INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

OBTENCIÓN DE DNA DE (SPINACIA SP.) ESPINACA E
IDENTIFICACIÓN DE ÁCIDOS NUCLÉICOS EN CAPA FINA
Flores Becerril Alejandro*1 y Ortíz López Ma. Fernanda * *1
1Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, Instituto Politécnico Nacional, Prol. De Carpio y Plan de Ayala s/n, México D.F. C.P. 11340, México.
*floresalejandro41@gmail.com * *mfortizlopez@gmail.com

GRUPO:2OV1 SECCIÓN: 3

INTRODUCCIÓN
Los ácidos nucléicos son moléculas esenciales para las Figura 1.
funciones de las células, en todas ellas existen dos tipos Cromatograma
de ácidos nucleicos: el DNA y RNA. En el DNA se localiza bajo luz Uv.
la información genética de la célula, mientras que
diferentes moléculas de RNA forman parte del mismo y es
el encargado de traducir esta información en las
proteínas que determinan la estructura y la función
celular. Adenina Guanina Timina Citosina Pool DNA Pool RNA Uracilo
En el aislamiento de los ácidos nucleicos deben tomarse en
Tabla 3. RF del cromatograma
cuenta que se debe romper eficazmente la pared y
membrana celular para facilitar la extracción del DNA. RF RF RF RF RF POOL RF POOL RF
Las bases nitrogenadas de loa a. nucleicos absorben luz A G T C DNA RNA U
ultravioleta en una región de 260 a 280 nm. La longitud 2.9 2.2 4.7 1.6 1.6, 2.1, 2.5, 1.7, 2.2, 2.7, 4.2
de onda de máxima absorción de mezclas de las bases 4.9 4.2
comunes es aproximadamente de 260 nm. Esta propiedad RF = Frente de la muestra / Frente del solvente
es muy útil para la detección y análisis cuantitativo de los
nucleósidos, nucleótidos y moléculas de ácidos nucléicos DISCUSIÓN
intactas. En primera parte tenemos los resultados del nomograma
para determinar la cantidad de proteínas y de ácido
nucléico obtenido durante la practica. Como se observa
OBJETIVOS
en la tabla 1, la cantidad de proteínas es 0.03 mg/mL
• Aislar, purificar y caracterizar DNA de Spinacia sp.
menor a la del ácido nucléico el cual fue de 0.30 mg/mL.
(espinaca).
Para determinar la pureza se utilizó la fórmula propuesta
• Separar las bases nitrogenadas del DNA y RNA por
en el manual de laboratorio en donde se utiliza la
cromatografía a partir de hidrolizados de los mismos,
Absorbancia de nuestro problema a 260 nm, entre la
identificándolas por la propiedad que tienen de
absorbancia a 280 nm siendo que, si el resultado es
absorver luz UV.
aproximado a 1.6 nos indica que tenemos DNA, pero si el
resultado es cerca a 1.8, indica que la mayor parte de
RESULTADOS
nuestro problema es RNA. El resultado obtenido fue de
Tabla 1. Resultados del nomograma
1.42, lo cual nos indica que se tiene el DNA, pero no está
ABS 280 ABS 260 PROTEINAS ÁCIDO completamente puro, a lo cual se repercuta al no haber
(MG/ML) NUCLÉICO hecho purificación del DNA. Y posteriormente para la
(MG/ML)
pureza se utilizó la formula de la Abs260/22500(f.d) en
0.599 0.853 0.27 0.30 donde se obtuvo un resultado de 1.89x104 mg/mL.
En la cromatografía se utilizaron reactivos puros de las
Tabla 2. Resultados de pureza
bases Adenina, Guanina, Timina, Citosina y Uracilo, estas
ABS ABS ABS FORMULA PUREZA se utilizaron para evaluar los Pool (mezcla de bases) de
230 260 280
DNA y RNA que, mediante los RF, se tiene la relación que
1.044 0.853 0.599 0.853/0.599 1.42 el Pool de DNA tiene las bases C, Guanina y Timina; el
Pool de RNA cuenta con las bases C, G y U. Cabe resaltar
que no se separó por completo los Pool, pero se puede
0.853/1.044 0.81
observar la diferencia principal de DNA y RNA, en cual el
RNA tiene en su estructura Uracilo, mientras que el DNA
𝐴260 no.
[DNA]= (factor de dilución)
22500

0.853
[DNA]= (5)
22500

[DNA]= 1.89x104 mg/mL

CONCLUSIONES
•Se aisló y caracterizó el DNA de Spinacia sp. (espinaca).
Se cuantificó la cantidad de proteínas presentes en
nuestro extracto de DNA
•La pureza se determinó con los resultados de las
absorbancias, a diferentes longitudes de onda, de nuestro
DNA
•Se separaron las bases nitrogenadas del DNA y RNA por
cromatografía a partir de hidrolizados de los mismos
•Se identificaron las bases nitrogenadas por la
propuedad que tienen de absorver luz Uv.
•Los RF de las bases, sirven como referencia para
identificar si se tiene una muestra de DNA o RNA
BIBLIOGRAFÍA
•Alejos, L., del Consuelo, M. & Cornejo, A. Extracción y
purificación de DNA. Sin año. Consultado en:
http://www2.inecc.gob.mx/publicaciones2/libros/710/ex
traccion.pdf
•Martínez, L. Extracción de DNA. Sin año. Experimento con
reactivos de la vida cotidiana. UAB. 12 pp.
Pregunta extra
1. ¿Qué es un nomograma?
Es un gráfico para resolver una ecuación, mediante una
representación que permite realizar con rapidez
cálculos numéricos.
Un nomograma, ábaco o nomografo es un instrumento
gráfico de cálculo, un diagrama bidimensional que
permite el cómputo gráfico y aproximado de una
función de cualquier número de variables. En su
concepción más general, el nomograma representa
simultáneamente el conjunto de las ecuaciones que
definen determinado problema y el rango total de
sus soluciones.
Puede ser Clotoide (de arcos o espiral), Carta de Smith
(usado en ing. eléctrica) y Escalas paralelas (de dos o
más escalas logarítmicas en líneas rectas).