UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN ANTONIO ABAD DEL CUSCO

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS

CARRERA PROFESIONAL DE BIOLOGA
Evaluacin de toxicidad en Vicia faba, L.
inducido por Cafena, Dicromato de
potasio y Metomilo
Presentado por:
Karen Jessica Jordn Quispe
Asesora:
Mgt. Griselda Muiz Duran
2013
INTRODUCCION
TOXICIDAD
AGENTE
EFECTO

ORGANISMO
De Prueba

DOSIS Y
TIEMPO
Vicia faba, L
FISICOS
QUIMICOS
ESTRUCTURAL
GENETICO
Evidentes daos
causados en los
ecosistemas
acuticos y
terrestres
La economa
El ambiente
Y la salud
pblica
Importante
conocer el
efecto toxico de
las sustancias
El uso
creciente y
mala
manipulacin
de sustancias
qumicas
JUSTIFICACIN
HIPTESIS
La Cafena, el Dicromato de potasio y el
Metomilo causan efectos txicos en los
meristemos radiculares de V. faba, L.
OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL:

Evaluar la toxicidad en Vicia faba L. inducida
por Cafena, Dicromato de potasio y Metomilo

OBJETIVOS ESPECIFICOS:

Determinar el efecto citotxico de Cafena,
Dicromato de potasio y Metomilo en la
germinacin de V. faba.

Medir el efecto genotxico de Cafena,
Dicromato de potasio y Metomilo en
meristemos de V. faba.

GENERALIDADES
TOXICOLOGIA:

Ciencia que estudia el mecanismos de accin y
los efectos provocados en organismos biolgicos
por un txico hasta la elaboracin e interpretacin
de pruebas. (Silbergeld, 2001).
TIEMPO DE EXPOSICION
TOXICIDAD DOSIS EFECTO
AGUDA UNICA
A los 14 das por lo general, sirve
para determinar la Dosis letal
media (DL
50
)
CRONICA
Constante,
relativamente baja
A largo plazo
(Bello y Lpez, 2001)
RELACION DOSIS-EFECTO y DOSIS-
RESPUESTA
%
G
e
r
m
i
n
a
c
i

n


S
e
m
i
l
l
a
s

%
G
e
r
m
i
n
a
c
i

n


REPRESENTACION SEMILOGARITMICA
DE LA RESPUESTA ACUMULADA
GENOTOXICIDAD
ADN
Error
- Perdidas
cromosmicas
- Reparto no
equitativo
El material
gentico
excluido
MICRONUCLEOS
SUSTANCIAS
QUIMICAS
TOXICAS
De uso
industrial
DICROMATO
DE POTASIO
CAFENA
De uso
agrcola
METOMILO
Bioensayo:
Efecto de
sustancia
qumica
Organismo
Bioensayo
Vicia faba, L


- Presenta cromosomas
de buen tamao.

- Es de fcil manejo y
relativamente
econmico .

- Clulas indiferenciadas.

- Aplicado por entidades
de proteccin ambiental
para la evaluacin de
muestras ambientales y
compuestos puros.
(Daz et al., 2004)



MATERIALES Y MTODOS
AREA DE ESTUDIO:
Laboratorio de Biologa Molecular ( C-264) de
la Facultad de Ciencias BiolgicasUNSAAC.

Material biolgico:
- Semillas de V. faba ( habas)

Material de laboratorio:
- Matraces de 500 ml
- Vasos de precipitado
- Pipetas serolgicas de 10 ml
- Probetas de 50 y 100ml
- Lunas de reloj
- Pinzas
- Placas Petri de 250mm
- Papel toalla
- Varilla de vidrio
- Papel aluminio.
- Bistur
- Parafilm
- Porta y cubre objetos.
Equipos:
- Balanza analtica
- Cmara de bioseguridad
- Vernier
- Microscopio ptico compuesto.
- Mechero.
- Cmara fotogrfica.

Reactivos:
- Hipoclorito de sodio al 5%
- Orcena actica clorhdrica al 2%
- Aceite de inmersin
- Metomil 90 PS
- Cafena pura anhidra
- Dicromato de Potasio para anlisis


Mtodos:
RESULTADOS Y DISCUSIN
Evaluacin de la prueba piloto:
EFECTO TOXICO DE CAFENA,
DICROMATO DE POTASIO Y
METOMILO EN LA
GERMINACION Y CRECIMIENTO
RADICULAR EN V. faba
Tratamiento N
Germinacin
SI % NO %
Blanco 20 20 100 0 0
Cafena
500 20 20 100 0 0
1 000 20 18 90 2 10
2 000 20 14 70 6 30
4 000 20 1 5 19 95
8 000 20 0 0 20 100
Dicromato
de Potasio

500 20 20 100 0 0
1 000 20 20 95 1 5
2 000 20 20 95 1 5
4 000 20 7 35 13 65
8 000 20 0 0 20 100
Metomilo
500 20 20 100 0 0
1 000 20 19 95 1 5
2 000 20 19 95 1 5
4 000 20 16 80 4 20
8 000 20 3 15 17 85
Cuadro N2: Efecto toxico de Cafena,
Dicromato de potasio y Metomilo en la
germinacin de V. faba
DETERMINACION DE LA CL50 Y ANALISIS PROBIT
Txico LC/EC 50
Cafena 2 172.787
Dicromato de
potasio
3 286.976
Metomilo 5 174.568
Cuadro N 4: Determinacin dosis-
respuesta de Cafena en V. faba
Concentracin
ppm
Concentracin
Log 10
IG %
Unidades
Probit
500 2.70 0 0
1000 3.00 10 3.72
2000 3.30 30 4.48
4000 3.60 95 6.64
8000 3.90 100 9.09
Cuadro N 5: Determinacin dosis-
respuesta de Metomilo en V. faba
Concentracin ppm
Concentracin
Log 10
IG % Unidades
Probit
500 2.70 0 0
1000 3.00 5 3.36
2000 3.30 5 3.36
4000 3.60 20 4.16
8000 3.90 85 6.04
Cuadro N 6: Determinacin
dosis-respuesta de Dicromato
de potasio en V. faba
Concentracin
ppm
Concentracin
Log 10
IG %
Unidades
Probit
500 2.70 0 0
1000 3.00 5 3.36
2000 3.30 5 3.36
4000 3.60 65 5.39
8000 3.90 100 9.09
Cuadro N 7: Determinacin dosis-respuesta de Cafena,
Dicromato de potasio y Metomilo en V. faba
Concentracin ppm
Concentracin
Log 10
Unidades Probit
Dicromato de Potasio Metomilo Cafena
500 3 0 0 0
1000 3 3.36 3.36 3.36
2000 3 3.36 3.36 4.48
4000 4 5.39 4.16 6.64
8000 4 9.09 6.04 9.09
Evaluacin del efecto
citotoxico de Cafena,
Dicromato de potasio y
Metomilo en la elongacin
radicular de V. faba
N ds % %ICR
Blanco 20 58.5519.07 100.00 0.00
Cafena
500 20 24.144.95 41.23 58.77
1 000 20 18.925.28 32.31 67.69
2 000 20 13.285.89 22.68 77.32
4 000 20 0.622.04 1.06 98.94
8 000 20 0.000.00 0.00 100.00
Dicromato de
Potasio

500 20 37.1411.85 63.43 36.57
1 000 20 35.949.94 61.38 38.62
2 000 20 26.98.73 45.94 54.06
4 000 20 8.178.13 13.95 86.05
8 000 20 0.000.00 0.00 100.00
Metomilo
500 20 43.8111.52 74.82 25.18
1 000 20 36.289.00 61.96 38.04
2 000 20 27.306.35 46.63 53.37
4 000 20 9.575.21 16.35 83.65
8 000 20 0.711.84 1.21 98.79
Cuadro N8: Porcentaje de Inhibicin de Crecimiento radicular
de Cafena, Dicromato de potasio y Metomilo en V. faba
EVALUACION DEL EFECTO
GENOTOXICO MEDIANTE LA
PRUEBA DE MICRONUCLEOS
Concentraciones MN/200 %MN %MN
Cafena
1 000
7 3.5
3
5 2.5
2 000
12 6
5.25
9 4.5
4 000
21 10.5
9.75
18 9
8 000
0 0
0
0 0
Dicromato de potasio
1 000
6 3
3
9 4.5
2 000
10 5
4.25
7 3.5
4 000
18 9
8.5
16 8
8 000
0 0
0
0 0
Metomilo
1 000
4 2
2.5
6 3
2 000
9 4.5
4
7 3.5
4 000
9 4.5
4.75
10 5
8 000
0 0
0
0 0
Cuadro N9: Presencia y porcentaje de microncleos en V. faba sometida a
4 concentraciones de Cafena, Dicromato de potasio y Metomilo

MUESTRA CONTROL (1 000X)
Cafena 1 000 ppm
Dicromato de potasio 1 000 ppm
Cafena 4 000 ppm
Metomilo 1 000 ppm
Dicromato de potasio 4 000 ppm
Metomilo 4 000 ppm
Cafena 2 000 ppm Dicromato de potasio a 8 000ppm
CONCLUSIONES
I. La Cafena, el Dicromato de potasio y el Metomilo tienen
efecto toxico en Vicia faba, L.
II. La dosis de Cafena y Dicromato de potasio que
presentan efecto toxico en la germinacin de V. faba, L. a
un 100% es de 8 000 ppm, mientras que para Metomilo a
esta misma concentracin se obtuvo un 85%.
III. El efecto citotoxico de Cafena, Dicromato de potasio y
Metomilo en el crecimiento radicular de V. faba, L se
encuentra a partir de 500ppm y esta efecto se incrementa
conforme aumenta la concentracin alcanzando un 98,
79% (Metomilo) y 100% (Cafena y Dicromato de potasio).
CONCLUSIONES
IV. La CL50 para Cafena es de 2 172.787ppm, para
Dicromato de potasio 3 286.976ppm y para Metomilo
5 174. 568ppm. Estableciendo con esto que Cafena
es ms toxico que Dicromato de potasio y Dicromato
de potasio ms toxico que Metomilo


V. La cafena, Dicromato de potasio y Metomilo tienen
efecto genotxico en V. faba L. Siendo 9,75% a 4 000
ppm el mayor porcentaje de microncleos observados en
tratamiento con cafena. Mientras que para el tratamiento
con Dicromato de potasio se obtuvo un 8,5% y para el
tratamiento con Metomilo el mayor porcentaje fue de
4,75% a esta misma concentracin.

SUGERENCIAS
1. Promover los mismos ensayos con otros organismos de
prueba utilizando, Cafena, Dicromato de potasio y
Metomilo, para validar el ensayo de Vicia faba L. como
biomarcador.
2. Realizar evaluaciones del efecto toxico a nivel citogentico
mediante la determinacin de ndice Mittico (IM),
Cromatidas hermanas, puentes cromosmicos.

Gracias