Toxicolog

a
Analtica

Anabel G. Tatis R.
CIIMET, Universidad de
Panam

Toxicologa
Analtica
Campo fundamental de la
toxicologa, pues en
cualquiera de las ramas de
sta, se deben utilizar los
mtodos de anlisis
qumicos, entre otros.

Es la aplicacin de los instrumentos de la

Qumica Analtica a la estimacin cualitativa
o cuantitativa de sustancias qumicas que
pueden ejercer efectos adversos sobre
organismos vivos.

Toxicologa Analtica

La sustancia qumica que se determina

(analito) es un xenobitico que puede haber
quedado alterado o transformado por acciones
metablicas del organismo.

La muestra que va a analizarse tiene una

matriz que consta de lquidos corporales o
tejidos slidos del organismo, y por lo tanto, la
identidad del analito as como la matriz en la
que se encuentra, representa un autntico reto
para el qumico analtico.

Toxicologa Analtica

Es la deteccin, identificacin y medicin

de los xenobiticos o compuestos
txicos en muestras biolgicas y afines.
Los mtodos analticos estn
disponibles para una amplia
gama de
compuestos: estos
pueden ser productos qumicos,
plaguicidas, productos
farmacuticos, drogas de abuso y
toxinas naturales.

Aplicacione
s

En el diagnstico, la gestin,
el pronstico y la prevencin
de la intoxicacin.

En la evaluacin de la exposicin tras

incidentes con productos qumicos, drogas
teraputicas de seguimiento, anlisis forense, y
el seguimiento de las drogas de abuso.

En la investigacin, p.e. en la determinacin

de las propiedades farmaco- y toxicocinticas
de sustancias o la eficacia de nuevos
regmenes de tratamiento.

Diferencia de la
Toxicologa Analtica con
la Toxicologa
Experimental
La toxicologa experimental es
conocida tambin como la
Evaluacin de la Toxicidad.

Objetivo: Determinar el grado y tipo de toxicidad

(aguda, crnica, accin irritante, neurotoxicidad,
etc.) de una determinada sustancia, siguiendo
protocolos estandarizados, generalmente para
cumplir con requisitos legales para su registro,
comercializacin y utilizacin posterior.

Utiliza pruebas de toxicidad generales y

especficas.

Recoleccin,
conservacin y envo
de muestras

Introduccin

La seleccin, preparacin y remisin de la

muestra debe hacerse en conformidad con la
ley nacional o la normativa internacional.

Existen diversos protocolos que

deben seguirse para llevar a cabo
estos procedimientos.

Las muestras deben rotularse y

sellarse correctamente, con datos
apropiados mnimos y legibles,
utilizando marcadores de tinta
indeleble, iniciando inmediatamente
cadena de custodia.

La Cadena de Custodia
Es el procedimiento documental que pretende
asegurar a travs de un seguimiento trazable,
fundado en la responsabilidad asumida por los
intervinientes, que la muestra que se procesa en
el laboratorio toxicolgico no sea alterada,
sustituida o cambiada, entre el momento en que
sta se recoge hasta el momento que finaliza el
anlisis.

Tipos de Muestras
Sangre
Orina
Contenido gstrico
Vsceras (hgado, cerebro,
rion, pared gstrica, etc.)
Otros: humor vtreo, hisopado nasal, cabellos,
uas, restos seos, hisopado de las manos,
alimentos, etc.

Sangre

Desinfectar la piel (alcohol,

solucin jabonosa, agua
oxigenada o solucin de lugol).
La muestra de sangre en dos tubos, uno de
ellos con anticoagulante (fluoruro de sodio al
1%, que tambin es preservador
antibacteriano) y el otro sin anticoagulante.
El volumen mnimo recomendable en cada caso
ser de 10 mL.
Utilizar siempre material nuevo o virgen
La conservacin de la muestra se har en
nevera a 4C.

Muestra de Orina

Es idnea para screening en el caso de no conocer

el origen de la intoxicacin.

En la deteccin de consumo de sustancias ilcitas

en trabajadores o en casos de dopaje en el
deporte.

Un resultado positivo solo indicar el consumo de

la sustancia detectada, independientemente del
nivel obtenido.

Ventajas: est exenta de protenas, con lo cual se

tienen menos interferencias, y es una muestra
abundante, fcil de recolectar y de conservar.

Volumen de orina no
inferior a 30 mL, en un
frasco de polipropileno o
similar con cierre
hermtico, de tapa rosca
y sellado con cinta
adhesiva.

Conservarla a -20C. Se
acepta a 4C, si el anlisis
se practica dentro de las
24 a 48 horas posteriores
a la toma de muestra.

No agregar ninguna
sustancia como
conservante.

Muestras
Muestras
de Orina
Orina
de

Pelo

Determinacin de metales
pesados (As), de drogas
(herona, morfina, lidocana) y
de hidrocarburos aromticos
policclicos, y recientemente
para escopolamina.

Ventajas: permite la deteccin de las sustancias en una

amplia franja de tiempo y es muy fcil de obtener.

Se toma aprox. 1 cm de mechn lo ms prximo al cuero

cabelludo, en el caso de vello pubiano o axilar se obtiene
al ras de la piel, dicha muestra deber ser colocada en
sobre de papel a temperatura ambiente.

Humor vtreo

Forma novedosa para la bsqueda de

ciertos txicos como el etanol,
barbitricos, benzodiazepinas,
antidepresivos, opiceos, cannabinoles,
anfetaminas, LSD, anestsicos.

Ventajas: no se
contamina fcilmente
con otros fluidos y su
descomposicin es
ms retardada en el
cadver.

Lineamientos bsicos en el
manejo y envo de las muestras
1. Muestras identificadas con los

datos relevantes del caso.

2. Frascos, viales, tubos, etc.

tapados hermticamente, con

sus tapas y tapones asegurados
con cinta adhesiva.

3. Si son varios tubos se

aseguran con ligas y se

colocan en bolsas
cerradas.
4. Si son rganos se colocan

en papel aluminio dentro

Continuacin

5.

Las laminillas se deben enviar secas,

envueltas individualmente en papel de
China y cada una estar identificada.

6.

Para el envo, las muestras se colocan

en cajas trmicas resistentes,
empaquetndolas con relleno de papel,
plstico o madera (viruta).

7.

Si se envan por avin,

asegurarse que el
paquete viaje en el
rea presurizada para
evitar la prdida

Continuacin
8.

Deben ir una carta que especifique qu tipo

de prueba se solicita y otros parmetros. Y se
colocan dentro del paquete en una bolsa de
plstico sellada.

Los datos deben coincidir.

Escribir con letra de molde, de preferencia
a mquina y enviar en original.
La cantidad de muestra enviada debe estar
de acuerdo a los estudios solicitados.
Indicar en el paquete en un lugar visible si
ste contiene muestras de clera, rabia,
poliomielitis, aguas residuales, citologa,
paludismo, VIH, etc..

Continuacin
9.

10. Es

Las muestras se deben

remitir lo ms pronto
posible despus de
obtenidas para asegurar
su adecuada preservacin.

conveniente que
se informe del envo
al departamento de
recepcin de
muestras del
laboratorio

Sistemtica Analtica
Toxicolgica
Conjunto de procedimientos analticos,

concisos, bien planeados, encaminados a

poner de manifiesto la presencia o
ausencia de sustancias de relevancia
toxicolgica en una muestra determinada.

Comprende varias etapas:

Pre-tratamiento de las

muestras.
Extraccin/Purificacin.
Anlisis instrumental.

Tcnicas de anlisis en laboratorios

de toxicologa

Pre-tratamiento de las

muestras:

homogeneizacin,
desproteinizacin,
hidrlisis, de conjugados, etc.

Extraccin/Purificacin:
tcnicas de extraccin
lquido- lquido (LLE),

extraccin en fase slida

(SPE),
extraccin de espacio de
cabeza (HSE),

Anlisis instrumental:

Cromatografa Lquida de alta presin

(HPLC),
Cromatografa de Gases acopladas a
diferentes detectores,
Espectrometra de Absorcin Atmica con
horno de grafito y de generacin de hidruros,
Espectrometra de Emisin Atmica con
acoplamiento de plasma inductivo .

Pruebas
preliminares

Tcnicas de screening (inmunoensayos y

cromatografa en capa fina) de anlisis
rpido, no especfico, para poner de
manifiesto la presencia o ausencia de un
grupo
de Son
analitos.
orientativas, por lo que hay

que confirmar el resultado con

tcnicas analticas confirmatorias
que ofrecen un principio
fisicoqumico diferente.

Se utilizan la absorcin atmica

para metales, HPLC y
cromatografa de gases acoplada

Las tcnicas deben

desarrollarse
garantizando
control de calidad a
travs de la
calibracin de
equipos, validacin
de los mtodos y
controles externos.

En los pases en desarrollo, debido a la

falta de recursos, pudiera realizarse
con la participacin de laboratorios
privados y centros de investigacin de
educacin superior, asegurando en
todo momento la cadena de custodia.

Muchas gracias por su atencin!