PROF

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O
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A
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A
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O

ENZIMAS

Universidad de Carabobo
Facultad de Ciencias de la salud
Escuela de Medicina
Dr. Witremundo Torrealba
Departamento de Bioqumica y Fisiologa
Ncleo Aragua

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I
R
A

Seminaristas: *Alba Vsquez *Laura Velasco * Yannay Varela.

28/10/14

AGENDA

Interpretar el significado de KM y de Vmax.

Representacin grfica de la ecuacin de Michaelis-Menten.
Identificacin de en un grfico de Vo VS {S}
Relacin entre el valor de KM y la afinidad enzima-sustrato.

Aplicar el concepto de KM y de Vmax en la resolucin de problemas

Ejemplos de aplicacin de los conceptos de KM y Vmax.

Interpretar la representacin grfica de Lineweaver y Burk

Utilidad de la grfica

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ENZIMAS

MICHAELIS-MENTEN

Michaelis-Menten
S
E+S
Donde

E
K1
K2

P
ES

K3

P+E

E: enzima

K1, K2 y K3 = Constantes de velocidad.

S: sustrato
P: producto
ES: complejo Enzima + Sustrato

28/10/14

ENZIMAS

MICHAELIS-MENTEN

Postulados

ES en estado
estacionario

Vformacin = Vdisociacin

En el estado estacionario

Toda la E se encuentra
ES

En el estado
estacionario

28/10/14

ENZIMAS

V0=Vmax cuando [S] >>

Km

MICHAELIS-MENTEN

E+S

K1
K2

ES

K3

1era Etapa

P+E

Forma ES

Michaelis-Menten
2 Etapa

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ENZIMAS

ES en P + E

V0: es la reaccin enzimtica

en su fase inicial

[S]: concentracin del sustrato

VELOCIDAD INCIAL V0

Identificacin en un grfico de V0 VS {S}

VELOCIDADES INICIALES A
DIFERENTES
CONCENTRACIONES DE
SUSTRATOS

CONCENTRACIN DE SUSTRATO [S]

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ENZIMAS

Relacin entre el valor de KM y la afinidad

enzima-sustrato.
Afinidad Enzima-Sustrato

VELOCIDAD INICIAL V0

Velocidad mxima
VMAX

COMPLEJO
ENZIMASUSTRATO
SUSTRATO

ENZIMA
LIBRE

CONCENTRACIN DEL SUSTRATO [S]

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ENZIMAS

MICHAELIS-MENTEN

Ecuacin:

V0=

VMAX [S]
KM + [S]

Representacin grfica de la ecuacin de

Michaelis-Menten.

V : Velocidad inicial
0
Vmax: Velocidad mxima

[S]: concentracin de sustrato

KM: constante de Michaelis

[ (K2+ K3) / K1]

Extrado Bioqumica Aspectos estructurales y vas metablicas. Interamericana, McGraw Hill

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ENZIMAS

Relacin entre el valor de KM y la afinidad

enzima-sustrato.
KM

Afinidad Enzima-Sustrato
KM (k 2 +k 3 /k 1 )

KM

Afinidad Enzima-Sustrato

E+S
Reacciones 2 y 3 destruyen [ES]
Mientras que la reaccin 1 lo forma

K1
K2

ES

K3

P+E

K1, K2 y K3 = Constantes de velocidad.

V= K [R]n=1 (primer orden)

KM es grande, el complejo ES es inestable pues predomina la

tendencia a destruirlo (poca afinidad hacia el sustrato)
Si KM es pequea, el complejo ES es estable, ya que predomina la
tendencia a formarlo (gran afinidad hacia el sustrato).
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ENZIMAS

1
1

CONCEPTO DE KM Y DE VMAX

km: constante de Michaelis define como (k2 +k3 /k 1 ) (La mitad de Vmax)

Velocidad inicial

VMAX: Velocidad inicial mxima de la reaccin catalizada

km
Concentracin de sustrato
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ENZIMAS

APLICAR EL CONCEPTO DE KM Y DE VMAX EN LA RESOLUCIN DE PROBLEMAS

Sustrato
(mmol/L)

Velocidad
[(mmo/L)-1min-1]

85
2 x 10-3

115

5 x 10-2

200

20 x 10-1

270

35 x 10-1

278,5

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Realice una grafica

de MichaelisMenten y determine
VMAX y KM

ENZIMAS

APLICAR EL CONCEPTO DE KM Y DE VMAX EN LA RESOLUCIN DE PROBLEMAS

Chart Title

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ENZIMAS

LINEWEAVER Y BURK

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ENZIMAS

Ecuacin: V0=
Michaelis-Menten

Velocidad inicial

LINEWEAVER Y BURK

VMAX [S]
KM + [S]

Transformacin
Ecuacin
para
obtener
Lineweaver
y Burk

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ENZIMAS

Concentracin de sustrato

REPRESENTACIN GRFICA DE
LINEWEAVER Y BURK

Realice los grficos

de Michaelis-Menten
y Lineweaver-Burk
explique la pendiente
y la interseccin en
YyX

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Sustrato
(mmol/L)

Velocidad
[(mmol/L) -1-MIN-1]

85

20

155

50

239

110

325

200

390

ENZIMAS

MICHAELIS-MENTEN

Sustrato
(mmol/L)

Velocidad
[(mmol/L) -1-MIN-1]

85

20

155

50

239

110

325

200

390

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MICHAELIS-MENTEN

ENZIMAS

REPRESENTACIN GRFICA DE
LINEWEAVER Y BURK

VMAX [S]
Ecuacin: V0=
Michaelis-Menten KM + [S]

[S]
(mmol/L)

1/[S]

Velocidad
[(mmol/L) -1MIN-1]

1/Velocidad

0,125

85

0,012

20

0,05

155

0,006

50
110
200
28/10/14

0,02
0,009
0,005

239
325
390

0,004
0,003
0,003

ENZIMAS

REPRESENTACIN GRFICA DE
LINEWEAVER Y BURK

LINEWEAVER-BURK SIN -1/KM

[S]
(mmol/L)

1/[S]

Velocidad
[(mmol/L) -1MIN-1]

1/Velocida
d

0,12
5

85

0,012

20

0,05

155

0,006

50

0,02

239

0,004

110

0,00
9

325

0,003

200

0,00
5

390

0,003

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f(x) = 0.08x + 0
R = 1
Linear ()

ENZIMAS

REPRESENTACIN GRFICA DE
LINEWEAVER Y BURK

LINEWEAVER-BURK

f(x) = 0.08x + 0
R = 1

Linear ()

1
VMAX

-1
V
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BIBLIOGRAFA

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 GRACIAS
POR SU ATENCIN!

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