra se calientan a la llama
de mecheros Bunsen.
• La incineración también se utiliza en la eliminación de residuos
hospitalarios.
 Radiaciones

• Radiaciones ionizantes
– Rayos gamma
– Rayos catódicos

• Radiaciones no ionizantes
– Luz ultravioleta
 Rayos gamma

• Las radiaciones gamma tienen mucha energía y son

emitidas por ciertos isótopos radiactivos como es el Co60.
• Son difíciles de controlar porque este isótopo emite
constantemente los rayos en todas direcciones.
direcciones
• Estos rayos pueden penetrar materiales,
materiales por lo que un
producto se puede empaquetar primero y después
esterilizar.
Rayos catódicos
• Radiación con haz de electrones
• Se usan para esterilizar material quirúrgico, medicamentos y otros
materiales.
• Ventaja: el material se puede esterilizar después de empacado (ya
que éstas radiaciones penetran las envolturas) y a la temperatura
ambiente.
ambiente
Dosis de radiación absorbida: 1rad = 100erg/g
100 rad = 1Gray (Gy)

Especie biológica D (Gy)

Clostridium botulinum 3300

(G+, esp., anaerob.)
Bacillus subtilis 600
(G+, esp., aerob.)
Salmonella 200
(G-)
Lactobacillus 1200
(G+)
Deinoccocus 2200
radiodurans
(G+)
Aspergillus 500
(hongo)
Saccharomyces 500 Fig. 1. Fracción de supervivencia celular (%) de la cepa D7 de S.
(levadura) cerevisiae frente a radiación gamma.

Dosis letal para humanos: 10 Gy

 Luz ultravioleta

• Radiaciones con longitudes de onda alrededor de 265 nm

son las que tienen mayor eficacia como bactericidas (200 -
295 nm).
• La luz UV tiene poca capacidad para penetrar la materia
por lo que sólo los microorganismos que se encuentran en
la superficie de los objetos que se exponen directamente a
la acción de la luz UV son susceptibles de ser destruídos.

Se usan para reducir la población

microbiana en:
Quirófanos
Cuartos de llenado asépticos en la
industria farmacéutica
Superficies contaminadas en la industria
de alimentos y leche.
Bodegas de carne refrigeradas
Eliminación de microorganismos por separación: FILTRACION
La filtración se utiliza para

• Emulsiones oleosas, aceites, algunos tipos de pomadas.

• soluciones termolábiles: líquidos biológicos (suero de
animales), soluciones de enzimas, algunas vitaminas y
antibióticos.
• Esterilizar soluciones oftálmicas, soluciones intravenosas,
drogas diagnósticas, radiofármacos, medios para cultivos
celulares, y soluciones de antibióticos y vitaminas.
H.E.P.A / U.L.P.A.:

Los filtros H.E.P.A (High efficiency Particulate Air) son filtros descartables de medio
filtrante seco y extendido.
Eficiencia mínima de 99,97 %: (penetración máxima del 0,03 %) en aerosoles de
0,3 micrones generados térmicamente (Norma MILSTD-282).

Los filtros U.L.P.A. (Ultra Low Penetration Air) son filtros con características
similares a los filtros H.E.P.A.
Eficiencia mínima de 99,999 % (penetración máxima inferior al 0,001 %) para
partículas de un tamaño entre 0,1 y 0,2 micrones.

Se utilizan en sectores hospitalario, industria

farmacéutica, industria alimenticia, industria
química, industria veterinaria, cabinas de
pintura, etc.
Agentes desinfectantes