MICROSCOPIO

EL MICROSCOPIO
Proviene del griego micropequeo y ecopio observar Es un instrumento que permite observar objetos pequeos y demasiado pequeos.

HISTORIA DEL MICROSCOPIO

El microscopio se invento, hacia 1610, por Galileo, segn los italianos, o por Jansen, en opinin de los holandeses

Las primeras publicaciones importantes en el campo de la microscopia aparecen en 1660 y 1665 cuando Malpighi prueba la teora de Harvey sobre la circulacin sangunea al observar al microscopio los capilares sanguneos y Hooke publica su obra Micrographia.

A mediados del siglo XVII un comerciante holands, Leenwenhoek, utilizando microscopios simples de fabricacin propia describi por primera vez protozoos, bacterias, espermatozoides y glbulos rojos.

Tipos de microscopios

De campo claro

Se utilizan mtodos de tincin.

Permite observas clulas sin colorear, resulta til para clulas vivas.

Contraste de fases

Campo obscuro

Esta equipado con un condensador especial que ilumina la muestra con luz indirecta. Se utiliza para observar cristales de orina y el treponema pallidium. Se utiliza para molculas fluorescentes naturales ( vitamina A y neurotransmisores); se ocupa mas revelar fluorescencias agregadas.

Tipos de microscopio

Fluorescencia

Luz ultravioleta

Sirve para detectar cidos nucleicos mediante longitudes de onda especificas. Se puede cuantificar DNA y RNA de cada clula

Barrido confocal

Se usa para estudiar estructuras de los materiales biolgicos. Emplea un sistema de iluminacin con rayo laser.

polarizacin

Puede identificar sustancias cristalinas, fibrosas y queratina (minerales,citoesqueletos). Ya que cuenta con dos polarizadores uno que esta entre la fuente de luz y la muestra y el otro que esta entre el objetivo y el observados. Utiliza muestras ultra finas y la imagen se obtiene de dos electrones que atraviesan la imagen. Pueden aumentar hasta un milln de veces la muestra Permite observar texturas y objetos de tres dimensiones que hayan sido pulverizados con metales. Sus imgenes son en blanco y negro ya que no utilizan la luz. Sistema mecnico Sistema de iluminacin Sistema ptico

Electrnico de transmisin

Electrnico de barrido

Tiene mas de una lente de objetivo. Se utiliza para observar muestras compuesto transparentes o que han sido cortados con laminas muy finas.

PARTES DEL MICROSCOPIO

 Sistema

mecnico.

Est constituido por una serie de piezas en las que van instaladas las lentes que permiten el movimiento para el enfoque.

Microscopio

Comprende un conjunto de lentes * Sistema ptico dispuestas de tal manera que produce el aumento de las imgenes que se observan a travs de ellas

Comprende las partes del microscopio * Sistema de iluminacin que reflejan, transmiten y regulan la cantidad de luz necesaria para efectuar la observacin a travs del microscopio.

BRAZO.- Es la parte de donde se debe sujetar, las pinzas el carro el tubo

del microscopio y el revolver. Adems sirve para trasladar el microscopio de un lugar a otro.
BASE O PIE.- Es una pieza que proporciona estabilidad y sirve de

soporte a todas las partes del microscopio.

PLATINA.- Es una pieza metlica, cuadrada, que tiene en su centro una

PARTES DE SISTEMA MECANICO

abertura circular por la que pasar la luz del sistema de iluminacin. Aqu se coloca el portaobjetos con la muestra a observar.
PINZAS DE SUJECION.- Parte mecnica que sirve para sujetar a la

preparacin.
TORNILLO MACROMETRICO: Permite hacer un movimiento rpido hacia

arriba o hacia abajo del tubo o la platina, y se utiliza para localizar la imagen a observar.

TORNILLO MICROMETRICO.- Parte mecnica de movimiento giratorio que nos permite colocar en posicin cualquiera de los objetivos que se encuentran en l.
TUBO.- Parte mecnica que proporciona sostn a los oculares y objetivos. CREMALLERA.- Permite que el movimiento de los tornillos macro y micromtrico sea de mayor o de menor amplitud.

EL REVLVER: es una pieza giratoria provista de orificios en los que se

enroscan los objetivos. Al girar el revlver, los objetivos pasan por el eje del tubo y se colocan en posicin de trabajo, lo que se nota por el ruido de un pin que lo fija.

CARRO MVIL: es un dispositivo que consta de dos tornillos y est colocado

sobre la platina, que permite deslizar la preparacin con movimiento ortogonal de adelante hacia atrs y de derecha a izquierda

OCULAR.- Se localiza en la parte superior del tubo ocular y son las lentes que Capta y amplia la imagen formada en los objetivos. OBJETIVOS: Se encuentran incrustados en el revolver Son unos pequeos cilindros colocados en el revolver que proporciona el poder de resolucin del microscopio y determinan la cantidad total de aumento.

1.- La lupa (4 X) que sirve para hacer observaciones a bajo aumento. 2.- El objetivo seco dbil (10 X) que se utiliza para localizar la imagen que se va a observar. 3.- El objetivo seco fuerte (40 X) aumenta la imagen anterior, para poder observar se necesita primero acercar el objetivo al portaobjetos y posteriormente, enfocar el objetivo hasta que aparezca la imagen. 4.- El objetivo de inmersin (100 X) es un lente especial para observar imgenes tan pequeas como las bacterias. Y se requiere del aceite de inmersin para lograr una buena observacin.

SISTEMA OPTICO

 La

parte ptica del microscopio es la que determina el nmero de aumentos que presenta la imagen observada . El aumento total que permite un microscopio ptico se calcula multiplicando la magnificacin que producen el objetivo por la que producen los oculares.

Num. del objetivo X nm. de ocular = nm. de aumentos

ESQUEMA DE FUNCIONAMIENTO

CONDENSADOR.- est formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar los rayos luminosos sobre el plano de la preparacin, formando un cono de luz con el mismo ngulo que el del campo del objetivo. DIAFRAGMA: Existe un diafragma en el condensador, que elimina el exceso de luminosidad para tener una buena iluminacin del objeto a observar.

SISTEMA DE ILUMINACION

FUENTE DE LUZ.- Para observar la muestra microscpica es necesario que sta se ilumine con algn tipo de luz y nuestros microscopios cuentan con un foco que da energa elctrica que dirige sus rayos luminosos hacia el sistema condensador.

CUIDADOS DEL MICROSCOPIO

Pasos a seguir para observar una preparacin al microscopio ptico

1. se coloca el objetivo de menor poder de aumento y bajamos la platina hasta el tope inferior. 2. colocar la preparacin sobre la platina de forma que la muestra quede centrada en el orificio por el que pasar la luz. el portaobjetos debe quedar firmemente sujeto por las pinzas metlicas que en la platina. 3. ahora ya podemos comenzar con la observacin. se empieza con el objetivo de menor poder de aumento que hemos puesto en posicin en el primer paso. este normalmente es el de 4x.

N I C AS A R TR A P ES E PR MU DE

La preparacin de una muestra es diferente segn la naturaleza, propiedades, estructura y morfologa del organismo que se desea observar.

ESTUDIO IN VIVO

Se utiliza para el estudio de protozoos y hongos principalmente ya que solo sirve para observar objetos muy finos. Se utiliza para la investigacin de los caracteres de movilidad bacteriana y morfolgica, agrupacin y estructura de resistencias de parsitos.

*Nota: Requiere mxima limpieza

S A C o I v i N v C TE io in d u t s E

Examen en fresco
1.-

PREPARACIONES HUMEDAS: Para observar organismos acuticos (algas, larvas). Se pone una gota de liquido que los contiene sobre el portaobjetos y el cubreobjetos es puesto con cuidado para evitar burbujas de aire.

Gota pendiente
Se

utilizan portaobjetos excavados.

Se puede observar el movimiento de los microorganismos.

Nota: *Puede modificar la realidad de lo que se esta viendo

Examen fresco con NIGROSINA

Se

aade nigrosina (tinta china)

Se pueden distinguir bacterias incoloras Primordial para el estudio de capsulas y flagelos.

 Permite

Coloracin vital poner de relieve detalles sin matar al organismo.

No tien Es una sustancia toxica, as que se debe de usar en bajas concentraciones 1.- azul de metileno 2.- rojo neutro 3.- rojo cong 4.- verde Jannus

ESTUDIO IN VITRO
Consiste

en la observacin de clulas y tejidos muertos

Fijacin
Matar

a la clula lo mas pronto posible para que mantenga sus caractersticas morfolgicas y fisiolgicas. Evita que el tejido se pudra y se desintegre. La muestra no debe tener mas de 3 mm de espesor El fijador debe exceder en 50:1 a la muestra * Nota: Los fijadores son voltiles

Tincin

Para teir los cortes no deben tener parafina Si tienen parafina se sumergen en Xilol y este se elimina en alcohol absoluto, alcohol 70,alcohol 90 y agua destilada.

Tipos de tincin

Origen:

Naturales: animales o vegetales, ejemplo: eosina azafrn y carmn de cochinilla. Artificiales: carbn mineral cidos: tien lo bsico; eosina Bsicos: tien lo acido; azul de metileno Neutros: aniones y cationes son colorantes

Naturaleza