Histoplasma

Cryptococcus

Bacteriología y Micología Veterinaria

Dr. Hugo B. Barrios García
Giovanni González Angel
 Introducción
• Histoplasma spp. es un patógeno intracelular que se ubica en el
interior de una vacuola fagocítica en el citoplasma de los
macrófagos del hospedero. Se mencionan cinco formas clínicas:
asintomática, respiratoria aguda benigna, aguda diseminada,
diseminada crónica y pulmonar crónica.
La infección sistémica afecta a diferentes órganos y tejidos, con
mayor frecuencia los pulmones y tejidos del sistema fagocítico
mononuclear (bazo, hígado, ganglios linfáticos, médula ósea, placas
de Peyer). La diseminación también se da a otras vísceras, entre
ellas páncreas e intestinos. De manera ocasional se aprecian
lesiones en meninges. Por otra parte, los sujetos HIV+ pueden
desarrollar lesiones en piel, sobre todo en cabeza y cuello, o
generalizadas.
•
Clasificación
Emmonsiella capsulata es el estado teleomorfo de Histoplasma
capsulatum, y se diferencia de otros géneros de ascomicetos por las hifas
en espiral que emergen radialmente del ascogonio y la presencia de
ramificaciones onduladas e hifas peridiales que surgen lateralmente de
los espirales. E. capsulata es heterotálica con dos tipos sexuales: + y -. Los
aislados del suelo y de aquellos procedentes de infección humana, se
aparean exitosamente, indicando su compatibilidad genética.
•
Características
Histoplasma capsulatum es un hongo dimófico termo dependiente: crece
en forma filamentosa a 25°C y en forma de levadura a 37°C, por lo que las
características morfológicas varían según la temperatura en la que se
desarrolle el hongo:
A 25°C y en agar dextrosa Sabouraud, las colonias crecen lentamente y
van de una apariencia granular a algodonosa. El color es blanco
inicialmente (colonias tipo A) y por lo general se transforman en marrón
claro con la edad (colonias tipo B); en el reverso la colonia puede
presentar un color que va del amarillo al anaranjado. El hongo es
resistente a la cicloheximida, por lo que los medios de cultivo podrán
contener ese antimicrobiano. El desarrollo de H. capsulatum se ve
favorecido en agar infusión cerebro-corazón.
•
Factores de Virulencia
• Manipulación del pH en los fagolisosomas. Los estudios in vitro han
mostrado que cerca del 70% de los macrófagos expuestos a
levaduras de H. capsulatum se infectan posterior a una hora de
incubación. Después de la fusión fagolisosomal, se esperaría que las
levaduras se inactivaran por la acidificación de la vacuola; sin
embargo, a pocos minutos de la ingestión, el pH de los
fagolisosomas que albergan las células levaduriformes se eleva de
menos de 6.0 hasta 6.5. Tal manejo de pH interfiere con la actividad
de varias enzimas lisosomales e influye en el procesamiento de
antígeno. Ambas alteraciones de la función normal del macrófago
contribuyen a la sobrevivencia del patógeno in vivo.
• Captación de hierro. El hierro es un importante co-factor de la
actividad redox de varias metaloenzimas, tales como
ribonucleótido-reductasa y la succinato-deshidrogenasa. El hierro
también es requerido para la actividad de varias proteínas
constituidas por el radical –hemo, tales como la catalasa y los
citocromos de la cadena de transporte de electrones. El
atrapamiento del hierro por levaduras de H. capsulatum incluye un
sideróforo de ácido hidroxámico, cuyo papel en la sobrevivencia del
hongo dentro de macrófagos activados, es desconocido. Los detalles
del mecanismo de transporte de hierro en H. capsulatumestán
ausentes; sin embargo, es claro que la regulación del pH
intrafagolisosomal favorece la toma del ión metálico por las células
levaduriformes.
Especies en Veterinaria
 Hábitat
• El hongo se desarrolla en suelos con abundante materia
orgánica.
• (Entre estas pollos, gansos, pavos, algunas aves
migratorias)
 Transmisión
• La inhalación de microconidios, la forma infectiva, es el
mecanismo de infección de Histoplasma, aunque se han
reportado casos de infección por inoculación cutánea, con
la presentación de lesiones locales y adenopatía regional.
Para el desarrollo de la enfermedad, se consideran tres
factores: tamaño del inóculo, virulencia del hongo y
estado inmune del hospedero.
El periodo de incubación oscila entre 1 - 3 semanas,
aunque se han reportado casos esporádicos en que se
reduce a 1 - 3 días o se prolonga hasta 5 meses. [Promedio
7 a 10 días].
Patogenia
Signos de Enfermedad
 Diagnóstico de
Laboratorio
• Se utilizan muestras de piel, esputo, médula ósea, tejido pulmonar,
hepático o de ganglios linfáticos, líquido de lavado bronco alveolar,
líquido cefalorraquídeo, sangre y orina.
• Examen directo: Debido a que H. capsulatum es un parásito
intracelular, su hallazgo en exámenes directos en fresco es difícil; sin
embargo, el uso de blanco de calco-flúor y la identificación del hongo
dentro de las células mediante el microscopio de fluorescencia, resulta
muy útil en el diagnóstico.
• Frotis: Como Histoplasma capsulatum es una levadura intracelular
de pequeño tamaño, se recomienda extendidos e improntas, teñidas
con la técnica de Giemsa para la búsqueda de macrófagos o
monocitos con levaduras ovoides de unos 3-5 µm de tamaño, con
gemación polar y una típica tinción en casquete.
• Cultivo: El aislamiento del hongo en los medios de cultivo certifica
el diagnóstico. Histoplasma capsulatum se desarrolla en forma
filamentosa a 28ºC, con morfología microscópica característica de
microconidios y macroconidios terminales y tuberculados, pero a
37ºC, lo hace en forma de levadura.
Impacto Económico y Salud Pública
• Afecta a la producción de pollos en engorda
• Áreas de incubación infectadas
Cryptococcus
 Introducción
• La criptococosis es una micosis sistémica aguda, subaguda o
crónica, inicialmente pulmonar causada principalmente por
Cryptococcus neoformans (vars. neoformans y grubii)
y Cryptococcus gattii. La forma pulmonar es generalmente
transitoria, leve y no reconocida. Las lesiones cutáneas, óseas o
viscerales pueden presentarse durante la diseminación de la
enfermedad, pero la inclusión del sistema nervioso central con
meningitis subaguda o crónica es la forma más familiar de la
micosis. Aunque el hongo tiene una amplia distribución mundial y
se encuentra de manera abundante en la naturaleza, solamente
causa enfermedad grave con resistencia inmunológica muy baja.
 Clasificación
• Reino: Fungí
Phylum: Basidiomycota
Orden: Tremellales
Familia: Tremellaceae
Género: Cryptococcus
 Especies en Medicina
Veterinaria
• La enfermedad se encuentra con mayor frecuencia en
gatos, pero se han registrado casos en ganado bovino,
perros, hurones, cobayos, ovejas, cabras, cerdos, llamas y
otros animales. El Cryptococcus puede encontrarse en las
heces de los pájaros, especialmente de las palomas, pero
también de canarios, periquitos, loros, cacatúas, cotorras,
pollos, gorriones, estorninos y tórtolas. Aunque las aves
pueden transportar el hongo, por lo general, no se
enferman.
 Factores de Virulencia
• Las características más estudiadas sobre C. neoformans son la
presencia de la cápsula polisacárido y la producción de melanina. El
polisacárido capsular puede: Inhibir la producción de ciertas
linfocinas provocando respuestas tanto celular como humoral muy
débiles, enlazar e inmovilizar parcialmente a los anticuerpos
dirigidos contra la pared celular y la cápsula del hongo y además,
enmascarar a los anticuerpos.
La presencia de la melanina funciona como un escudo que protege
al hongo contra: anticuerpos del hospedero, agentes oxidantes y la
anfotericina B. Otros parámetros que pudiesen estar relacionados
con la patogenicidad de este hongo son : el tipo sexual, la biosíntesis
de adenina, producción de manitol y ureasas y presencia de
miristoil-transferasas.
 Vías de entrada
• Inhalación
• Traumatismo
• Oral
 Hábitat
• Frutas cítricas
• Guano 69%
• Excretas de palomas consideradas como su nicho
ecológico
 Patogenia
• Inhalación
Alveolos provoca el primo-contacto terminal
Proliferación rápida en inmunidad deficiente
Disemina por vía linfática y hematógena
Predilección por SNC
 Signos de enfermedad
• Los signos de la enfermedad variarán en función de la parte del cuerpo
afectada. La criptococosis puede generar enfermedades respiratorias
(pulmones), lesiones cutáneas o infección del sistema nervioso (cerebro) u
ojos.
• Los signos en animales pueden incluir estornudos, resoplidos, descarga
nasal, problemas oculares, cambios en el comportamiento, depresión,
desorientación, convulsiones y dificultades para desplazarse. El ganado
bovino y las cabras pueden evidenciar mastitis (infección de las ubres).
 Diagnostico de Laboratorio
• El líquido cefalorraquídeo es el espécimen en donde con
mayor frecuencia se hace el diagnóstico de
criptococosis; sin embargo otros productos como esputo,
pus, orina, material fecal y muestras de tejido también
pueden ser analizados.
• Examen directo en fresco con tinta china o nigrosina.
El tamaño de C. neoformans/C. gattii (4 – 20 µm de
diámetro) permite una fácil observación con tinción
negativa, y ayuda a diferenciar al hongo de los
linfocitos con los cuales algunas veces es confundido.
• Cultivo. Cryptococcus neoformans/C. gattii son fáciles de cultivar
en los medios convencionales (Sabouraud dextrosa, malta dextrosa,
papa dextrosa), adicionados con cloranfenicol y sin cicloheximida.
Los cultivos se mantienen a 30ºC y a 37ºC, al menos durante una
semana. El cultivo levaduriforme es inicialmente blanco, pero
posteriormente se torna beige y marrón-amarillo.