BIOQUÍMICA GENERAL

AMINOÁCIDOS
 Historia
 1806: Louis-Nicolas Vauquelin y Pierre Jean Robiquet - descubrieron el
primer aminoácido “Asparagina” aislado de los espárragos (asparagus)
 1810: Cistina.
 1884: Cisteína
 1820: La glicina y leucina.
 1893: proteínas dan aminoácidos después de una digestión enzimática o
de una hidrólisis ácida
 1902: Emil Fischer y Franz Hofmeister propusieron que las proteínas son
el resultado de la formación de enlaces entre el grupo amino de un
aminoácido y el grupo carboxilo de otro, en una estructura linear
denominada"péptido".
 1935:William Cumming Rose descubrió el último de los 20 aminoácidos
comunes “treonina” y determinó los aminoácidos esenciales .
 1986: se descubrió la selenocisteína (aa proteíco 21)
 2002:pirrolisina (aa proteíco 22)
Unidad 1: aminoácidos, proteínas y
enzimas

Aminoácidos
Enlace
peptídico
(unión
covalente) Polipéptido o
péptido

>50 aa

Proteínas

La secuencia de los a.a. en la cadena peptídica determina el

carácter biológico de la molécula de proteína.
PROPIEDADES FÍSICO-
QUÍMICAS DE LOS
AMINOÁCIDOS
 Estructura
 Unidades estructurales fundamentales de las proteínas.

 α-aminoácido (forman proteínas)

 20 aa conforman las proteínas
 Propiedades ácida y básica
 Grupo R: determina el carácter único de cada aa
 Clasificación: Composición química del
grupo R
• Grupos R: Determinan el carácter único de cada aa

1. Alifáticos (hidrocarburo no

aromáticos)
2. Hidroxilados (-OH)

3. Azufrados (S presente)

4. Acidoamídicos (-COOH adicional

y derivados amidícos)
5. Básicos o alcalinos (-NH2 o un
grupo relacionado)
6. Imínicos (Estructura amínica
segundaria ciclica)
7. Aromáticos (hidrocarburo
aromático)
Clasificación – Composición química del grupo R
Clasificación: Proceso de ionización

Neutros: R no ionizable (sin

carga).

Básico: R ionizable, con carga

positiva (acepta protonones).

Ácido: R ionizable, con carga

negativa (cede protones).
Clasificación: Polaridad

Polar: R hidrofílico, facilmente

solvantado por el agua.

pH 7 (fisiológico)

Polar cargado: carga + o – completa

en el grupo R ionizable.
Polar no cargado: cargas parciales
(dipolos permanentes) de grupos R no
ionizables

Apolar: R hidrofóbico, enlaces apolares

C-C y C-H.
Clasificación
Clasificación: Nutrición Humana
 Clasificación: Posición del grupo NH2
 De acuerdo a la localización del grupo NH2 en la cadena
carbonatada que contiene el grupo COOH.

Alfa (α) Beta (β)

2C

1C

3C

Gamma (γ)
Estereoisomería
• Esteroisómeros:Orientación
de los grupos fijos al carbono
alfa

• Carbono alfa: configuración L

y D (enantiómeros)

• Enantiómeros: Imagenes
Carbono quiral especulares que no se
superponen.

• AA: se diferencian por la

posición del grupo amino y
del H.
 Estereoisomería: Enantiómeros

Importancia Biologica:

Proteínas formadas por L-aminoácidos.

Carácter L condiciona el plegamiento de estos en la estructura segundaria de la

proteína
 Propiedad ácido-base de los
aminoácidos
 Aminoácidos: grupo ácido (-COOH) que cede H+ y grupo básico (-
NH3) que dona H+= Sustancia anfótera.

. PUNTO ISOELÉCTRICO:

 Es el PH en el que el aminoácido tiene tantas cargas positivas

como negativas, es decir que la molécula tiene carga neta cero.

 Cada aminoácido tiene su punto isoeléctrico característico.

 Los aminoácidos pueden tener, por lo tanto, tres estados que

dependen del pH:

 pH < pI - aa protonados (carga +, forma catiónica).

 En el pI - carga neutra (iones dipolares - zwitteriones.
 pH > pI - Carga negativa forma aniónica
 Propiedad ácido-base de los
aminoácidos
 En solución ácida, los aminoácidos se encuentran en la forma con carga
neta positiva, y en la solución alcalina en la forma con carga neta
negativa.

Solución ácida Medio neutro Solución alcalina

Predomina forma básica Predomina forma neutra Predomina forma acida
Carga neta (+) Carga neta (-)
 Propiedad ácido-base de los
aminoácidos
pH
Punto Isoeléctrico
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14

Zwitterion

H + + H+
H H+ H+ H+ H+ H+
H+ H+H+ H+ H+
H +
H +
H+
H+
H+ + +
H H H+ H+
H+ H+ H+ H+
H +
H+
H+ H+
H+
H+ H+
H +
H +
H+ H+
H +
H+ H+ H+
H+ H+ H+
H+ H+ H+
H+ H+ H+
H+
H+
H+ H+ H+ H+ H+
H+ H+ H+ H+ H+
H+ H+

Un AA tiene carga (+) a un pH por debajo de su pI y tiene carga (–) a un pH por encima de su pI.
 Propiedad ácido-base de los
aminoácidos
pKa
Es la magnitud que cuantifica la tendencia que tienen las moléculas de
disociarse en una solución acuosa

Alanina

Cuando se titulan los aminoácidos con NaOH

y HCl puede observarse dos mesetas cuyos
valores corresponden a los pKa de los grupos
alfa carboxilo y alfa amino respectivamente.
 Propiedad ácido-base de los
aminoácidos
Alanina

Forma catiónica Forma aniónica

pI=6,07

pH = pKa=2,34 pH=pKa=9,69

50% grupo carboxilo 50% grupo amino

(COOH) protonado y protonado (NH3+)
50% desprotonado y 50% desprotonado
(COO-) (NH2)
Cálculo del punto isoeléctrico de los
aminoácidos
Punto isoeléctrico - glicina

2,34 + 9,60
pI= = 5,97
2
Propiedad ácido-base de los
aminoácidos
 Propiedad ácido-base de los
aminoácidos

o Capacidad de ionización;
o Importante p/ separación, identificación, cuantificación y
secuenciamiento de aa;
o Alta temperatura de fusión > 200ºC;
o Mayor solubilidad en agua que en solventes orgánicos;
 Propiedadad de los aminoácidos –
Absorbancia (UV)
Aminoácidos aromáticos
O

OH
Fenilalanina
NH2

H2N

HN
OH
Absorven luz UV
280nm= cuantificación de
O
proteínas en disoluciones
Triptófano acuosas

OH

Tirosina NH2
HO

• Resto de aa= espectro UV lejano (214nm)

Propiedadades de los aminoácidos –
Reacciones de identificación
 Las reacciones orgánicas de los aminoácidos son las de sus grupos
funcionales, es decir las reacciones de :

 Los grupos carboxilos.

 Los grupos amino.
 Los grupos R.

 Para que sirve:

 Identificación y análisis de aminoácidos.

 Identificación de la secuencia de aminoácidos en una proteína.

 Identificación de restos de aminoácidos específicos de

proteínas nativas.
 Modificación química de los restos de aminoácidos.

 Síntesis bioquímica de polipéptidos.

Modificaciones de aminoácidos

 Entrelazamiento de
 Grupos R
cadenas polipeptídicas
posiciones
internas
 Cambios actividad
proteíca
 -NH2 y –COOH
extremos de la
 Fijación covalente de
cadena otras sustancias al
polipéptido.
Aminoácidos diferentes de los
Primarios

Derivado de 4 resíduos separados

de lisina, encontrada en la proteína
elastina.

Contiene selenio.

Son intermediarios en la síntese de

la arginina y en el ciclo de la urea
 MÉTODOS DE IDENTIFICACIÓN DE
LOS AMINOÁCIDOS

 Métodos Cromatógrafos: técnica de separación de

sustancias afines.

Pueden aplicarse para:

 Separación, identificación y análisis cuantitativo de
mezclas de aminoácidos.
 Péptidos.

 Proteínas.

Además:
 Nucleótidos.

 Ácidos nucleicos.

 Lípidos.

 Hidratos de carbono.
Cromatografía de papel

Compuestos muy polares o polifuncionales.

Ejemplo: azúcares, aminoácidos y

pigmentos naturales.

Se fundamenta en el fenómeno de partición

en donde la fase estacionaria se halla sobre
un soporte activo (papel – agua) y una fase
movil. Las fases móvil y estacionaria
estarán en contacto en una gran interfase,
lo que permite una rápida obtención de una
distribución de equilibrio del soluto entre
ellas.

Los solutos se separan por sus diferentes

coeficientes de partición.
Cromatografía de papel

La separación se realiza en función

de la afinidad de los solutos con la
fase movil y estacionaria, los más
solubles en agua se quedarán cerca
del punto donde se aplicó la
muestra, y los menos solubles en
agua y más solubles en el
disolvente llegarán más lejos.
 Cromatografía de papel

Los componentes de la
mezcla son distribuidos
en dos fases:

 Una estacionaria.

 Una móvil.
 Cromatografía de papel

1: Aplicación de la muestra
2: Se sumerge el extremo inferior en la fase móvil
3 a 5: La fase móvil asciende por capilaridad y se va produciendo la
separación de los componentes
6: Se marca el frente de avance del disolvente y se deja secar la placa
7: Revelado de los componentes ya separados y medida de su avance
 Cromatografía de papel

Rf es el factor de retardo o
retraso:

Mide la movilidad relativa de cada

componente con respecto al
máximo posible, es decir la
distancia recorrida por el frente de
fase móvil
Cromatografía de papel

Revelación con ninhidrina

Seminario: Métodos de identificación de los
aminoácidos

 Cromatografía de capa delgada.

 Cromatografía de intercambio iónico.

 Cromatografía de exclusión molecular.

 Cromatografía de gases.

 Cromatografía liquida.

 Electrofóresis
Péptidos – Enlace peptídico

•El enlace peptídico es

el enlace covalente más
importante que une los
aminoácidos para
formar péptidos y
proteínas.
• Reacción de
condensación.
 α-amino

Aminoácidos Enlace peptídico Péptido

α-carboxilo

 La unión de
 Dos a 10 resíduos oligopéptidos (dipéptido, tripéptido,tetrapéptido, etc)

 + de 10  polipéptido.

 Los péptidos presentan

 Secuencia lineal de tipo cadena con un grupo -NH 3+ y -COOH- sin reaccionar
Polipéptidos
 Polipéptidos – elementos
estructurales
 1. Identidad de los aa
 2. Cantidades relativas de aa
 3. Secuencia de aa (más importante define la forma
tridimensional y por tanto la función)

Pentapéptido
Serilgliciltirosinila-
lanileucina
Polipéptidos biológicos

Oxitosina: Hormona peptídica

pituitaria – contracciones uterinas
en el parto y liberación de leche
materna.

Vasopresina: Hormona peptídica

pituitaria – ayuda a controlar el
balance de los fluidos en los
humanos, promoviendo la
reabsorción de agua em las células
del riñon.