TAMIZAJE FITOQUMICO Y EVALUACIN DE LA ACTIVIDAD ANTIHEMORRGICA Y OXITCICA DE LOS EXTRACTOS ACUOSO Y ETANLICO DE Lepidium bipinnatifidum Desv.

Tikre

AUTORAS: Anchayhua Ramrez, Rdyar. Huamn Avalos, Natalia. Fajardo Escate, Carmen.

ASESORAS: Q.F. Ferreyra Paredes Carmela. Dra. Chvez Orellana Hayde

INTRODUCCIN

DROGAS VEGETALES MEDICINA CONVENCIONAL

PER POSEE 25000 ESPECIES VEGETALES

Lepidium bipinatifidum desv.

HEMORRAGIAS POSPARTO METRORRAGIAS

POBLADORES DE ABANCAY

PLANTA MEDICINAL Lepidium bipinnatifidum Desv. Tikre

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Presentarn

actividad antihemorrgica y oxitcica los extractos etanlico y acuoso obtenidos de la parte area de Lepidium bipinnatifidum Desv. tikre?
HIPTESIS

Los

extractos etanlico y acuoso obtenidos de la parte area de Lepidium bipinnatifidum Desv. tikre poseen actividad antihemorrgica y oxitcica.

OBJETIVO GENERAL

Confirmar y evaluar el efecto antihemorrgico y oxitcico de los extractos acuoso y etanlico obtenidos de la parte area de Lepidium bipinnatifidum Desv. tikre.

OBJETIVOS ESPECIFICOS

Identificar los metabolitos secundarios presentes en los extractos obtenidos de la parte area de la especie en estudio. Determinar el extracto y/o las fracciones del tamizaje fitoqumico, con mayor efecto antihemorrgico y oxitcico, de la parte area de Lepidium bipinnatifidum Desv. tikre. Establecer el posible mecanismo de accin de los extractos obtenidos de la parte area de Lepidium bipinnatifidum Desv. tikre.

TIPO DE ESTUDIO

EXPERIMENTAL

MATERIALES Y MTODOS

MATERIAL VEGETAL

RECOLECCIN

TAXONOMA

Reino:Plantae Divisin:Magnoliophyta Clase : Magnolipsida Orden : Capparales Familia : Brasicaceae Gnero : Lepidium Especie : Lepidium bipinnatifidum Desv. Nombre vulgar: tikre

MATERIAL BIOLGICO

EQUIPOS

FRMACOS

ETAMSILATO HEPARINA ADRENALINA OXITOCINA

METODOLOGA
TAMIZAJE FITOQUMICO

ESTUDIO FARMACOLGICO

Determinacin de las actividades: Antihemorrgica. Oxitcica.

TRATAMIENTO DE LA PLANTA

EXTRACTO

CONCENTRACIN

SCREENING FITOQUMICO

Rx :
Gelatina FeCl3 Ninhidrina Shinoda

Rx: Libermann B. Bortraguer Rx: Liebermann B. Mayer Dragendorff Rx: Shinoda Rosenheim Libermann B. Mayer Dragendorff

Rx: Shinoda Rosenheim

ENSAYOS FARMACOLGICOS

I.- EVALUACIN DE LA ACTIVIDAD ANTIHEMORRGICA

Determinacin preliminar de la dosis efectiva antihemorrgica

a) TIEMPO DE COAGULACIN

GRUPOS DE TRABAJO
VEHCULO CONTROL POSITIVO ETAMSILATO EXTRACTO ACUOSO EXTRACTO ETANLICO O FRACCIN A FRACCIN B FRACCIN C FRACCIN D FRACCIN E

(TCB - TCP) x 100 TCB

%DISMINUCIN DEL TIEMPO DE COAGULACIN

b) TIEMPO DE COAGULACIN MODIFICADO POR HEPARINA

c) DETERMINACIN DEL EFECTO VASOCONSTRICTOR IN SITU EN EL MESENTERIO DEL SAPO

II.- EVALUACIN DE LA ACTIVIDAD OXITCICA

Despus de cada ensayo se realiz 3 lavados con la misma solucin, dejando pasar como mnimo 3 minutos entre cada prueba.

RESULTADOS

Tabla N 01: Metabolitos secundarios presentes en la especie

Lepidium bipinnatifidum Desv.

FRACCIN FRACCIN A METABOLITO Flavonoides Aminocidos Taninos Triterpenos y/o esteroides Quinonas Alcaloides Triterpenos y/o esteroides Flavonoides Leucoantocianidinas (Catequinas) Triterpenos y/o Esteroides Alcaloides Flavonoides Leucoantocianidinas (Catequinas) (-) = ausencia RESULTADOS + + + + + + + + + +

FRACCIN B FRACCIN C FRACCIN D

FRACCIN E

LEYENDA : (+) = presencia

Tabla N 01: N 02:

Comparacin del porcentaje del tiempo de coagulacin entre el frmaco Etamsilato y los grupos en estudio.
GRUPO DOSIS n PROMEDIO TIEMPO DE COAGULACIN (segundos)
BASAL 10min 20min 30min 40min

% DTC
9.41 57.08 69.58 49.38

VEHCULO CONTROL (Etamsilato) EXTRACTO ACUOSO EXTRACTO ETANLICO FRACCIN B FRACCIN C FRACCIN D FRACCIN E

300mg/kg 300mg/kg 300mg/kg 300mg/kg

4 4 4 4

85 60 60 120

94 30 30 73

63 24 23 60

74 25 10 50

77 24 10 60

300mg/kg 300mg/kg
300mg/kg 300mg/kg

4 4
4 4

118 173
153 165

12 40
110 120

12 18
15 20

15 12
23 12

17 10
30 120

88.13 88.44
70.915 58.79

Fuente: Datos obtenidos del trabajo experimental

%D.T.C.: Porcentaje de disminucin del tiempo de coagulacin n: nmero de animales de experimentacin por grupo

Tabla N 03: Efecto de la administracin de los extractos y

fracciones obtenidas a partir de Lepidium bipinnatifidum Desv. en ratones con tiempo de coagulacin modificado por heparina.
GRUPO DE RATONES n BASAL HEPARINA EXTRACTO ACUOSO + HEPARINA 3 3 60 seg. 150 seg. TIEMPO DE COAGULACIN En 10min >1800 seg. 245 seg.

EXTRACTO ETANLICO + HEPARINA

186 seg.

300 seg.

FRACCIN B + HEPARINA

120 seg.

238 seg.

FRACCIN C + HEPARINA

130 seg.

220 seg.

FRACCIN D + HEPARINA

180 seg.

240 seg.

FRACCIN E + HEPARINA

106 seg.

545 seg.

n: nmero de animales de experimentacin por grupo

Tabla N 04: Efecto de la aplicacin de los extractos acuoso, etanlico

y fracciones de Lepidium bipinnatifidum Desv. sobre el mesenterio del sapo en comparacin con la vasoconstriccin por adrenalina.

GRUPO ADRENALINA EXTRACTO ACUOSO EXTRACTO ETANLICO FRACCIN B FRACCIN C FRACCIN D FRACCIN E

RESPUESTA +++ ++ + + ++ ++ -

LEYENDA : (+++) = Vasoconstriccin potente

(++) = VC. Moderada

(+) = VC. Leve

(-) = No presenta VC.

Tabla N 05: Comparacin del efecto estimulante de oxitocina sobre el

msculo liso uterino de cobayo, frente a los extractos administrados.

y fracciones

GRUPO OXITOCINA EXTRACTO ACUOSO EXTRACTO ETANLICO FRACCIN B FRACCIN C FRACCIN D FRACCIN E

RESPUESTA (cm.) 2 cm. 1,7 cm.

CONTRACCIN (%) 100 % 85 %

0.6 cm.

30 %

1.8 cm. 1.9 cm. 1.6 cm. 0.1 cm.

90 % 95 % 80 % 50 %

DISCUSIN

Con respecto al estudio fitoqumico de los extractos Lepidium bipinnatifidum Desv. presenta flavonoides, alcaloides, esteroides y/o triterpenos, esto concuerda con los datos reportados para otras especies del gnero lepidium. De los ensayos para evaluar el efecto antihemorrgico se observ que todos los extractos y fracciones presentan dicha actividad y al comparar los resultados con el frmaco antihemorrgico Etamsilato resultaron ms efectivas las fracciones B y C con un %DTC de 88,13% y 88,44% respectivamente, superando al medicamento que obtuvo 57,8%.

Con respecto al mecanismo de accin se realiz un ensayo preliminar in situ en el mesenterio del sapo para evaluar el efecto vasoconstrictor, determinndose una moderada actividad. Adems en el ensayo para evaluar la actividad oxitcica se observ un alto grado de efectividad para las fracciones B y C, atribuyendo los posibles efectos a los metabolitos aqu presentes. Segn estos ensayos el mecanismo de accin podra involucrar el efecto sobre la musculatura lisa y la intervencin de los factores de coagulacin.

CONCLUSIONES

La marcha fitoqumica de la parte area de la especie en estudio reportan la presencia de metabolitos secundarios tales como: flavonoides, aminocidos, leucoantocianidinas (catequinas), alcaloides, triterpenos y/o esteroides. Las fracciones B y C obtenidas del extracto etanlico de la parte area de Lepidium bipinnatifidum Desv. presentaron mayor actividad antihemorrgica y oxitcica, adems el extracto acuoso demostr poseer un alto grado de actividad oxitcica. El posible mecanismo de accin podra estar orientado hacia la contraccin de la musculatura lisa del tero en la actividad oxitcica, y la vasoconstriccin activando los factores de coagulacin, para el efecto antihemorrgico Los resultados hallados en los ensayos farmacolgicos demuestran la actividad antihemorrgica y oxitcica Lepidium bipinnatifidum Desv. tikre

RECOMENDACIONES

Se recomienda aislar y elucidar los principios activos responsables de la actividad, as como realizar estudios de toxicidad.

Laguna de Huacachina-Ica

Cuando suees apunta siempre a la luna

y an si fallas te encontrars entre las estrellas Lou Tice

Muchas gracias