EFECTOS

PRESENTADO POR:
CITOTÓXICOS DE LOS
LILIANA BLANCO, REMEDIOS ULTRA
JAIRO GUERRERO,
FAUSTO PARRA, DILUIDOS EN LAS
DIANA TRUJILLO
CÉLULAS DEL
CÁNCER DE MAMA
 Los productos naturales ultra-diluidos
cada vez se utilizan mas en el tratamiento
de enfermedadades, entre ellas el cáncer.
Acontinuacion se mostrara un estudio in
vitro. para determinar si los productos
prescritos por una clínica en la India tiene
GENERALIDA algún efecto sobre las líneas celulares del
cáncer de mama.
DES Se estudiaron 4 remedios ultra-diluidos
( Carcinosin , Phytolacca , Conium y Thuja
) contra dos líneas celulares de
adenocarcinoma de mama (MCF-7 y MDA-
MB-231) y una línea celular derivada de
Células epiteliales mamarias humanas
normales inmortalizadas (HMLE).
En 1999, El Instituto Nacional del Cáncer NCI evaluó
un protocolo para el tratamiento del cáncer.
Desarrollado en la Fundación de Investigación
Homeopática P. Banerji. (PBHRF) en Calcuta, India.
El 'protocolo banerji’ utiliza sustancias naturales
específicas ultra-diluidas para tratar pacientes con
diferentes tipos de cáncer.
El NCI revisó 10 pacientes tratados en el Protocolo
de banerji.

4 de los casos con cancer de pulmón y esófago. el

NCI confirmó respuestas parciales.

Todos los pacientes revisado tenía patología

apropiada y estudios de imagen para Confirmar
diagnóstico y respuesta.
Los pacientes solo recibieron los remedios prescritos , ningún
otro tipo de tratamiento convencional adicional, como cirugía,
radiación, o quimioterapia.

Después de una rigurosa evaluación, NCI concluyó que había

suficiente evidencia de eficacia para justificar una mayor
investigación del protocolo de Banerji. Según lo documentado
por la clínica, 21,888 pacientes con tumores malignos que
fueron tratados con el protocolo de Banerjy fueron seguidos en
PBHRF
941 deentre 1990 y 2005.
los pacientes tenían cáncer de mama, el 19% de los
pacientes con tumores malignos retrocedieron completamente
y en el 21% los tumores se mantuvieron estables o mejoraron

Los pacientes con tumores estables, contunieron en

seguimiento durante al menos 2 años y hasta 10 años .
 cambios heredables Sistema que Es clave en la Es factor patogénico
en ADN e histonas controla la expresión producción de en desarrollo de

EPIGENET
que no implican de los genes, sin proteínas y enfermedades
alteraciones en afectar a la diferenciación
secuencia de composición de los celular

ICA
nucleótidos y genes mismos
modifican la
estructura y con
condensación de
cromatina por lo que
alteran la expresión
genética y el
fenotipo

Es por Guiadas por Ofrecen un claro

modificaciones encimas, que mecanismo para
reflexibles y algunas de ellas son medicamentos
selectivas de ADN, genéticamente mal basados en
específicamente por formadas y moléculas pequeñas
histonas que producen como terapia
controlan la enfermedades de personalizada en
transición cromatina enfermedades como
conformacional el cáncer
entre estados inflamatoria,
transcripcionalment metabólica,
e activos e inactivos neurodegenerativa
de cromatina
• NUCLESOMO ES UNA ESTRUCTURA QUE CONSTITUYE UNA UNIDAD FUNDAMENTAL DE
LA CROMATINA QUE ES LA FORMA DE ORGANIZACIÓN DEL ADN EN CÉLULAS
EUCARIÓTICAS NUCLEOSOMA ESTÁ CONSTITUIDO POR PROTEÍNAS HISTONAS Y BASES
NITROGENADAS
• MODIFICACION DE HISTONAS EMPAQUETAN Y CONDENSAN ADN EN CROMOSOMAS
LA MODIFICACIÓN DE ESTAS PROTEÍNAS, AFECTAN A ESTOS PROCESOS DE ACTIVACIÓN
Y DESACTIVAN LA TRANSCRIPCIÓN
• ACETILACION DE HISTONA LAS ENZIMAS SON LAS ACETIL TRANFERAZA Y
DEACETYLASE PERMITE SER QUITADOS LOS RESIDUOS DE LISINA
• METILACIÓN DE HISTONA: TRANSFERENCIA DE C. ADENOCIN, LA TRANSFERENCIA
CATALIZA LOS RESIDUOS DE DESNATURALIZACIÓN POR ENZIMAS
• LA FOSFORILACION DE HISTONA: IMPORTANTE EN LA CONDENSACIÓN DEL CROMOSOMA
EN LA VISIÓN CELULAR MISMA AGREGANDO GRUPO FOSFATO
 • LOS PATRONES DE METILACIÓN SON ESPECÍFICOS PARA CADA
ESPECIE Y TEJIDO
• LA MAQUINARIA IMPLICADA COMPRENDE PROTEÍNAS
REGULADORAS ADN. METIL TRANFERASA, DESMETALIZA PUTATIVA,
PROTEÍNAS, UNIÓN CPG METILADOS, ENZIMAS MODIFICADORAS
DE HISTONAS Y COMPLEJOS REMODELADORES DE CROMATINA
• METILACIÓN DE ADN ES VITAL DE IMPORTANCIA PARA MANTENER
EL SILENCIAMIENTO GÉNICO DEL DESARROLLO NORMAL
• GENOMA NORMAL, INACTIVACIÓN DE CROMOSOMAS
• ENCONTRASTE ALTERACIONES EN ELLAS, ESTÁN IMPLICADAS EN
ENFERMEDADES RELACIONADAS CON DEFECTOS EN EL
DESARROLLO Y PROCESOS NEOPLÁSICOS

METILACIO • EL CONOCIMIENTO DE MODIFICACIONES EPIGENETICOS ES VITAL

PARA EL MANEJO DE ENFERMEDADES

N DEL • LAS MODIFICACIONES EPIGENETICA PUEDEN IMPLICAR

METILACIÓN DE RESIDUOS DE CITOSINA EN EL ADN, CAMBIOS

ADN ESTRUCTURALES DE CROMATINA QUE REGULA LA EXPRESIÓN

GÉNICA
 METILACIÓN DEL ADN

• LA METILACIÓN ES PARTE DE LA DEFENSA PARA REDUCIR LA CANTIDAD DE TRANSFERENCIA

GENÉTICA
• ADICIÓN ENZIMÁTICA DE GRUPO METILO C-5 DE LA CITOSINA
• CÉLULAS SOMÁTICAS CONSTITUYE EL 1% DE BASES DE ADN
• LA METILACIÓN ES EL RESULTADO DE DES METILACIÓN Y METILACIÓN
• METILACIÓN DE ADN SE CATALIZA POR ADN METILTRANSFERAZA SE IDENTIFICAN 2 ENZIMAS,
DE MANTENIMIENTO Y NOBO QUE ES EL INICIO DE LA REPLICACIÓN LAS 2 ENZIMAS SIRVEN
PARA SILENCIAR GENES
• ADICIONALMENTE UN TERCER MIEMBRO CATALIZADOR DOMINA LA ACTIVIDAD CATALÍTICA
REPRIME LA TRANSCRIPCIÓN
 Los remedios ultra-diluidos utilizados
fueron obtenidos de Sharda Boiron
Laboratories Ltd (India) y remedios
similares adicionales obtenidos de Standart
homeopátic Company (Rey de Prusia, PA, EE.
UU.).

MATERIAL Los experimentos se realizaron por triplicado

y se repitieron al menos dos veces en cada
ES Y caso de remedio. Los remedios utilizados y
las diluciones fueron las mismas que las
MÉTODOS prescritas por el PBHRF.

Para el tratamiento del cáncer de mama

humano: Carcinosin 30C; Conium
maculatum 3C; Phytolacca decandra 200C y
Thuja occidentalis 30C. Los remedios se
diluyeron en alcohol al 87 % extra neutro
(solvente)
 Cromatografía líquida de alto rendimiento
(HPLC) para la detección de componentes
químicos en remedios ultra-diluidosLos
medicamentos ultra diluidos pueden tener
agentes químicos, La huella dactilar de los
remedios se realizó con sistemas de HPLC Delta
600 de Waters.

Líneas celulares: Dos líneas celulares de

adenocarcinoma de mama humana, MCF-7 y MDA-
MB-231, se obtuvieron de Colecciónes de Cultivos
Tisulares ( Nansss, VA). Las células MCF-7 que
albergan el gen p53 de tipo salvaje, a su vez son
receptores de estrógenos y progesterona,
mientras que la MDA-MB-231 las células albergan
TODAS LAS LÍNEAS
CELULARES SE INCUBARON A un gen p53 mutante no tienen receptores para
37ºC EN UNA ATMÓSFERA DE
5% DE CO 2 Y 95% DE AIRE. estrógenos y progesterona.

La línea celular de control: nlae, células

epiteliales mamarias humanas
inmortalizadas con la subunidad catalítica
de la telomerasa
Ensayo de bromuro de metiltiazolildifenil-
tetrazolio (MTT).: Las líneas celulares se analizaron
para determinar la viabilidad celular mediante el
ensayo MTT, aproximadamente 5,000 células
cultivadas por triplicado fueron tratadas con los
remedios durante 24, 48, 72 y 96 h.

Preparados citológicos e hibridación in situ

fluorescente. (PEZ). Los remedios tratados y los
cultivos celulares de control fueron tratados con 0,04 l
/ ml de colcemid durante aproximadamente una hora
a 37ºC y luego se procesa en solución hipotónica de
de citrato de sodio al 0,9%. ). Evaluaron los cultivos
por sus índices mitóticos y señales teloméricas de
ADN

Citometría de flujo para la distribución del ciclo

celular y ensayo popular subdiploide. La
progresión del ciclo celular y la apoptosis se analizo
mediante clasificación de células activadas por
fluorescencia (FACS).
Detección de apoptosis mediante
marcaje con anexina V y
citometría de flujo. Las células
tratadas con medicamentos y las células de
control, fueron Cultivados por 72 h.

Inmunotransferencia. La
regulación del ciclo celular y
apoptosis fue detectada por la
técnica de Western blot
La sucución no causa efectos en el
solvente

Los resultados revelaron que los efectos

inhibidores fueron más altas durante el
periodo de tratamiento más largo y
mayor inhibición fue causado por los
remedios que por el disolvente

Carcinosin y Phytolacca decandra

revelaron efectos inhibidores
relativamente más altos, y la
phytolacca mas potente inhibido la
supervivencia de las células cancerosas
ntos con solvente, carcinosina, Phytolacca, Conium o Thuja durante 48 h en diversas concentraciones (0, 1.25, 2.5, 5 y 10 μl / ml). Los valores se obtuvieron en

(A) Ensayo de
viabilidad del
bromuro de
metiltiazolildifenil-
tetrazolio (MTT) de
células HMLE,
MCF-7 y MDA-MB-
231 después de
los tratamientos
con solvente,
Carcinosin,
phytolacca,
conium y thuja
durante 48 h en
diversas
concentraciones
(0, 1.25, 2.5, 5 y
10 μl / ml). Los
valores se
obtuvieron en
forma
independiente.)
Ensayo de
MTT para
determinar
la
viabilidad
de las
células
tratadas
con 5 y 10
μl / ml de
disolvente,
carcinosin,
phytolacca,
conium o
thuja
durante 48
Análisis de la
progresión del
ciclo celular
del HMLE,
MCF-7 y
células MDA-
MB-231
tratadas con 5
μl / ml de
solvente,
carcinosin o
phytolacca
para varios
puntos de
tiempo (24,
48, 72 y 96 h).
Índices
mitóticos de
control. Y
células
tratadas con
carcinosin
MCF-7 y
MDA-MB-
231.
Figura 3. (A) imágenes
representativas de
hibridación in situ de
fluorescencia de ADN
de células de MCF-7 no
tratadas. (B) células
MCF-7 tratadas con
carcinosin. (DO)
células MDA-231 sin
tratar. (D) células MDA-
MB-231 tratadas con
carcinosin. Las células
tratadas se expusieron
a 5 μl / ml de
carcinosin durante 72
h.
Figura 4. Análisis
de transferencia
western de
proteínas
reguladoras del
ciclo celular en
células HMLE,
MCF-7 y MDA-
MB-231,
tratadas con 5 μl
/ ml de
carcinosina o
phytolacca
durante varios
períodos de
tiempo (24, 48 y
72 h)
Figura 5. Diagrama de
densidad de la respuesta
apoptótica en células HMLE,
MCF-7 y MDA-MB-231
tratadas con 5 μl / ml de
carcinosina o phytolacca
durante 72 h. la respuesta
apoptotica se determinó por
clasificación de células
activadas por fluorescencia.
Las células viables están en
el cuadrante inferior
izquierdo, y las células
apoptóticas en etapa
temprana y tardía están en
los cuadrantes inferior
derecho y superior derecho.
Tenga en cuenta el aumento
en las células apoptóticas
tardías MCF-7 y MDA-MB-
231.
Figura 6. Análisis
de transferencia
western de la
escisión de (adp-
ribosa) polimerasa
y caspasa 7
escindida activada
en HMLE tratado
con carcinosina y
fitolacca, células
MCF-7 y MDA-MB-
231.
 • Los remedios homeopáticos ultra diluidos prescriptos en
el protocolo Banerji tienen efectos citotóxicos, contra las
líneas celulares de carcinoma emzt-7 y m de a -43-321,
intervienen en la expresión alterada de las proteínas
reguladoras del ciclo celular, y ciclo G0. induce a la
activación de cascada apoptoxica, y de la muerte celular.
Esto comparando los remedios homeopaticos con el
disolvente, independiente de la dosis.

RESULTAD • Se comprueba que los remedios homeopáticos son

menos tóxicos sobre las células derivadas de endotelio
OS mamario normal y de paso inhibe la proliferación de
células mononucleares en sangre.
• Curiosamente el efecto citotóxico de los remedios
carcinocin, phitolaga apareció similar al taxol fármaco
usado en cáncer de mama en estudio paralelo
• Las células sensibles a estrógenos indican la
dependencia genética y se informa de la falta de
actividad in vitro, en remedios investigados.
 BIBLIOGRAFÍA

1. LEE HWAY, CRAWLEY S, HOKARI R, KWON S, KIM YS. BILE ACID REGULATES MUC2
TRANSCRIPTION IN COLON CANCER CELLS VIA POSITIVE EGFR / PKC / RAS / ERK /
CREB , PI3K / AKT / I Κ B / NF- Κ B AND P38 / MSK1 / CREB PATHWAYS AND NEGATIVE
JNK / C-JUN / AP-1 PATHWAY. INT J ONCOL. 2010;36:941–53.

2. ZHANG T, DAYANANDAN B, ROUILLER I, LAWRENCE EJ, MANDATO CA. GROWTH-

ARREST-SPECIFIC PROTEIN 2 INHIBITS CELL DIVISION IN XENOPUS EMBRYOS. ZOU H,
EDITOR. PLOS ONE [INTERNET]. 2011 SEP 9 [CITED 2019 JUL 13];6(9):E24698.
AVAILABLE FROM: HTTPS://DX.PLOS.ORG/10.1371/JOURNAL.PONE.0024698