CROMATOGRAFIA DE GASES

JAIRO E. MERCADO CAMARGO, Msc

 CROMATOGRAFIA DE GASES

Método de separación de sustancias volátiles , o

sustancias que pueden ser volatilizadas por
reacción, de un a mezcla gaseosa a altas
temperaturas
 CROMATOGRAFIA DE GASES

Es un o de los métodos mas populares para la separación y análisis de

compuestos.

Esto debido a su ala resolución, bajo limite de detección, velocidad,

exactitud y reproducibilidad.

Los compuestos volátiles cuando son calentados, experimentan una

transición entre la fases gaseosas.

La separación ocurre como resultado de un único equilibrio establecido

entre el (los) soluto (s) y la fase estacionaria.
 CROMATOGRAFIA DE GASES

La cromatografía de gases puede ser usada para el análisis

cualitativo y cuantitativo.

Comparación de los tiempos de retención que pueden ser usado para

la identificación de componenes de la muestra.
CROMATOGRAFIA DE GASES
 COMPONENTES DE UN
CROMATÓGRAFO DE GASES
Registro de
Datos
Injector

Detector

Horno y
Columna

Gas de
Arrastre
 GAS DE ARRASTRE

La fase móvil es por lo general un gas inerte tales como el helio,

argon, nitrógeno, etc.

• Flujos de 1-25 mL/min columnas capilares.

• Flujos de 150 mL/min Columnas empacadas
• Presiones de 10-50 psi

El gas debe ser de alta pureza.

El suministro de gas se asocia con la

presión y el flujo regulado.

Compatible con el detector.

 SISTEMA DE INYECCIÓN

El modo estándar es la inyección directa, la muestra es inyectada

con una jeringa a través de un septum de goma a un alineador de
vidrio donde es vaporizada y transportada por el gas al interior de la
columna.
 SISTEMA DE INYECCIÓN

Esto se logra empleando un inyector que incorpora un divisor de

flujo (split). Normalmente se introduce en la columna un 1%
Cuando las sustancias a separar se encuentran a muy bajas
concentraciones se realiza inyección sin divisor (splitless).
Espacio de cabeza (Head space)
Purga y trampa (Purge and trap)
 Splitless Split

Jeringa Jeringa

Inyector Inyector

He
He

Válvula de purga
cerrada Valvula de purga
abierta
GC column GC column
 Inyector On-Column (OCI)

• Deposita la muestra directamente

dentro de la columna a baja
temperatura
– Sin discriminación de la
muestra para compuestos de
Arrastre
alto punto de ebullición
– Minimiza la descomposición
de los compuestos Entrada
térmicamente inestables de aire
frió
• Desventajas:
– Contaminación más rápida de
la columna Salida de
aire frió
OCI Insert

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Inyector con Vaporización de Temperatura
Programada (PTV)
• El glass insert puede ser calentado y
enfriado rápidamente Purga del septum
• La muestra es introducida en un Arrastre
inyector frió Salida de flujo
– Minimiza la descomposición de split
la muestra y discriminación Entrada de
– Compuestos no volátiles no son aire frió
depositados directamente en
la columna
• Permite inyección de gran volumen de
muestra (con programación del flujo Salida de
del split) aire frió

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 Espacio de cabeza (Head space)
Se analiza la fase de vapor en
equilibrio termodinámico con
la muestra en un sistema
cerrado.
Para ello se procura un
equilibrio estable, mediante el
control de la temperatura del
vial que contiene la muestra.
Posteriormente, se arrastra
la fase vapor al interior del
cromatógrafo.
T equilibrio
Gas portador A la columna
 Purga y trampa (Purge and trap)

Es aplicable solo a muestras líquidas.

Consiste en la continua renovación del gas en
equilibrio con la muestra, con lo que se consigue el
desplazamiento dinámico de los compuestos
volátiles de la muestra líquida a la fase gaseosa.
Los vapores se arrastran a una trampa donde
quedan retenidos y se van concentrando.
Finalizado el proceso se calienta la trampa y se
arrastran los vapores al interior del
cromatógrafo.

1) Gas portador 2) Gas portador

trampa trampa A la columna

T baja T alta

T T
 Horno
• Las columnas cromatográficas se enrollan, se sujetan en un
soporte y se introducen en el interior de un horno

• El horno debe poderse calentar y enfriar rápidamente

• La temperatura se debe poder programar para poder

trabajar en régimen de gradiente

• Muchas aplicaciones y métodos cromatográficos requieren

comenzar a temperaturas por debajo de la ambiental
 Columnas cromatográficas

Columnas capilares Columnas Empacadas

 Tipos de Columnas para GC

Columna capilar
Resina de
Columna empacada poliamida
Tubo de Sílica Fase
fundida estacionaria

Vidrio o acero inox.

Material sólido
Fase estacionaria
para soporte
(camada fina)
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 Columnas cromatográficas empacadas

Se construyen con tubo de acero inoxidable,

niquel o vidrio.

Los diámetros interiores van de 1,6 a 9 mm.

La longitud suele ser inferior a los 3 m.

Se rellenan de un material adsorbente

adecuado a las sustancias que se quiere
separar.
• Longitud
– Normalmente 30 ~ 60 m

• Diámetro interno
– Normalmente 0.25 mm (narrow-bore), 0.32 mm (semi wide-bore) o 0.53 mm
(wide-bore)

• Espesor de la fase estacionaria

– Normalmente 0.1 ~ 3 micrones
 Columnas cromatográficas capilares

Se construyen con sílice fundida.

Los diámetros interiores suelen ser de 200-250 mm.
La longitud suele ser superior a los 20 m.

0.32 mm ID
Mobile phase
(Helium)
flowing at 1 Liquid
mL/min Stationary 0.1-5 mm
phase

15-60 m in length
 TIPOS DE COLUMNAS CAPILARES

• Columna WCOT: La fase estacionaria se encuentra

formando una película líquida directamente sobre las
paredes de la columna.
• Columna SCOT: La fase estacionaria esta impregnada a
un soporte adsorbente.
Film de polímero revestido Partículas sólidas porosas Partículas sólidas
en la pared interna de la revestidas en la pared empacadas dentro
columna interna da columna de la columna

Wall Porous Packed

Coated Layer Capillary
Open Open
Tubular Tubular

~90% ~10%
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 LA FASE ESTACIONARIA
• Tiene un papel fundamental
• Los conceptos de selectividad y polaridad de la fase estacionaria
son muy prácticos para seleccionar fases estacionarias.

• Rango de temperatura de utilización lo más amplio posible ( entre

-60 y 400° C)

• Baja volatilidad

• Térmicamente estable

• Químicamente inerte

• Selectiva a los compuestos a separar

 TIPOS DE FASE ESTACIONARIA

Polisiloxanos:
Grupo de fases estacionarias de más amplia utilización debido a su elevada
estabilidad térmica y a la posibilidad de modificar químicamente la estructura
de la base para obtener fases con diferentes polaridades y selectividades.

Donde R puede ser: Metilo, vinilo, fenilo, 3,3,3-trifluoropropilo, cianoetilo, etc.

 Tipo de fase estacionaria
(metil silicona)

CH3

Si O

CH3
100%

Nombre de la fase estacionaria： 100% Dimetilpolisiloxano

Polaridad ： Apolar
Propiedad de Separación ： Elusión en orden del punto de ebullición
Uso ： Petróleo, solventes, compuestos con alto
punto
de ebullición
Rango de temperatura ： - 60℃ ～ 360℃ （430℃ posible)
Nombre comercial ： *** - 1
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 Tipo de fase estacionaria
(Fenilmetil）

CH3
Si O Si O

CH3

Nombre de la fase estacionaria ： ** % Difenil ** % Dimetilpolisiloxano

Polaridad ： Polaridad media
Propiedad de Separación ： Compuestos aromáticos son retenidos en el grupo fenil
Uso ： Aromas, ambiental, compuestos aromáticos
Rango de temperatura ： - 60℃ ～ 340℃
Nombre comercial ： *** - 5, *** - 35, *** - 50, (*** - 17)

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 Tipo de fase estacionaria
（Polietileno Glicol）

H H
C C O

H H

Nombre de la fase estacionaria: Polietileno glicol

Polaridad ： Fuertemente polar
Propiedad de separación ： Retención de compuestos polares y fuertes
Uso ： Compuestos polares, solvente, aromas éster metílico de
ácidos grasos.
Rango de temperatura ： 40℃ ～ 250℃
Nombre comercial ： *** - WAX

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 Selección de la Fase Estacionaria

• Escoja la fase líquida que más se asemeja en polaridad a los

compuestos de interés del análisis.
Análisis de compuestos apolares-columna apolar (ej.: Rtx-1)
Análisis de compuestos polares-columnas con polaridad fuerte (ej.: StabilWAX)

• Escoja la fase líquida de acuerdo con el propósito del análisis.

Cuando la diferencia de los puntos de ebullición de los compuestos es grande.
－Columna apolar (ej.: Rtx-1)
Cuando la diferencia de los puntos de ebullición de compuestos no es grande como
isomeros
- Columna con polaridad fuerte (ej.: StabilWAX)
 Sistemas de detección

Características ideales de un detector para Cromatografía de Gases:

 Sensibilidad alta y estable; típicamente 10-8 g soluto/s

 Bajo nivel de ruido.
 Respuesta lineal en un amplio rango dinámico
 Tiempo de respuesta corto.
 Buena respuesta para toda clase de compuestos orgánicos .
 Insensibilidad a las variaciones del flujo y la temperatura.
 Estabilidad y robustez.
 Simplicidad en su operación .
 Identificación de compuestos positiva .
 Técnica no destructiva.
 Pequeño volumen en prevención del mezclado de componentes
Detector de ionización de llama (FID)

Este detector añade hidrógeno al

eluyente de la columna.
La mezcla pasa a través del
conducto de un mechero, donde se
mezcla con aire externo y luego
arde.
Cuando entra en la llama material
ionizable del eluyente de la columna
Se quema y la corriente aumenta
notablemente.
Este detector es ideal para compuestos
oxidables.
No responde a los compuestos de
carbono totalmente oxidados, como
carbonilos o carboxilos y grupos éster
Detector de conductividad térmica (TCD)

Utiliza un filamento caliente

colocado en el flujo de gas emergente.

La cantidad de calor por conducción

que pierde el filamento hacia las
paredes del detector depende de la
conductividad térmica de la fase
gaseosa.

Es útil para determinar la presencia

incluso de pequeñas cantidades de
materiales orgánicos que producen
una reducción relativamente grande
en la conductividad térmica del
eluyente de la columna.
Uses a radiactive Beta emitter
(electrons) to ionize some of
the carrier gas and produces a
current between a biased pair
of electrodes.
When an org. mol. that
contains electornegative
functional gr., such as
halojens, phosphorous and
nitro groups, pass by the
detector, they capture some of
the electrons and reduce the
current
DETECTOR NITRÓGENO FÓSFORO
Quantitative Analysis Calibration curve

External Standard Method

Peak hight
Concentration

0 10 0 10 0 10 0 10 0 10 0 10 0 10

100 ng/mL 75 ng/mL 50 ng/mL 25 ng/mL 10 ng/mL 5 ng/mL Unknown

Quantitative Analysis Calibration curve

Peak hight ratio

Internal Standard Method

Concentration

Internal
Standard

Compound

0 10 0 10 0 10 0 10 0 10 0 10 0 10

100 ng/mL 75 ng/mL 50 ng/mL 25 ng/mL 10 ng/mL 5 ng/mL Unknown

Aspects of GC Applications:

Food Analysis
Analysis of foods is concerned with confirming the presence
and determination the quantities of the analytes (lipids,
proteins, carbohydrates, preservatives, flavours, colorants,
and also vitamins, steroids, and pesticide residues).

Drug Analysis
GC is widely applied to identification of the active
components, possible impurities as well as the metabolites.
Environmental Analysis
The environmental contaminants; e.g. dichlorodiphenyltrichloro-
ethane (DDT) and the polychlorinated biphenyls (PCBs) are present
in the environment at very low concentrations and are found among
many of other compounds.

GC, with its high sensitivity and high separating power, is mostly
used in the analysis of environmental samples.

Forensic Analysis
In forensic cases, very little sample is available, and the
concentration of the sample components may be very low.

GC is a useful due to its high sensitivity and separation efficiency.