CRECIMIENTO BACTERIANO

BIBLIOGRAFA

CRECIMIENTO BACTERIANO

Brock, Madigan, Martinko, Parker. 2004. Biologa de los microorganismos, 10 ed, Prentice Hall.

Prescott, Harley, Klein 2004. Microbiologa, McGraw-Hill Interamericana.

Curso Microbiologa 2010. Fac. Agronoma. UdelaR CURSO MICROBIOLOGA 2011. FAC. AGRONOMA

Definicin de crecimiento microbiano Multiplicacin celular Ecuaciones matemticas del crecimiento Fases del crecimiento microbiano Metodologas usadas para cuantificarlo

CRECIMIENTO

IMPLICA UN AUMENTO ORDENADO DE TODOS LOS COMPONENTES CELULARES DE UN ORGANISMO Y AS AUMENTAR EL TAMAO DEL MISMO (ESTADO ADULTO).

DEFINICIN:

CRECIMIENTO EN MICROORGANISMOS:

AUMENTO EN EL NMERO CLULAS. NO TAMAO CELULAR

DE

UNA CLULA SE TRANSFORMA EN UNA COLONIA DE MILLONES DE CLULAS

FISIN BINARIA
Multiplicacin celular Multiplicaci

PROCESO GENERAL

ALTERNATIVAS A LA FISIN BINARIA

CRECIMIENTO DE POBLACIONES MICROBIANAS

GEMACIN

FISIN MULTIPLE

Atrospora

21

22

23

n 2

2n: n total de cl. en un cultivo (N)

DURANTE EL CRECIMIENTO ACTIVO DE UN CULTIVO MICROBIANO, LAS CLULAS CRECERN EN FORMA EXPONENCIAL

EXPRESIONES MATEMTICAS DEL CRECIMIENTO AL INICIO VAMOS A INOCULAR CON MS DE UNA BACTERIA (MILES )

Generaciones (n):
N = 1 X 2n

N = No X 2n

Nmero de divisiones celulares en un cultivo.

n= ( logNf-logNo) / log 2

n (Generaciones): Nmero de divisiones en un cultivo Log N = Log No + n*Log 2 n = (Log N Log No)/Log 2
Log 2= 0,301

Velocidad de crecimiento (Vc):

Vc= n/t
Es el nmero de generaciones (n) que ocurren por unidad de tiempo.

Tiempo de generacin (tg):

Es el tiempo requerido para que se duplique el nmero de clulas de la poblacin bacteriana.

tg=1/vc

TIEMPO DE GENERACIN EN CONDICIONES PTIMAS

Organismo
Bacillus cereus

Tiempo Generacin
(min)
28

CRECIMIENTO DE MICROORGANISMOS EN UN SISTEMA CERRADO (BATCH)

Escherichia coli

12.5

SIN AGREGADO DE NUTRIENTES EN EL TIEMPO

Staphylococcus aureus

27-30

Mycobacterium tuberculosis (agente de Tuberculosis)

792 932

SIN REMOCIN DE DESECHOS METABLICOS

Treponema pallidum

1,980

Curva de Crecimiento (BATCH)

FASE ESTACIONARIA
FA SE

FAS EE XPO NEN CIA L

UE RT E

1.Fase Lag (latencia) perodo de adaptacin, aumento de tamao individual; poco crecimiento 2. Fase Exponencial mximo crecimiento. Actividad fisiolgica alta. 3. Fase estacionaria tasa de crecimiento igual a tasa de muerte (falta de nutrientes y desechos metablicos). Metabolitos secundarios (antibiticos, vit., aa, toxinas). Bajo contenido ARN. Cl. pequeas. 4. Fase de Muerte acumulacin de metabolitos inhibidores y ausencia de nutrientes. Clulas viables poco abundantes.

EL F AS

AG

POCAS CL

CL VIVAS

CL. MUERTAS

CRECIMIENTO DIAXICO CULTIVO CONTNUO (QUIMIOSTATO) DOS SUSTRATOS:

AGREGADO CONTINUO DE NUTRIENTES Y REMOCIN DE DESHECHOS. NUTRIENTE LIMITANTE (CONTROL DEL CRECIMIENTO MICROBIANO) CONDICIONES AMBIENTALES CONSTANTES.

GLUCOSA Y LACTOSA

CULTIVO EN FASE EXPONENCIAL

MTODOS DE EVALUACIN DEL CRECIMIENTO 1. Determinacin del n de microorganismos Mtodos directos: recuento total
Recuento microscpico directo (cmara de Neubauer) Conteo electrnico (citometra de flujo)

MTODOS DE EVALUACIN DEL CRECIMIENTO

2. Determinacin de la masa celular
Mtodos directos Medida de la masa Medida del volumen Mtodos indirectos Determinacin del contenido de N, C, P, etc Turbidimetra

Mtodos indirectos: recuento de viables

Recuento en placa Filtracin por membrana e incubacin Nmero ms probable (NMP), en medio lquido

3. Determinacin de la actividad celular

Actividad enzimtica Concentracin de un metabolito Medida de la respiracin

Recuento en Cmara de Neubauer

Se obtiene n de clulas por unidad de volumen

Recuento en placa
Viables y cultivables Siembra superficie o incorporado

No se distinguen cl muertas. Cl. pequeas no se ven bien. No es til para muestras con baja abundancia celular

30- 300 unidades formadoras de colonias (UFC)

EXPRESIN RESULTADOS UFC/mL

Recuento de totales

Mtodos de evaluacin del crecimiento

Nmero ms probable (NMP)

Filtracin por membrana

Muestras lquidas Baja densidad bacteriana

NMP en un mL de la primera de las 3 diluciones

Turbidimetra
Estimacin de la biomasa celular Cuantas ms clulas haya ms luz se dispersa y ms Abs turbia aparece la suspensin Se utiliza un fotmetro o espectrofotmetro

Masa celular

Importancia del crecimiento en la industria

Levaduras (panificacin, cervezas, etc.) Bebidas alcohlicas (vinos, etc.) Antibiticos Inoculantes Protenas, aa, vitaminas

FACTORES QUE CONTROLAN EL CRECIMIENTO MICROBIANO

AMBIENTE: FACTORES ABITICOS: FSICOS: T, pH, [O2], PRESIN OSMTICA QUMICOS: NUTRIENTES FACTORES BITICOS COMPETENCIA (POR NUTRIENTES) PREDACIN Y LISIS VIRAL

EVALUACIN DEL CRECIMIENTO