TEMA

APLICACIONES DE LA
INGENIERA GENTICA A LOS
SISTEMAS DE DIAGNSTICO
Y DETECCIN

DIAGNOSTICOS
INMUNOLOGICOS
Pruebas de aglutinacin.
Fijacion del complemento.

Enzimoinmunoensayos.
Pruebas de precipitacin.
Pruebas de inmunotransferencia de Western.

ANTICUERPOS
MONOCLONALES
Anticuerpos

Anticuerpos Monoclon

APLICACIONES GENERALES DE LOS

ANTICUERPOS MONOCLONALES
Produccin y desarrollo de los anticuerpos monoclonales

GENERACIN DE ANTICUERPOS
MONOCLONALES TOTALMENTE HUMANOS

ANTICUERPOS HUMANOS GENERADOS EN RATONES TRANSGNICOS

Aplicaciones clnicas de los

anticuerpos monoclonales
Nofetumomab: Tratamiento de
cncer de pulmn, colon,
seno, ovario, pncreas, rion.
Inciromab Pentetate: Agente
de deteccin de necrosis
miocrdica.
Capromab pendetide: Agente
detecto de cncer de prstata.

TEST PRIONICS

Test Prionics

LA HUELLA GENETICA
DNA FINGER PRINTING

es una tcnica que se utiliza para

distinguir entre individuos
de una
misma especie utilizando muestras de
su adn

Qu es la Huella Gentica?
El ADN contiene toda la informacin necesaria para el
desarrollo de los seres vivos. Los individuos de la
misma especie comparten gran parte de su secuencia
de ADN, pero existen determinadas regiones
altamente variables que son propias de cada sujeto.
Estas zonas del genoma se denominan polimorfismos
o marcadores genticos, y son utilizadas para la
identificacin de personas ya que dos seres humanos
no relacionados es poco probable que tengan en
comn los mismos marcadores genticos. Al conjunto
de polimorfismos propio de cada persona se le conoce
como perfil gentico o huella gentica.

DESCUBRIMIENTO

Su invencin se
debe al Dr. Alec
Jefrfreys de la
universidad de
leicester; quien
dio a conocer su
nueva tcnica
en 1984.

El fue el que
descubri en ciertas
regiones del ADN
haban pequeos
fragmentos que
llaman miniSatlites, que solo se
repiten cierto
numero de veces
pero diferentes
siempre en cada
individuo .

 La tcnica se basa en que dos seres

tienen una gran parte de su
secuencia de ADN en comn y para
distinguir a dos individuos se puede
explotar la repeticin de secuencias
altamente
variables
llamadas
minisatelites o satlites .

USOS
TODO
MEDIANTE EL
USO DEL
ADN

identificacin
de restos
humanos

pruebas de
paternidad

la
compatibilid
ad en la
donacin de
rganos

estudio de
las
poblaciones
animales
silvestres

composicin
de
alimentos

APLICACIN EN LA MEDICINA FORENCE

La aplicacin de estas han permitido el
desarrollo de mtodos para la exclusin y
identificacin de
delitos (homicidios y
dems) utilizando muestras de sangre,
cabello , saliva, o semen .
Identificacin de restos humanos por
comparacin con muestras familiares.

DIAGNOSTICO MOLECULAR DE
ENFERMEDADES GENETICAS
El diagnstico moleculares un trmino
general que engloba un conjunto de
tcnicas de biologa molecular empleadas
para la identificacin de los defectos
moleculares
subyacentes
en
una
enfermedad de carcter hereditario o bien
para
la
deteccin
de
enfermedades
infecciosas, ya sean de origen vrico,
bacteriano o fngico.

METODOS DE DIAGNOSTICO GENETICO

Anlisis
cromosmico
Hibridacin
fluorescente in
situo FISH

Consiste en observar si elcariotipodel

paciente es normal, es decir, si el nmero de
cromosomas es el correcto y si su tamao y
orden es normal.
Con esta tcnica se pueden detectar anomalas
cromosmicas, deleciones en ungeny otras
alteraciones que pueden provocar una enfermedad
gentica.

Reaccin en
cadena de la
polimerasao PCR

Consiste en aplicar la tcnica de PCR para

amplificar regiones especficas con los
cebadores adecuados.

Secuenciacin de
ADN

Consiste en aplicar la tcnica de PCR

para amplificar regiones especficas
con los cebadores adecuados.

CHIP DE ADN Y
MICROARRYS

Antecedentes histricos
La biologa molecular dispone de mltiples tcnicas
para medir los niveles de ARN, ADN, protenas o
metabolitos [similar a los microarrays]
Lo que caracteriza la era post genmica no es lo que
se puede medir sino la cantidad de mediciones
simultaneas que se pueden realizar

Pero, Qu es un microarray?
Un formato experimental,
basado en la sntesis o fijacin de sondas, que representan
los genes (o proteinas, o metabolitos),
sobre un sustrato slido (cristal, plstico, silice,...),
y expuestos a las molculas diana (la muestra).

mo funciona un microarray
El nivel de hibridacin entre
la sonda especfica (probe)
la molcula diana (target)
se indica generalmente
mediante fluorescencia y se
mide por anlisis de imagen
e indica el nivel de expresin del gen correspondiente a la
sonda en la muestra problema

Que tipos de microarrays existen

De Protenas
De Tejidos
De DNA
Arrays de CGH
SNPs
De Expresin
De DNA
De oligonucletidos:
GeneChip Affymetrix
Otras marcas

Aplicaciones
Los chips de ADN se han aplicado al estudio de casi
cualquier tipo de problema biolgico.
El nmero de publicaciones anuales es muy alto y
contina creciendo. Algunas de sus aplicaciones ms
frecuentes son:
Estudio de genes, que se expresan
diferencialmente en condiciones diversas
Clasificacin
molecular
en enfermedadestratados/no
complejas.
(sanos/enfermos,
mutantes/salvajes,
Identificacin
tratados). de genes caractersticos de una patologa

(firma osignature).
Prediccin de respuesta a un tratamiento.
Deteccin de mutaciones y polimorfismos de un nico gen
(SNP).

N
E
S
BIO

S
E
R
SO

HISTORIA DE LOS BIOSENSORES

Los biosensores, al igual que cualquier otro tipo de
instrumento, han evolucionado a lo largo de la historia.
Anecdticamente, podramos decir que los primeros
biosensores fueron los canarios; ya que estas aves se
utilizaban antiguamente en las minas de carbn para detectar
gases txicos. Los canarios se mueren antes que las personas
en presencia de monxido de carbono o metano y como
suelen estar cantando la mayora del tiempo el hecho de que
no lo hicieran se converta en una alarma sonora.

Qu es un biosensor?
Son instrumentos analticos que transformanprocesosbiolgicos
en seales elctricas u pticas y permiten su cuantificacin.
Acopla un elemento biolgico sensible asociado a unsistemade
transduccin.
Lafuncinde un sensor es convertir un tipo de cantidad a otro
tipo de cantidad Latemperaturaa una seal elctrica,
lapresinde un fluido electrosttico a una seal elctrica, etc.

Se compone de tres partes:

El sensor biolgico:Puede ser un tejido, un cultivo de
microorganismos,enzimas, anticuerpos, cadenas
decidosnucleicos, etc.
El transductor:Acopla los otros dos elementos y traduce
la seal emitida por el sensor.
El detector:Puede ser ptico, piezoelctrico, trmico,
magntico, etc.

Fig. 3 Esquema a
bloques de un
biosensor.

A.Caractersticas de los biosensores:

Alta sensibilidad.
Alta selectividad.
Mediciones en tiempo real.
Automatizables.
Porttiles.
Miniaturalizables.
Capacidad de multianlisis.

Una de las caractersticas fundamentales que hace tan

atractivos a la mayora de los biosensores es la
posibilidad de realizar elanlisisde la sustanciaa
determinar en tiempo real y de forma directa a
diferencia de cualquier anlisis biolgico o clnico que
requiere siempre un marcador.
Estas dos caractersticas le confieren a los biosensores la
posibilidad de realizar no slo un anlisis cualitativo y
cuantitativo, sino tambin la posibilidad de evaluar la
cintica de la interaccin y, por tanto, elucidar los
mecanismos fundamentales de dicha interaccin.

APLICACIONES DE LA TECNOLOGIA DE
BIOSENSORES
La tecnologa del biosensor
ofrece una poderosa
herramienta analtica
combinando una especificidad
mxima en su deteccin, as
como una elevada sensibilidad.
Los siguientes campos son
solamente unas pocas de las
aplicaciones de los equipos
biosensores.

Fig. 1 Biosensores
desarrollados como
unapielelectrnica
que se adhiere como tatuaje
temporal y mide
lossignosvitales.

CONTROL MEDIOAMBIENTAL
Monotorizacin on-line y off-line de procesos
medioambientales: presencia y cuantificacin de
diferentes analitos en agua (microorganismos, toxinas,
etc.).
Deteccin cualitativa y cuantitativa de contaminantes
medioambientales (pesticidas, fenoles, etc.).

BIOMEDICINA
Deteccin de marcadores
tumorales y hormonas.
Equipos analticos para
consulta.
Sistemas biosensores para
autoanlisis realizado por los
pacientes.
Componentes de rganos
artificiales ( pncreas artificial,
etc).
Monitarizacin " in vivo ".
Evaluacin teraputica de
nuevos frmacos.

Fig. 2 Biosensores al
funcionar como "marcadores",
podran detectar cncer
tempranamente.

Deteccin de Cncer y Anomalas Salud

De estos biosensores, el ms importante es el sensor
ptico desarrollado por Tuan Vo Dinh.Este sensor
puede decir si un tumor en el esfago es canceroso o
benigno.En el pasado, la determinacin precisa de si
un paciente tiene cncer de esfago ha requerido una
biopsia quirrgica.Sin embargo,
nuestromtodobasado enlserde fluorescencia ha
eliminado la necesidad de una biopsia, reducir el dolor
y el tiempo de recuperacin de los pacientes.

Biosensor para el control de ladiabetessin

el uso de muestras de sangre
En este caso, la luz se utiliza para iluminar
el ojo y estimular ciertas sustancias,
incluyendoprotenas. Este mtodo no
invasivo realmente depende de un
desarrollo relativamente nuevo para
laseleccinde la longitud de onda de la
luz para lailuminacin.
De esta manera muchos escaneos
espectrales se pueden tomar con un
promedio bastante aceptable gracias a la
ayuda de unacomputadorapara obtener
la precisin requerida para medir
elestadoy los cambios en las protenas de
los ojos de los diabticos.

Fig. 6 Estructura de un AOTF.

INDUSTRIAS AGROALIMENTARIAS
Deteccin de microorganismos perjudiciales para el
alimento.
Deteccin de toxinas y pesticidas.
Control de calidad de materias primas, productos
finales y proceso.
INDUSTRIAS
METAL-

MECNICAS
Aplicaciones de biosensores y sensores qumicos en
robots qumicos de nueva generacin.