Ana Paloma Campos Daz

Aida Cazares Gayosso

Juan Sarid Domnguez Ortiz
Rene Aldana Mndez

M. C. Marcela Villegas Castaeda
NORMA Oficial Mexicana NOM-007-ZOO-1994
Concepto
Enfermedad infectocontagiosa de origen viral, altamente
transmisible que afecta a los cerdos. Es causada por un
herpesvirus que ocasiona problemas en los sistemas nervioso,
respiratorio y reproductivo, principalmente, en cerdos que se
encuentran en la etapa predestete.
Tambin puede presentarse en bovinos, perros, gatos,
borregos y cabras.
Historia
La enfermedad fue descubierta por primera vez a
principios del siglo XIX (1902) en Hungra por Aladar
Aujeszky, de ah el nombre de la enfermedad.

Aujeszky identific la enfermedad en rumiantes que
sufran alteraciones nerviosas, con un extremado
prurito o picor loco.

Los sntomas, similares a los de la rabia, provocaron
que se acuase el trmino pseudorabia para
denominar a esta enfermedad.
Virus de la Enfermedad de Aujeszky
El virus de la enfermedad de Aujeszky es un Herpesvirus
suis tipo 1 que pertenece a la familia Herpesviridae y a su vez
a la subfamilia alfavirus.
Los herpesvirus poseen una doble cadena lineal de ADN y el
virin mide de 150 a 200nm de dimetro.
Su ADN, situado en la parte central, est rodeado en primer
lugar por una cpside icosadrica, y ms exteriormente por un
tegumento amorfo que contiene protenas de origen vrico,
todo ello envuelto por una cubierta de glicoprotenas (gp) rica
en lpidos.

El ADN del VEA est formado por una doble cadena lineal que
contiene unos 130.000 pares de bases. El genoma tiene dos
regiones, una llamada nica larga (UL) y otra llamada nica
corta (Uc).
Modo de Accin
SNTOMAS Y LESIONES
La enfermedad se manifiesta en tres formas clnicas:
nerviosa, respiratoria y reproductiva.
Las lesiones estn ausentes o son mnimas y no
detectables
Rinitis serosa o serofibrinosa
Ganglios regionales hinchados y hemorrgicos
Lesiones pulmonares
Endometritis catarral con engrosamiento de la pared
del tero.
Los cerdos infectados, excretan grandes cantidades de
virus en la saliva y en las secreciones nasales, en cerdas
gestantes la enfermedad de Aujeszky puede producir:
abortos, nacimientos prematuros, lechones dbiles o
nacidos muertos.



Diagnstico
Estudios para realizar diagnstico establecidos en la NORMA
Oficial Mexicana NOM-007-ZOO-1994:
Inmunofluorescencia
Prueba biolgica (inoculacin en conejos o ratones)
Inmunoperoxidasa
ELISA y/o seroneutralizacin
Cultivo celular
Toma de Muestra
Muestras requeridas para el diagnstico virolgico:
a) Inmunofluorescencia: Tonsilas y encfalo.
b) Prueba biolgica: Encfalo, pulmn, hgado y bazo.
c) Prueba de cultivo celular: Encfalo, pulmn, hgado, bazo y
semen.
Muestras requeridas para el diagnstico serolgico:
a) Inmunoperoxidasa, ELISA, seruoneutralizacin y/o
aglutinacin en ltex: 2 ml de suero para cada prueba.
Envo de Muestras
Forma de envo de las muestras al laboratorio.
Para inmunofluorescencia: En congelacin o refrigeracin (sin
glicerina).
Para la prueba biolgica y cultivo celular: En refrigeracin o
congelacin.
Para serologa (inmunoperoxidasa, ELISA y/o
seroneutralizacin): En refrigeracin o congelacin.
Inmunofluorescencia
a) Hacer cortes por congelacin de tonsila o encfalo.
b) Secar los cortes de tejido.
c) Fijar los cortes por congelacin con acetona, a temperatura
ambiente por 10 a 20 minutos.
d) Teir con conjugado de inmunofluorescencia e incubar a
37C por 30 minutos.
e) Lavar con PBS 3 veces.
f) Montar agregando glicerina buferada.
g) Observar en el microscopio de inmunofluorescencia.
Imagen de Inmunofuorescencia

Prueba Biolgica
a) Preparar un macerado con una parte de las muestras de
rganos y cuatro partes de una solucin de PBS
(Preparacin de Phosphate Buffered Saline) con antibiticos.
b) Inocular conejos o ratones subcutneamente en el rea
intercostal.
c) Observar la aparicin de prurito, reas laceradas o la muerte
de los animales.
Imagen de Prueba Biolgica
Inmunoperoxidasa
a) Lavar con solucin amortiguadora de fosfatos (SAF "L") las microplacas que
contienen el monoestrato de lnea celular PK15, sensibilizadas con virus de la
EA.
b) Adicionar los sueros problema.
c) Tapar las microplacas e incubarlas a 37C por 45 minutos.
d) Lavar 3 veces con SAF "L".
e) Adicionar la protena G conjugada.
f) Tapar las microplacas e incubarlas a 37C por 45 minutos.
g) Lavar 3 veces con SAF "L".
h) Adicionar el sustrato.
i) Incubar a temperatura ambiente por 20 minutos.
j) Efectuar la lectura en el microscopio ptico invertido.
ELISA
a) Lavar cuatro veces las microplacas cubiertas o revestidas con el
antgeno, con la solucin Tween-Sal.
b) Inactivar el suero problema a 56C por 30 minutos.
c) Diluir los sueros problemas 1:100 con PBS suplementado con 10% de
suero bovino (PBS-BS).
d) Adicionar 0.1 ml de los sueros diluidos.
e) Incubar a 30C por 60 minutos.
f) Lavar 4 veces con la solucin Tween-Sal.
g) Adicionar 0.1 ml del conjugado diluido con PBS-BS.
h) Incubar a 30C por 20 minutos.
i) Lavar 4 veces con la solucin Tween-Sal.
j) Adicionar 0.1 ml de la solucin substrato.
k) Incubar a 30C por 20 minutos.
l) Adicionar 0.1 ml de la solucin de NH2SO4 para detener la reaccin.
m) Leer la densidad ptica.
Imagen de Prueba Elisa
Sueroneutralizacin:

a) Inactivar las muestras de suero a 56C por 30 minutos.
b) Hacer diluciones dobles seriadas del suero con medio de mantenimiento.
c) Agregar igual volumen del virus de la EA a las diluciones del suero (200 TCID
50/0.1 ml).
d) Incubar a 37C por una hora.
e) Quitar el medio de las microplacas o tubos con el cultivo celular.
f) Inocular 0.1 ml de la mezcla suero-virus en los pozos o tubos de cada
dilucin.
g) Agregar 0.5 ml de medio de mantenimiento (cuando se utilicen tubos).
h) Incubar a 37C por 2 a 3 das.
i) Observar la aparicin del efecto citoptico.
Imagen de Seroneutralizacin
Tcnica de PCR
Es una tcnica de sensibilidad muy elevada, que
detecta cantidades mnimas del agente
infeccioso en cualquier tipo de muestra y tejidos
del animal en tan solo unas horas, estudos muy
tempranos, o incluso cuando la infeccin esta ya
establecida, en presencia de elevados niveles de
anticuerpos neutralizantes.
Aglutinacin en Ltex
a) Todos los reactivos deben estar a temperatura ambiente de 21C a 25C.
b) Marcar e identificar cada muestra que se trabajar.
c) Con una micropipeta adicionar 150 l de la solucin de dilucin.
d) Agregar 50 l de suero a cada tubo que contiene solucin buffer para que
quede una dilucin 1:4.
Con la misma pipeta agregar 50 l de la muestra diluida a la placa de vidrio.
e) Todas las muestras debern ser examinadas y transferidas a la placa,
dispersndolas con un
agitador. Usar un agitador por cada muestra.
f) Mezclar el reactivo de ltex con el agitador; colocar la botella del reactivo de
ltex en una posicin vertical invertida perpendicularmente a la placa, para
que caiga libremente la gota de ltex sensibilizado sobre cada pozo de la placa
que contiene el suero diluido. Colocar la placa sobre un rotor de cubierta
hmeda y girar de 80 a 120 rpm, formando crculos de aproximadamente 2 cm
de dimetro o mezclar la muestra girando la placa de vidrio en forma manual
durante 5 minutos.
g) La placa deber leerse estando hmeda bajo la luz incandecente o bajo la
luz del sol. La aglutinacin indica la presencia de anticuerpos y deber
reportarse como positiva

La presente Norma es de observancia obligatoria en
todo el territorio nacional y tiene como objeto
prevenir, controlar y erradicar la Enfermedad de
Aujeszky del ganado porcino en todo el pas.
La vigilancia de esta Norma corresponde a la
Secretara de Agricultura, Ganadera y Desarrollo
Rural, as como a los gobiernos de los estados, en el
mbito de sus circunscripciones territoriales y de
conformidad con los acuerdos de coordinacin
respectivos.
09-19-94 NORMA Oficial Mexicana NOM-007-ZOO-1994,
Campaa Nacional contra la Enfermedad
de Aujeszky.
Datos Epidemiolgicos de Mxico
Dato Curioso
Mxico busca declarar al territorio nacional como libre de la Enfermedad de
Aujeszky

El Servicio Nacional de Sanidad, Inocuidad y Calidad Agroalimentaria (SENASICA),
productores y autoridades estatales realizan acciones sanitarias estratgicas para
que el territorio nacional alcance en 2014 el estatus de libre de la Enfermedad de
Aujeszky, en beneficio de la porcicultura mexicana.

Durante la Segunda Reunin Regional Centro-Occidente para coordinar las
acciones de sanidad necesarias, se presentaron los avances en los indicadores
tcnicos de la campaa durante el presente ao en materia de vigilancia activa en
la porcicultura tecnificada, de traspatio y rastros.

Hasta el momento, la regin centro-occidente del pas, que comprende los estados
de Colima, Estado de Mxico, Guanajuato, Jalisco, Michoacn, Morelos, Oaxaca,
Quertaro y San Luis Potos, registra un adelanto de 65% en el propsito de
declararse libre de la enfermedad.

Cabe destacar que el resto del pas ya se encuentra libre de la enfermedad y que la
declaratoria permitir a los productores de cerdo en el pas, colocar sus productos,
tanto en el mercado nacional, como internacional en condiciones ms
competitivas.
4 de Octubre 2013
Bibliografa
El Virus de la Enfermedad de Aujeszky.
http://www.midiatecavipec.com/porcicultura/porci110406.ht
m.
GRACIAS