1.

Espectrofotometra UV-VIS, 6 horas, das 15, 16 de Octubre de 2012:

- Leyes de la absorcin UV-VIS
- Propiedades de la radiacin UV-VIS
- Origen de los espectros UV-VIS
- Principios de anlisis cuantitativo
- Instrumentacin en espectrofotometra UV-VIS
- Modos de trabajo y aplicaciones
2. Espectrofotometra IR (FTIR), 9 horas, das 17, 18, 19 de Octubre de 2012:
- Fundamentos de ls espectrofotometra IR y FTIR. Comparacin con otras tcnicas. Tipos de muestras.
- Mtodos de obtencin de los espectros. Tipos de espectros.
- Instrumentacin y tcnicas de medida
- Interpretacin y anlisis de espectros
- Aplicaciones al estudio estructural de biomolculas
3. Espectrometra de masas, 6 horas, das 22, 23 de Octubre de 2012:
- Introduccin, terminologa y fundamentos
- Instrumentacin: fuentes de ionizacin, analizadores, detectores y modos de trabajo
- Interpretacin de los espectros de masas
- GCMS
- LCMS
Espectrometra de masas
Espectrometra de masas, 6 horas, das 22, 23 de Octubre de 2012:
- Introduccin, terminologa y fundamentos
- Instrumentacin: fuentes de ionizacin, analizadores, detectores y
modos de trabajo
- Interpretacin de los espectros de masas
- GCMS
- LCMS

Introduccin


La espectrometra de masas (EM) es una
tcnica de anlisis basada en la separacin
de las especies cargadas formadas a
partir de la ionizacin de una muestra de
acuerdo a sus razones masa/carga
EspectroscopaEspectrometra de masas
No es un mtodo espectroscpico como las
tcnicas de IR o UV

Cambios qumicos no fsicos
Tcnica destructiva

Fundamento
Generacin de iones gaseosos a partir de la
muestra (molculas orgnicas gaseosas)
M +e
-
M
+
+ 2e
-


Separacin de los mismos en funcin de la
masa/carga

Deteccin con dispositivos adecuados

Obtencin del espectro que es una repre-
sentacin bidimensional donde se muestra la
abundancia de iones en ordenadas frente a la
relacin carga/masa de cada uno de ellos

Generacin de iones
M +e
-
M
+
+ 2e
-

M
+
catin-radical molecular excitado(Nuevas
rupturas)

E
+
+ R



radical

M
+

P
+
+ M molcula

Los iones que se forman dependen de la
estructura qumica de las molculas, en funcin
de la abundancia de estos iones podemos
identificar la molcula de la que partimos
Generacin de iones
La mayora de los iones producidos tiene una
carga correspondiente a la prdida de un solo
electrn (e = 1.6 10
-19
C), aunque tambin se
pueden obtener iones multicargados.
La carga total de los iones se representa
usualmente por q (q=ze), donde e es la carga
del electrn y z el nmero de cargas sobre el
in.


La masa se expresa en unidades de masa
atmica (u) o Dalton (Da) (1u = 1Da = 1.6654
10
-27
kg) de manera que la razn masa/carga
(m/z) se expresa en Thompson (Th = Da/z).
Los iones as separados son detectados como
corrientes inicas cuyas intensidades son
proporcionales a sus abundancias respectivas.

La Spectrometra de Masas
Necesita
Sistema de entrada
la muestra se introduce en el espectrometro
Fuente de iones la muestra se carga
Analizador de masas
Formadas como consecuencia de la ruptura
de las molculas de la muestra
Detector de iones
Sistema de vacio
Sistema de control
Sistema de datos
Intro-
duccin
de
muestra
Fuente
de
iones
Analizador
Detector
de iones
Sistema
de vacio
Sistema
de
control
y
manipul
acin de
datos
Iones en fase gaseosa Clasificacin de iones
Mass Spectrometry (MS)
Introduce sample to the instrument
Generate ions in the gas phase
Separate ions on the basis of
differences in m/z with a mass
analyzer
Detect ions
Componentes Variantes
Sistema de entrada 1 Directo
2 Indirecto
3 Columna capilar
cromatogrfica
Fuente de iones 1 Impacto electrnico
2 Ionizacin qumica
3 Ionizacin de campo
4 Desorcin de campo
5 Bombardeo con tomos
rpidos
6 Electroespray (nanospray,
microespray)
7 Matrix-assisted laser
desortion (MALDI)
Analizador de masas 1 Cuadrupolo
2 Trampa de iones (ion-trap)
3 Tiempo de vuelo (Time-of-
flight TOF)
4 Analizador FT-ICR
Formacin de iones en fase gaseosa
Muestras gaseosas ya ionizadas
El movimiento de los iones en el campo
puede ser manipulados fcilmente por
campos electromagnticos.
Espectrmetros muy sensibles precisos
Desventajas:
Dificultad de generar iones y colocarlos en
fase gaseosa
Muestras lquidas
Muestras slidas
Inlet
Ion
Source
Mass
Filter
Detector
Data
System
Sistema de alto vaco
Turbo bombas
Bombas de Difusion
+
Bombas de
desbaste Rotatorias
Sample Plate
Target
HPLC
GC
Solids probe
MALDI
ESI
IonSpray
FAB
LSIMS
EI/CI
TOF
Quadrupole
Ion Trap
Mag. Sector
FTMS
Microch plate
Electron Mult.
Hybrid Detec.
PCs
UNIX
Mac
Sistemas de entrada
Sodas directas para slidos puros
Las mezclas, deben separarse antes de entrar en el espectrmetro
Cromatgrafo de gases
Cromatgrafo de lquidos
equipos de cromatografa de lquidos (LC)
Cromatografa de fluidos supercrticos,
HPLC
electroforesis capilar

Introduccin indirecta: En este sistema, la vaporizacin de
la muestra se realiza en un recipiente externo al
espectrmetro; un baln de vidrio o de metal esmaltado
interiormente que se mantiene a temperatura elevada.
slidos sublimables, liquidos Tb<200, gases
Una vez vaporizado el producto en el baln, a una
presin de 10-2 mm de Hg, mediante un dispositivo
adecuado, escape molecular, se permite salir el vapor a
escala molecular ("molecular leak") hacia la fuente de
iones, que se mantiene a un elevado vaco (10-6 a 10-7
mm de Hg.); el vapor fluye hacia la fuente de iones con
gran rapidez debido a la diferencia de presin; el escape
molecular permite tener un flujo constante de molculas
hacia la fuente de iones.
Introduccin indirecta: En este sistema, la vaporizacin de
la muestra se realiza en un recipiente externo al
espectrmetro; un baln de vidrio o de metal esmaltado
interiormente que se mantiene a temperatura elevada.
slidos sublimables, liquidos Tb<200, gases
Sistemas de entrada
Introduccin directa
Problemas:
Muestras cristalinas no evaporan de forma continua y la
presin en el equipo no es constante (no para anlisis
cuantitativos)
Las muestras pueden contener impurezas que volatilicen
antes que la muestra (necesita secado para eliminar
disolventes) el disolvente vaporiza bruscamente y
aumenta la presin en el equipo.
MTODOS DE IONIZACIN
1 Impacto electrnico
2 Ionizacin qumica
3 Bombardeo con tomos rpidos
4 Ionizacin de campo
5 Desorcin de campo
6 Electroespray (nanospray,
microespray)
7 Matrix-assisted laser desortion
(MALDI)

A
u
m
e
n
t
o

d
e

l
a

e
n
e
r
g

a

y

f
r
a
g
m
e
n
t
a
c
i

n

MTODOS DE IONIZACIN
1 Impacto electrnico


El analito es introducido dentro de la fuente de ionizacin que esta al vaco
(<10
-6
mbar) y posteriormente ionizado por colisiones con un flujo de
electrones (a 70 eV).
1) Los electrones para este proceso
son generados por emisin trmica de
un filamento caliente. El filamento esta
tpicamente hecho de tungsteno o de
renio.
2) Los electrones son acelerados al
aplicar un potencial entre el filamento y
la muestra.
3) El rayo de electrones cruza la fuente
de iones, afectando las molculas
neutras que provienen de la muestra.
La corriente tpica del filamento es de
1x10
-4
Amp.

1 Impacto electrnico


4) Para enfocar los
electrones dentro de una
trayectoria determinada, se
utiliza un campo magntico
paralelo a la direccin del
movimiento de los
electrones , describen una
trayectoria helicoidal antes
de llegar al nodo.
1 Impacto electrnico
5) El haz de molculas procedentes del sistema de introduccin
de muestras, atraviesa el haz de electrones de alta energa,
colisionan con ellos pudindose dar en la muestra:
Eliminacin de un e-
ABC + e
-
ABC
+
+2e
-
Eliminacin de 2e-
ABC + e
-
ABC
2+
+3e
-

Captacin de electrones
ABC + e
-
ABC
-

Disociacin de la molcula
ABC + e
-
AB
+
+ C
+
+e
-

6) Una vez ionizada la muestra y en
su caso fragmentada se utiliza
una placa con carga positiva para
repeler los iones y expulsarlos
fuera del haz de elctrones. Con
potencial elctico 1
-10
kV

1 Impacto electrnico


1 Ionizacin por impacto
electrnico
1 Ionizacin por impacto
electrnico
E e- < V ionizacin
no se generan iones.
E e- > V ionizacin
A energa electrnicas elevadas, la interaccin molcula-
electrn es poco eficiente.
E e- = V ionizacin
la interaccin es de mxima efectividad cuando la longitud de
onda de los electrones () es comparable con las dimensiones
de los enlaces (d).
La existencia de un mximo ancho en la curva de eficiencia de
ionizacin precisamente alrededor de los 70 eV ( d 140
pm en molculas orgnicas).. Como promedio se produce un
in por cada 1000 molculas que
1 Ionizacin por impacto
electrnico
entran a la fuente en condiciones usuales, a 70 eV. En estas
condiciones de 10 a 20 eV son transferidos a las molculas
durante el proceso de ionizacin. Dado que aproximadamente 10
eV son suficientes para ionizar la mayora de las molculas
orgnicas, el exceso de energa origina una fragmentacin
abundante, pues la ruptura de enlaces qumicos requiere energas
del orden de 3-5 eV.
La ionizacin utilizando electrones con energas ligeramente
superiores al potencial de ionizacin genera iones moleculares con
poca energa en exceso y poco proclives a la fragmentacin.
Por encima de 30eV todos los iones fragmento que se observan a
70eV ya estn presentes en el espectro A un potencial de
aceleracin dado y a temperatura constante, el nmero de iones
producido por unidad de tiempo I en un volumen V est
relacionado con la presin p y la corriente electrnica i mediante
la expresin:
I = N p i V
1 Ionizacin por impacto
electrnico
Ionizacin por impacto
electrnico
La energa comunicada a los electrones
corresponde a 70 eV, mayor que la energa
de ionizacin de la molcula. El ion molecular
puede estar activado con una energa interna
superior al del estado fundamental.
No todos los impactos proporcionan la misma
energa, se obtienen molculas ionizadas con
un amplio abanico de energas
Ionizacin por impacto
electrnico
ABC
+
A
+
+ BC

ABC
+
AB
+
+ C

ABC
+
AC
+
+ B


Incluso a partir de iones procedentes
de los procesos secundarios que
tengan un elevado contenido de
energa, se podrn originar procesos
terciarios.

A-B-C
70eV e
-
< 70eV e
-
A-B-C
+
e
-
de baja energa
A
+
B-C

A

B-C
+
A-B
+
C

A-B

C
+
B

C
+
B
+
A
+
C

B
+
A

B

Un electrn choca contra una molcula
neutra
Se libera un nuevo electrn de una
molcula neutra y ion molecular de
alta energa
La energa adiccional se internaliza
amentando la energa de rotacin
vibracin y reagrupamientos
moleculares
Resultando nuevos fragmentos
1 Ionizacin por impacto
electrnico
Es de hacer notar, que al trabajar a un vacio tan
elevado, se evita la posibilidad de que se originen
reacciones bimoleculares, de forma que el ion de
mayor masa posible, ser el ion molecular, que al
ser detectado, originar en el espectro el llamado
"pico molecular"; este pico molecular,
suministrar informacin muy exacta sobre el
peso molecular de la muestra.
Ionizacin por impacto
electrnico
Dependiendo de la naturaleza de la molcula a estudiar,
algunos iones sern ms estables que otros, existiendo
algunos casos en los que el ion molecular
no se descompone casi,
mientras que en otros la importancia de los
procesos secundarios ser tan grande que apenas
quedar ion molecular.

El pico molecular presenta especial importancia
cuando se trabaja en combinacin con la
cromatografa de gases, por si solo permite en
muchas ocasiones lograr la identificacin del
compuesto sin necesidad de ms informacin.
1 Ionizacin por impacto
electrnico
Beneficios
bien entendida
se puede aplicar a prcticamente todos los compuestos
voltiles
espectros de masas reproducibles
fragmentacin proporciona informacin estructural
bibliotecas de espectros de masas pueden ser buscadas
de huella digital de masa espectral de IE
Limitaciones
muestra debe ser trmicamente estables y voltiles
el ion molecular puede ser dbil o ausente para muchos
compuestos.
Rango de masa
Baja Da normalmente menos de 1.000.
MTODOS DE IONIZACIN
2 Ionizacin qumica


La Ionizacin Qumica (Chemical Ionization CI)
es un mtodo de ionizacin relativamente suave,
La ionizacin es afectada por reacciones sobre la
molcula con iones de un reactivo gaseoso
generados por medio de ionizacin de impacto
electrnico (EI) con molculas del analito
neutras.
2 Ionizacin qumica

Ionizacin qumica utiliza reacciones de ion-molcula para
producir iones del analito.
El proceso de ionizacin se inicia cuando un gas reactivo
como el metano, isobutano, o amonaco es ionizado por
impacto de electrones.
Una alta presin (o tiempo de reaccin) resulta
reacciones entre los iones de gas reactivo y el reactivo
gas neutros.
Algunos de los productos de estos reacciones del ion-
molcula pueden reaccionar con las molculas de analito
producir iones del analito.
Ejemplo (reactivo R, muestra S, electrn e. electrn radical,
hidrgeno H):
R +e
-
R
+.
+2e
-
R. RH RH R.
RH S SH R
CH
4
+ e
-
CH
4
+
+ 2e
-

El in radical puede fragmentarse siguiendo las reacciones:
CH
4
+
CH
3
+
+ H

CH
4
+
CH
2
+
+ H
2

Sin embargo, en su mayor parte, dada la elevada presin,
reaccionar con otras molculas de metano:
CH
4
+
+ CH
4
CH
5
+
+ CH
3

Otras reacciones de los iones formados con el metano ocurrirn:
CH
3
+
+ CH
4
C
2
H
5
+
+ H
2

CH
2
+
+ CH
4
C
2
H
3
+
+ H
2
+ H

C
2
H
3
+
+ CH
4
C
3
H
5
+
+ H
2




2 Ionizacin qumica

2 Ionizacin qumica

Si la afinidad protnica de las molculas de la muestra M (AP,
energa liberada en la protonacin) es mayor que la del metano:
M + CH
5
+
MH
+
+ CH
4

En el caso de molculas que contienen heterotomos, la reaccin
de ionizacin principal ocurre a travs de reacciones cido-base
como la antes mostrada y con los iones C
2
H
5
+
y C
3
H
5
+
.
Si la muestra es un hidrocarburo saturado RH u otro compuesto de
baja afinidad protnica , la reaccin de ionizacin principal ser
una abstraccin de hidruro :
RH+ CH
5
+
R
+
+ CH
4
+ H
2
molculas polares, se observar tambin la
formacin de aductos ion-molcula, lo cual es un tipo
de solvatacin en fase gaseosa:
M + CH
3
+
(M

+CH
3
)
+

Especies moleculares, pseudomoleculares o cuasimoleculares
2 Ionizacin qumica

pueden formarse tanto iones positivos como negativos de la
sustancia en estudio como resultado de reacciones qumicas con
los iones del plasma
El surgimiento de iones negativos se explica porque el plasma
contiene electrones de baja energa, los cuales bien fueron
utilizados para la primera ionizacin y posteriormente se hicieron
ms lentos, o bien fueron producidos por reacciones de ionizacin.
Esos electrones lentos pueden asociarse con molculas originando
as iones negativos.
Los iones formados cuando se utiliza la tcnica de CI son
relativamente estables y los procesos de fragmentacin son
mucho menos acentuados que en la tcnica de EI. As, la tcnica
de CI tiene la ventaja de producir un espectro de masas en el cual
la especie molecular es fcilmente reconocible muchas veces
recomedable obtener ambos espectros de la muestra en estudio.
3 Bombardeo con tomos
rpidos
(Fast Atom Bombardment: FAB) la muestra est disuelta en
una matriz lquida no voltil, siendo la glicerina la
sustancia ms frecuentemente utilizada con este fin.
Sobre la disolucin se hace incidir un flujo de tomos
(Xe, Ar) con elevada energa cintica, logrndose extraer
iones y partculas neutras hacia la fase gaseosa. En
condiciones favorables las molculas de la muestra forman
una monocapa en la superficie de la disolucin que puede
mantenerse continuamente pese al bombardeo, por
difusin de otras molculas de muestra del seno de la
disolucin hacia dicha superficie.
Esto garantiza dos caractersticas muy deseables:
reproducibilidad y
presencia reducida de iones procedentes de la matriz en el
espectro.
3 Bombardeo con tomos
rpidos
3 Bombardeo con tomos
rpidos
FAB es muy eficiente para producir iones a partir de
compuestos polares con masas moleculares altas,
siendo muy til para el estudio de pptidos y
nucletidos.
Como se trata de una tcnica de ionizacin blanda, los
EM-FAB contienen esencialmente las seales de los
iones pseudomoleculares y muy escasa presencia de
iones fragmento.
Gran Reproducibilidad y permite realizar diferentes
tipos de anlisis a la misma muestra ya que mediante
esta fuente, los flujos de iones pueden mantenerse por
largos perodos de tiempo, en ocasiones de varios
minutos.
3 Bombardeo con tomos
rpidos
La fuente de ionizacin FAB tiene baja sensibilidad
comparada con otras fuentes recientemente
desarrolladas. El uso de una matriz hace que los
espectros sean ms complicados debido a las seales
que las mismas introducen. En la Tabla 4.1 se dan los
picos asociados a las matrices ms utilizadas en
fuentes de ionizacin FAB.
3 Bombardeo con tomos
rpidos
4 Ionizacin mediante
desorcin por lser asistida
por matriz
El pulso de lser realiza ambas
funciones: la vaporizacin e ionizacin
de la muestra.
Generalmente, pulsos de lser intensos
(10
6
-10
10
W cm
-1
) se enfocan sobre
una superficie reducida de muestra (10
-
3
- 10
-4
cm
2
), usualmente un slido.
Esos pulsos de lser crean un
microplasma de iones y molculas
neutras, los cuales pueden reaccionar
entre ellos en la densa fase vapor,
cerca de la superficie de la muestra.
4 Ionizacin mediante
desorcin por lser asistida
por matriz

Iones se generan en corto intervalos de
tiempo
Requieren analizadores rpidos de
deteccin simultanea o de tiempo de vuelo
Los iones producidos de la fragmentacin
molecular son >500 D
Para superar inconvenientes MALDI
MALDI (Matrix-Assisted Laser
Desortion Ionization)
1) La muestra en estudio se disuelve en una matriz de
molculas pequeas con gran poder de absorcin del laser
2)La mezcla se seca , se elimina el disolvente lquido,
queda la muestra dispersa en cristales de disolvente
(mezcla eutctica)
2) Aplicacin de impulsos intensos de laser sobre la
disolucin slida produce la sublimacin de los cristales de
la matriz que se expande en la fase gaseosa entrando en
esta las molculas a estudiar que se ionizan mediante:
fotodisociacin, transferencia protnica del estado excitado,
reacciones ion-molcula o desorcin de iones preformados
4 Ionizacin mediante
desorcin por lser asistida
por matriz
Tcnica mas sensible que las anteriores de laser
La presencia de molculas de matriz hace que la muestra se
disperse en ella y se evitan agrupaciones moleculares que impidan
la formacin de iones moleculares
La matriz tambin sirve para minimizar el dao que puede causar
el pulso de lser a la muestra, absorbiendo la mayor parte de la
energa incidente e incrementando la eficiencia de la transferencia
de energa del lser a la muestra.
Por esta va se incrementa notablemente la intensidad
No es necesario ajustar la longitud de onda para hacerla coincidir
con la absorcin de cada muestra pues es la matriz la que absorbe
la radiacin del lser.
MALDI permite la desorcin e ionizacin de sustancias con masas
moleculares muy altas. Por ejemplo, es posible la deteccin de
picomoles de protenas con masas moleculares superiores a
300 000 Da.
4 Ionizacin mediante
desorcin por lser asistida
por matriz
En la tcnica de ionizacin MALDI se han utilizado lseres de
diferente tipo.

Los lseres ultravioleta (UV) son los ms utilizados debido a su
fcil manipulacin y bajo costo, siendo los de nitrgeno (=
337 nm) los estndares.
Tambin se pueden utilizar lseres infrarrojos (IR) tales como
los de COB2B (= 10,6 m). Los espectros de masas MALDI
obtenidos con lseres UV e IR son esencialmente idnticos.
Una de las pocas diferencias es que en MALDI-IR ocurre
menos formacin de aductos y menos fragmentacin que con
un lser UV.
4 Ionizacin mediante
desorcin por lser asistida
por matriz
Las matrices deben:
tener una fuerte absorbancia a la longitud de onda del lser
masa suficientemente baja para que la sublimacin ocurra
con facilidad, estabilidad al vaco y prcticamente carecer de
reactividad qumica excepto su capacidad para ceder
protones.
No obstante, esta generalizacin es insuficiente para
garantizar que se pueda disponer de una matriz apropiada,
que contina siendo una seleccin guiada por la experiencia
prctica.
4 Ionizacin mediante
desorcin por lser asistida
por matriz
Los pasos ms importantes para la obtencin de un
espectro de masas MALDI son la seleccin de la matriz
y el protocolo de preparacin de la muestra.
En la Tabla se incluyen algunas matrices UV-MALDI
comunes. Una preparacin tpica de muestra para
MALDI se logra disolviendo 20mg de cido sinpico en
1mL de una mezcla acetonitrilo: agua: cido
trifluoroactico 50:50:0.1, se aade la muestra y
finalmente se evapora cuidadosamente el solvente.
4 Ionizacin mediante
desorcin por lser asistida
por matriz
Matriz UV MALDI Aplicaciones
cido -ciano-4-hidroxicinmico Pptidos, protenas, compuestos orgnicos
cido 3,5-dimetoxi-4-
hidroxicinmico(sinpico)
Biopolmeros de elevada masa molecular
cido 2,5-dihidroxibenzico(gentsico) Pptidos,protenas, carbohidratos
cido 3-hidroxipicolnico Oligonucletidos
Trihidroxiacetofenona Oligonucletidos, pptidos
cido 5-clorosaliclico Polmeros insolubles en agua.
4 Ionizacin mediante
desorcin por lser asistida
por matriz
La espectrometra de masas con fuente de ionizacin MALDI es un
poderoso mtodo para el estudio de polmeros y biopolmeros
sintticos.
Un espectro MALDI tpico incluye principalmente especies
moleculares monocargadas (iones cuasimoleculares), algunos iones
con carga mltiple y muy pocos fragmentos.
En protemica se utiliza la tcnica MALDI-TOF para identificar
protenas aisladas por electroforesis en gel y en la llamada peptide
mass fingerprint (ver aplicaciones).
En la Figura 4.11 se muestran dos espectros de masas obtenidos
utilizando la fuente de ionizacin MALDI. Obsrvese en (a) la
deteccin del in molecular del anticuerpo monoclonal y de algunas
especies multicargadas y la ausencia de fragmentaciones. En el
espectro del polimetacrilato de metilo (b) pueden detectarse las
especies moleculares de diferente grado de polimerizacin.
Figura

4 Ionizacin mediante
desorcin por lser asistida
por matriz
5 Ionizacin por electronebulizacin
(Nebulizacin elctrica)
5 Ionizacin por electronebulizacin
(Nebulizacin elctrica)
1) La muestra se disuelve en una fase mvil voltil
agua con acetonitrilo o metanol (1:1)
2) se bombea a travs de un fino capilar de acero inoxidable cuyo
extremo se encuentra a un potencial elctrico elevado (3-6 kV).
3) Este elevado potencial unido al pequeo radio de curvatura al final del
capilar crean un fuerte campo elctrico, que produce reacciones
de oxidacin-reduccin y hace que el lquido emerja como
gotas finas cargadas elctricamente
Las formacin de las gotas dependen de:
la velocidad del flujo
la tensin superficial
la conductividad de la solucin (debe ser baja) C
ionica
=10
-4
M
La nebulizacin ocurre a presin atmosfrica y es usualmente asistida
por un flujo de nitrgeno.
La niebla atraviesa una serie de cmaras con vaco creciente.
5 Ionizacin por electronebulizacin
(Nebulizacin elctrica)
5 Ionizacin por electronebulizacin
(Nebulizacin elctrica)
Analizadores
Tienen como misin separar y
enfocar los iones generados en la
fuente de ionizacin hacia el
detector de acuerdo con la
relacin m/z
Los analizadores constan de
campos elctricos y magnticos
que se llaman lentes
Caractersticas de los
analizadores
el lmite de masas superior o alcance de masas
valor ms alto de la razn m/z que puede ser
medido (thomson (Th) o unidades atmicas (u))

la transmisin (razn entre el nmero de iones
que llega al detector y el nmero de iones producido
en la fuente)

la resolucin (resolucin es la capacidad del
espectrmetro para detectar seales diferentes
correspondientes a iones con una diferencia de
masas pequea)
Analizador de sector
magntico
Cuando especies cargadas en movimiento son sometidas a
la accin de un campo magntico sufren deflexin, bajo la
accin de fuerzas descritas por la ley de Lorentz y cuya
magnitud est gobernada por el momento del in, tal como
se muestra en la Figura 4.15. La energa cintica del in es
esencialmente la adquirida a travs de la aceleracin a la
salida de la fuente inica y viene dada por:
Energa cintica de los iones
V= potencial de
aceleracin aplicado
a los iones que
salen de la fuente
inica y z el nmero
de cargas sobre
cada ion de masa m
que se mueve a la
velocidad v.
La fuerza centrpeta sobre el in que
experimenta la accin del campo
magntico B es igual a la fuerza
ejercida por dicho campo sobre una
carga en movi_. miento:
r es el radio del arco de la trayectoria
del ion que es deflectado
m r
m r
V r
B r
B r
Es posible lograr que los iones
alcancen a un solo punto del detector
de forma secuencial, lo cual significa
que r se mantiene constante, de
donde:

m
kB
2
V
V constante y variando el campo magntico B y el alcance de masas
depende de la potencia del magneto.
Analizador de sector
elctrico
donde E es el potencial elctrico (voltaje) entre los
platos del analizador electrosttico y r el radio de
curvatura de la trayectoria del in. Es evidente que los
iones con igual energa cintica se movern en una
trayectoria comn de igual radio r. Por lo tanto un
analizador electrosttico dispersa un haz inico de
acuerdo a sus energas cinticas.
Segn la ecuacin [4.8], en el sector elctrico la trayectoria de un haz
de iones con igual energa cintica describe un arco que depende
solamente del voltaje de aceleracin V y del campo elctrico E del
analizador electrosttico.
Combinacin de
analizadores magntico-
electrosttico
Los sistemas combinados que hacen uso de analizadores
electrostticos y magnticos estn presentes en los equipos
EM llamados de doble enfoque o doble sector. En esta
combinacin el flujo de iones puede ser colimado primero
en un analizador electrosttico y entonces los haces
correspondientes a iones de igual relacin m/z pero
diferencias ligeras en sus energas cinticas pueden ser
reenfocados por el analizador magntico tal como se
muestra en la Figura 4.19.

Analizador cuadrupolar
atravesarn el analizador cuadrupolar los iones
con determinada m/z, los dems se
desestabilizan y chocan contra las paredes.
Manteniendo constante la razn entre la amplitud
de los campos esttico y oscilante (U/V
constante) y variando su intensidad puede
lograse que salgan sucesivamente del analizador
iones de diferentes m/z y generarse un espectro
de masas.
Analizador cuadrupolar
El funcionamiento del analizador cuadrupolar no depende
de la energa cintica de los iones cuando stos abandonan
la fuente de ionizacin.
Es prctica comn acelerarlos 10-15 eV. Se requiere que el
tiempo empleado por los iones en transitar el analizador
sea corto comparado con el necesario para cambiar la
seleccin de un valor de m/z a otro pero lo suficientemente
largo para que ocurran varias oscilaciones del potencial
alterno.
El alcance de masas, o relacin m/z mas elevada
detectable, se limita a unos 4000 Th.
Analizador cuadrupolar
Dado que la velocidad de barrido de un analizador
cuadrupolar puede ser de 1000 Th/s e incluso mayor, el
barrido de un espectro completo es muy rpido lo que
resulta muy apropiado para su acoplamiento con sistemas
cromatogrficos y en el estudio de reacciones rpidas.
Estos analizadores son adems robustos, muy compactos,
de bajo costo comparados con otros tipos de analizadores y
de fcil utilizacin. Por otra parte, se trata de instrumentos
de baja resolucin (~3000), lo cual implica que usualmente
los espectrmetros de masas con analizadores
cuadrupolares son operados a "resolucin unitaria ", es
decir que trabajan con resolucin suficiente para separar
dos picos distantes una unidad de masas.
Analizador cuadrupolar
Es posible resumir el trabajo de un analizador cuadrupolar
de la manera siguiente: mediante la aplicacin de
potenciales elctricos estticos y alternantes a un
ordenamiento de cuatro placas polares paralelas, un haz de
iones puede ser filtrado a lo largo de su eje central para dar
un espectro de masas.
Los analizadores cuadrupolares son los ms ampliamente
utilizados en los EM modernos.

Un cuadrupolo con potencial esttico U nulo y valores
adecuados del potencial alterno V puede utilizarse para
explotar la capacidad de estos sistemas para enfocar los
iones hacia el eje central del mismo, actuando como un
lente de enfoque y dejando que todos los iones de
relaciones m/z superiores a un mnimo dado por V lo
atraviesen.
Analizador cuadrupolar
Est muy extendido el EM cuadrupolar
triple con 3 cuadrupolos:
el primero separa los iones procedentes de
la fuente inica
el segundo se realiza la activacin colisional
de los iones con un gas inerte o se
producen reacciones in-molcula si el gas
es reactivo, actuando como lente,
el tercero se analizan los iones resultantes
de la fragmentacin de los iones generados
en el segundo sistema de cuadrupolos.
Es un dispositivo formado por tres electrodos, dos de ellos
hiperblicos, y entre estos un electrodo en forma de anillo
toroidal. El sistema tiene el mismo fundamento que el analizador
de cuadrupolo.
Se aplican, simultneamente, una corriente continua y un
potencial de radiofrecuencia, de tal forma que los iones generados
quedan confinados dentro del anillo toroidal.
Los iones son expulsados de la cmara tras la aplicacin de
rampas de radiofrecuencia. Conforme aumenta el voltaje,
aumenta la amplitud de su movimiento oscilatorio hasta ser
expulsados.
Los iones de mayor masa se desestabilizan conforme va
aumentando el voltaje de radiofrecuencia, de tal forma que los
iones se detectan de forma secuencial, obteniendo as el espectro
en funcin del voltaje y la masa.
En sistemas que usan este analizador, la ionizacin se suele
realizar por impacto electrnico por medio de una fuente pulsante.
Analizador de trampa de iones.
Analizador de trampa de iones.
Estos dos voltajes de radiofrecuencia dan lugar a un
campo electromagntico cuadrupolar tridimensional en
el que quedan confinados los iones con una trayectoria
oscilante estable, dependiendo el movimiento exacto
de cada ion de los voltajes aplicados y de su relacin
m/z.
Para detectar los iones, se altera la seal de radio-
frecuencia del electrodo anular, lo que da lugar a la
desestabilizacin de la trayectoria de un ion en
concreto que es eyectado de la trampa. Un cambio
gradual en la amplitud del campo de radiofrecuancia,
dar lugar a que los iones sean eyectados de la trampa
en orden creciente de su relacin m/z, lo que dar:
Analizador de trampa de
iones.
Trampa de iones
Ventajas:
Las trampas inicas son muy simples y de bajo
coste, y se caracterizan porque son muy
sensibles.
Inconvenientes:
tienen poca capacidad de resolucin y hay
probabilidad de que se produzcan interacciones
in-molcula, por lo que suelen estar
asociados a un cromatgrafo de gases.


Analizadores de tiempo de
vuelo(Time-Of-Flight: TOF)
1)Los iones son extrados en pulsos de la fuente de
ionizacin
2) inmediatamente son acelerados mediante la accin de
un campo elctrico para lograr la uniformidad en sus
energas cinticas antes de que entren al analizador.
3) Los iones con movimiento rectilneo uniforme atraviesan
un tubo evacuado hacia el detector.
El tiempo necesario para atravesar la longitud del tubo
(tiempo de vuelo) depende del valor de la razn m/z de
cada ion.
Para iones con carga unitaria (z=1; m/z=m), el tiempo
necesario para recorrer la distancia de la fuente al detector
es depende de su masa, de manera que mientras mayor
sea sta, ms lentamente llegar el ion al detector.
En el caso del analizador TOF no
existen campos elctricos o
magnticos que obliguen a los iones
a describir complicadas trayectorias.
En la Figura 4.23 se ilustra el
funcionamiento de un analizador
TOF, que en este caso se denomina
TOF-lineal.
Analizadores de tiempo de
vuelo(Time-Of-Flight: TOF)
Funcionamiento de un analizador
TOF, que en este caso se
denomina TOF-lineal.
Analizadores de tiempo de
vuelo(Time-Of-Flight: TOF)
Si d es la distancia de la fuente de ionizacin al detector, entonces el
tiempo necesario para que un in atraviese el tubo de corrimiento ser:
manteniendo E constante en el instrumento, el tiempo de vuelo resulta:
Analizadores de tiempo de
vuelo(Time-Of-Flight: TOF)
ventajas
tiles combinados con fuentes de ionizacin blandas en el
anlisis de macromolculas.
Los analizadores TOF tienen una transmisin inica eficiente
por lo que son instrumentos muy sensibles.
Adems, el barrido de un espectro es muy rpido, por lo que
son componentes ideales en los equipos acoplados con
cromatgrafos.
Analizadores de tiempo de
vuelo(Time-Of-Flight: TOF)
desventajas
su baja resolucin espectral, lo que tiene su origen en
que iones de igual m/z presentan cierta dispersin en los
valores de energa cintica despus de la aceleracin, y
por lo tanto, iones de un valor de m/z dado se
superponen con los valores de m/z prximos al llegar al
detector.

Entre las variantes ms utilizadas para enfrentar esta
dificultad se destaca la utilizacin de un reflector inico
electrosttico, denominado reflectrn, que usualmente
est compuesto por una serie de rejillas y electrodos de
anillo.
El reflectrn crea un campo retardador que acta como
un espejo y enva los iones de retorno hacia el tubo de
vuelo

Analizadores de tiempo de
vuelo(Time-Of-Flight: TOF)
Modo de accin del reflectn
Resonancia ciclotrn-ion y
Espectrometra de Masas por
transformada de Fourier.
Si un in penetra en una regin donde est presente
un campo magntico y su vector velocidad es
ortogonal al vector induccin magntica, comenzar a
moverse describiendo un arco de crculo. A bajas
velocidades y campo magntico suficientemente
intenso, el radio de la trayectoria ser pequeo y en
estas condiciones puede ser "atrapado" de forma tal
que describa una trayectoria circular: este es el
denominado movimiento ciclotrnico y el principio de
la tcnica denominada Resonancia Ciclotrn-Ion (ICR).
Un ion de carga q (q = z.e) con velocidad lineal v inyectado en un
campo magntico B experimentar una fuerza magntica
equivalente a la fuerza centrpeta del movimiento:
El in se estabilizar en una trayectoria en la cual:
Sustituyendo la velocidad lineal v por la angular w , v = w r,
y dado que = 2 frecuencia ciclotrnica) :
a determinacin de la masa en este caso consiste en la
determinacin de la frecuencia, lo cual puede ser hecho con
mtodos diferentes, que son clasificados en dos categoras:
los que se basan en la observacin de frecuencias aisladas
y los que utilizan ondas complicadas y transformaciones de
Fourier.
Resonancia Ciclotrn Ion
Transformada de Fourier (Fourier Transform Ion
Cyclotron Resonance, FT-ICR, FT-MS)
Resonancia ciclotrn-ion y
Espectrometra de Masas por
transformada de Fourier.
Resonancia Ciclotrn Ion

magntico B est orientado a lo largo del eje-z. Los iones son
inyectados en la trampa a lo largo del ese eje-z, siendo
atrapados en esa direccin por un potencial elctrico V
(tpicamente de 1V) aplicado a los platos frontal y trasero.
Los iones rotan en el plano xy alrededor del eje-z debido al
movimiento ciclotrnico. El sentido de la rotacin indicado en
la Figura corresponde a iones positivos.
La aplicacin de una radiacin electromagntica (platos
emisores en la Figura 4.26) solo modifica el estado de
movimiento de los iones si aqulla posee la misma frecuencia
que la del movimiento ciclotrnico,; es ,pues, un fenmeno
de resonancia.
Los iones pueden en estas condiciones absorber energa de la
radiacin. La energa que de esta forma se transfiere al ion
eleva su energa cintica e incrementa el radio de la
trayectoria. Es posible medir la corriente imagen inducida por
la circulacin de los iones en la pared de la celda
perpendicular a la trayectoria de los iones (platos
receptores).
Para que los iones puedan ser detectados, tienen que
circular en sus rbitas coherentemente como paquetes
compactos. Cuando esto se cumple, iones de la misma m/z
excitados con la misma energa se encontrarn en la misma
rbita y rotarn con la misma frecuencia.
Si los iones estuvieran distribuidos aleatoriamente en
cualquier parte la rbita, cuando uno de ellos pasa cerca de
uno de los platos detectores, estadsticamente habr otro
de igual m/z pasando cerca del plato detector opuesto, por
lo que la corriente inducida resultante sera nula.
Para lograr observar una seal, los iones tienen que ser
excitados en un intervalo de tiempo muy corto, tal que se
encuentren agrupados en la rbita y de esa forma estn en
fase.
Transformada de Fourier (Fourier
Transform Ion Cyclotron
Resonance, FT-ICR, FT-MS)
Esta tcnica consiste en la excitacin simultnea de todos los
iones presentes en el ciclotrn mediante un barrido rpido de un
rango amplio de frecuencias en un tiempo de alrededor de 1 s.
Esto induce trayectorias que se acercan a la pared perpendicular a
la rbita donde los iones se mueven en fase (coherencia). Lo
importante es que iones de determinada m/z tienen una
frecuencia ciclotrnica caracterstica.
El registro de la corriente imagen como funcin del tiempo
permite, mediante una transformacin de Fourier, obtener el
espectro de frecuencias ciclotrnicas que se corresponde con el
espectro de masas(Figura 4.27). Estos analizadores actan
simultneamente como detectores (a travs de la corriente
imagen) y permiten conservar a los iones para manipulaciones
posteriores.
Los equipos FT-MS son excelentes en cuanto a
resolucin y sensibilidad en el campo de la EM pero su
alto costo hace que estn poco difundidos.
Los mtodos experimentales basados en la Resonancia
Ciclotrnica permiten la observacin de iones durante
un perodo de tiempo prolongado, lo que posibilita la
deteccin de iones de elevada m/z que se desplazan
lentamente en el ciclotrn y que no son observables
mediante otras tcnicas de Espectrometra de Masas.
El hecho de que la Resonancia Ciclotrn Ion posibilite
la eliminacin selectiva de iones de la celda mediante
irradiacin intensa a la frecuencias de resonancia
correspondientes a cada uno, y que tambin se puedan
mantener iones de un solo valor de la razn m/z
dentro de la celda, hace factibles los estudios de
altaresolucin de reacciones inicas.
Con esta tcnica, al igual que con permite la trampa
de iones, es posible el trabajo en tndem en el tiempo
(MSn).
Detectores
DETECTOR PUNTUAL:
Si el analizador es cuadrupolar el detector necesita cubrir
solamente un punto o foco en el espacio, de manera que un
espectro de masas completo se registra en el dominio del
tiempo. Este tipo de detector de iones se denomina detector
puntual.

DETECTOR COMPUESTO

Un analizador de sector magntico puede separar iones en el
espacio, lo cual permite que su llegada al detector pueda ser
registrado de forma simultnea. Este tipo de detector inico se
denomina detector compuesto, el registro del llegada de los iones
se realiza en el dominio del espacio
Clases de detectores

Multiplicadores electrnicos
Un ion positivo o negativo proveniente del analizador y
registrado en el dinodo de conversin causa la emisin de
varias partculas secundarias, las cuales pueden a su
vez dar lugar a iones positivos y negativos, as como a
partculas neutras.
Cuando iones positivos impactan al dinodo de conversin
de alto voltaje negativo, las partculas secundarias de
inters sern iones negativos y electrones.
Por el contrario, cuando iones negativos impactan al
dinodo de conversin de alto voltaje positivo, las partculas
secundarias de inters sern iones positivos.
Esas partculas secundarias son aceleradas en el dinodo
continuo e impactan al ctodo con energa suficiente para
desalojar electrones en la medida en que chocan con las
paredes internas curvilneas. Los electrones pasan
posteriormente al multiplicador electrnico e impactan
nuevamente las paredes, y causan la emisin de ms y ms
electrones en la medida en que se desplazan hacia el
potencial situado al final de las paredes. De esa forma se
crea una cascada de electrones que finalmente origina una
corriente medible al final del multiplicador electrnico. La
potencia de amplificacin es el producto del factor de
conversin (nmero de partculas secundarias emitidas por
el dinodo de conversin) y el factor de multiplicacin del
multiplicador electrnico dinodo continuo. Este valor puede
resultar del orden de 107.
Los multiplicadores electrnicos son muy sensibles, si
bien es cierto que su tiempo de vida es limitado debido
a la contaminacin de la superficie por los iones o por un
vaco relativamente pobre.
Detector (colector) inico
compuesto
El detector inico compuesto consiste en un nmero de
elementos de deteccin inicos ordenados en una lnea o en
varias lneas unas sobre otras en un plano. Cada elemento
de deteccin es un multiplicador electrnico. Por esta razn,
para la construccin de los detectores compuestos, los
multiplicadores electrnicos individuales tienen que ser muy
pequeos, de manera que puedan ser situados unos al lado
del otro en el menor espacio posible. Por ello, el diseo de
un elemento de un detector compuesto es
significativamente diferente al de un multiplicador
electrnico estndar utilizado para un detector de iones
puntual, aun cuando sus mtodos de trabajo son similares.
Considere un detector compuesto por dos multiplicadores
electrnicos, como se muestra en la Figura 4.30 y suponga
que un flujo de iones ha sido dispersado de acuerdo con los
valores de m/z 200 y 201.
El ion de m/z 200 entrar al primer elemento del detector y
el de m/z 201 al segundo, de forma tal que iones con los
valores sealados de m/z pueden ser detectados
separadamente a este nivel de dispersin.
De acuerdo con esta idea, puede asumirse detectores
equivalentes con n elementos. Una extrapolacin de lo
anterior lleva a que ms valores de m/z pueden ser
obtenidos si existen ms elementos de deteccin.
Sin embargo, ubicar un nmero muy grande de elementos
en un detector compuesto se torna tanto ms difcil
mientras mayor sea el nmero de elementos del detector, y
en la prctica se utiliza un nmero limitado de elementos.
detectores compuestos pueden ser utilizados para registrar
amplias regiones de un espectro de masas a baja resolucin
y slo regiones pequeas a alta resolucin.
La mayor ventaja de los detectores de iones compuestos
sobre los detectores de iones puntuales se encuentra en la
posibilidad que brindan de registrar un rango de valores de
m/z y la abundancia correspondiente de los iones, todo a
un mismo tiempo, que adems es muy breve.
Hay dos situaciones importantes en las cuales son
preferibles mediciones rpidas en espectrometra de
masas:
1.- Cuando se utilizan fuentes de ionizacin como la
desorcin por laser, en cuyo caso se produce un pulso en un
intervalo de tiempo muy corto, usualmente del orden de los
nanosegundos.
Si el detector se demora 1s para intentar barrer el rango de
valores de m/z de los iones producidos, slo podr detectar
iones durante los primeros nanosegundos.
Los detectores puntuales no valen, si los compuestos
Cuando resulta necesario detectar trazas de un material. El
problema prctico es que el espectro de masas debe ser
registrado lo ms rpidamente posible, para evitar el riesgo
de que los fragmentos inicos de la sustancia que existe en
tan baja cantidad no sean detectados durante el barrido. El
detector de iones compuesto permite registrar una regin
estrecha del espectro e incluso monitorear un solo valor de
m/z.

PC
Es tambin un instrumento que tiene que ser calibrado y
controlado en su funcionamiento. Las computadoras juegan
un rol esencial en todos estos aspectos.
La seal que sale de un espectrmetro de masas es un
voltaje analgico de amplitud variable en el tiempo, que
debe ser transformada a digital para que pueda ser
almacenada en la memoria de la computadora. Esto se
logra mediante un convertidor analgico-digital (ADC). Los
convertidores ADC/DAC permiten el acoplamiento
espectrmetro-computadora.
mediante el acoplamiento
espectrmetro-computadora se logra
la adquisicin y procesamiento de
datos experimentales, el control del
funcionamiento del espectrmetro de
masas y la presentacin y
manipulacin de la informacin
obtenida.
La seal digital proveniente del ADC es amplificada y
procesada para estimar el rea (abundancia inica) y
centro de gravedad (equivale al valor de m/z) de cada pico.
Estas dos informaciones, que se guardan en la memoria de
la computadora, identifican a cada pico del espectro de
masas.
Es importante destacar que los datos recogidos y
almacenados corresponden solo a los picos y no a los
intervalos entre ellos, lo cual significa que el procesador
realiza una importante reduccin del volumen de
informacin que se genera.
Mediante las computadoras se controla el funcionamiento
del espectrmetro de masas, introduciendo los valores de
diferentes parmetros necesarios para el trabajo del
instrumento. De forma anloga se realizan las calibraciones
necesarias.
Generar datos en la forma usual de un espectro de masas,
es decir, valores de m/z e intensidades de l los picos, tanto
para el espectro total como para un sector del mismo.
Tambin pueden ser obtenidos datos dependientes del
tiempo tales como: corriente inica total, temperaturas,
voltajes, potenciales de aceleracin y otras variantes
posibles.
Creacin de bases de datos y utilizacin en el anlisis
espectral. En estos casos los resultados confiables se han
obtenido utilizando principalmente fuentes de ionizacin
electrnica, las cuales generan espectros con buena
reproducibilidad. Productos totalmente diferentes podran
tener, de manera accidental, espectros de masas similares.
Calcular las composiciones posibles de iones de una masa
dada, teniendo presente solamente los elementos incluidos
en la frmula molecular.
Acoplamiento con otras tcnicas
instrumentales.
1 Acoplamiento cromatografa-
espectrometra de masas.
2 Espectrometra de masas en
tndem.
Acoplamiento Cromatografa-
Espectrometra de Masas
La Cromatografa es un mtodo utilizado para la separacin
de mezclas en sus componentes individuales, haciendo que
stos pasen a travs de una columna de un slido o un
lquido. Para que ocurra el proceso cromatogrfico son
necesarias una fase mvil y una estacionaria
CG fase mvil es un gas y la estacionaria una columna embebida de
lquido.
En la Cromatografa Lquida (CL) la fase mvil es un lquido y la
estacionaria generalmente es una columna de un slido poroso.
El flujo de la fase mvil a travs de la estacionaria, fuerza a
la mezcla a moverse por la columna cromatogrfica. Una
variante de la (CL) es la Cromatografa Lquida de Alto
Rendimiento (High Performance Liquid Chromatography:
HPLC), en la cual la fase mvil se somete a presin para
obtener una mayor eficiencia de separacin.
Por su parte, la Espectrometra de
Masas es un mtodo altamente
eficiente para deducir la estructura
qumica de una sustancia. Sin
embargo, su utilidad es limitada en
el anlisis de mezclas, debido a que
el espectro de masas de stas es una
complicada superposicin de los
espectros correspondientes a los
componentes individuales.
interfases entre el cromatgrafo y
el espectrmetro de masas
Cromatografa Gaseosa-Espectrometra de Masas
(CG/EM)
Acoplamiento de hendidura abierta









Acoplamiento directo


Cromatografa Lquida-Espectrometra de Masas (CL/EM)
Acoplamiento por interfase de flujo de partculas











Acoplamiento FAB de flujo continuo

interfases entre el cromatgrafo y
el espectrmetro de masas
Espectrometra de Masas en
Sucesin (tndem de masas)
Entre las tcnicas de activacin utilizadas con
este fin se incluyen las siguientes:
disociacin inducida por colisin (Collision-Induced
Dissociation : CID),
disociacin por captura electrnica (Electron Capter
Dissociation: ECD),
disociacin por transferencia electrnica (Electron
Transfer Dissociation: ETD) ,
disociacin multifotnica infrarroja (Infrared
Multiphoton Dissociation: IFMPD).
el primer analizador (EM1) genera el
espectro de masas de una sustancia y
selecciona los iones correspondientes a un
mismo valor de m/z, que se denominan
iones precursores.
Los iones precursores son activados y se
fragmentan, pasando al segundo analizador
(EM2), con lo que se obtiene el espectro de
masas de los iones precursores
seleccionados (barrido de iones fragmento).
categoras principales de tndem de espectrmetros EM-
EM:
en el espacio
acoplamiento de instrumentos (cuadrupolo triple)
en el tiempo.
(por ejemplo en una trampa de iones o la cmara de iones en un
ciclotrn)
pueden acoplarse sistemas EMn . Hasta ahora se han
construido sistemas que incluyen hasta cuatro analizadores
de masa acoplados. En la medida en que aumenta el
nmero de analizadores acoplados, crecen las capacidades
experimentales, tambin la complejidad y por supuesto, el
costo del instrumento.
Indicadores de la eficiencia de
un espectrmetro de masas
(a) Lmite de masas superior o alcance de
masas.
(b) Poder de resolucin.

(c) Transmisin.

(d) Sensibilidad.

(e) Lmite de deteccin.