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Plásmidos
Bioquímica Experimental
Equipo 3
•Cabrera Peralta Andrea
•Fuentes Pineda Rosinda
•Gómez Reynoso Claudia Nathalli
•Ortiz Pastrana Naytzé
¿Que es un plásmido?
• Los plásmidos son moléculas de ADN que
se encuentran en las bacterias, y que son
independientes del cromosoma
bacteriano.
• No son vitales para la célula
Sus principales características
son:
• Son pequeños (unos cuantos miles de
pares de bases)
• Suelen llevar sólo uno o unos pocos
genes
• Son circulares
• Tienen un único origen de replicación
• Múltiple número de copias
• Marcadores Seleccionables
Al igual que el DNA cromosomal el
plásmidico puede presentar las siguientes
características:
• Doble hélice
• Estabilizada por
puentes de
hidrógeno
• En la célula
generalmente
superempacada
o superenrollada
Conformaciones de un plásmido
• Linealizado: Es decir cuando se ha cortado
ambas cadenas del DNA sólo una vez.
• Parcialmente linealizado: Cuando se ha
cortado el DNA en una de las cadenas
• DNA relajado circular. DNA que no se ha
empacado.
• Superenrrolado: Covalentemente cerrado y
muy empacado
• Superenrollado desnaturalizado. Parecido al
anterior pero un poco menos empacado
TOPOISOMEROS. Producto del
superenrollamiento plásmido
• Existen varias
conformaciones de los
plásmidos en el estado
superenrollado.
• Por lo que pueden
migrar en un campo
eléctrico de manera
muy diferente cada uno
a pesar de tener el
mismo peso molecular
• Los plásmidos han sido modificados en el
laboratorio para su uso como
herramientas de ingeniería genética, ya
que son útiles en la expresión de genes
particulares
Estructura plásmido usado en biología
molecular. Vector de clonación
Se compone básicamente de:
• Origen de replicación
• Genes de resistencia a antibióticos
(Marcador de selección)
• Sitio múltiple de clonación
Objetivos
• Realizar el aislamiento de DNA
plasmídico.
• Conocer los fundamentos para la
purificación del DNA plasmídico y su
separación de DNA genómico.
Reactivos