4 - MONXIDO DE CARBONO

Determinacin de monxido de carbono en sangre por mtodos qumicos Los mtodos qumicos emplean la propiedad del monxido de carbono de reducir diversas sales metlicas oxidantes. Uno de los elementos metlicos ms usados es el paladio II (Pd+2 ), lo cual puede verse en la siguiente reaccin: Pd+2 + CO + H2O Pd + CO2 + 2H+

Este principio constituye la base de diversas metodologas tales como el mtodo de Gettler y Freimuth y el de microdifusin. Mtodo de Microdifusin Se basa en el poder reductor del monxido de carbono, el cual al ponerse en contacto con una solucin de PdCl2 , reacciona produciendo Pd. La reaccin se realiza en cmaras de Conway que poseen en el compartimento externo la muestra de sangre y el agente liberador (cido sulfrico) y en el interno el agente atrapante (PdCl2). En este caso, se produce la captacin y oxidacin del monxido de carbono, forzndose la remocin completa del mismo al cabo de un tiempo y temperatura determinados. El exceso de PdCl2 es valorado posteriormente con IK en presencia de goma arbiga. TECNICA Reactivos: Solucin de cloruro de paladio: disolver 0.222 g de cloruro de paladio en 25 ml. de cido clorhdrico 0.01N y completar a 250 ml con cido clorhdrico. Se prepara en el momento. Acido sulfrico 10% (P/V) Goma arbiga al 0.1% Solucin de ioduro de potasio al 15% (P/V) EQUIPOS Centrfuga a 5000 rpm. Especrofotmetro UV visible

Camara de Conway

Procedimiento: En el compartimento interno de la cmara de Conway se colocan 0.5 ml de PdCl2 0.01N y en el externo en sectores separados, 0.25 ml de H2SO4 y 0.25 ml de la muestra (sangre entera). Se cubre con la tapa sellando con grasa siliconada, para evitar posibles prdidas. A continuacin, se mezcla la sangre con el cido sulfrico mediante un suave movimiento de rotacin. Se deja difundir 1 hora a temperatura ambiente. La existencia de monxido de carbono se evidencia en forma indirecta a travs de la aparicin de una ptina platina de paladio metlico en el compartimento interno. Con una pipeta capilar se extrae la totalidad de la solucin del compartimento interno (Pd y exceso de cloruro de paladio). Luego se centrifuga con el objeto de separar el precipitado de Pd y se transfiere 0.1 ml del sobrenadante a un matraz de 10 ml. En otro matraz de 10 ml, se coloca 0.1 ml de solucin de PdCl2 0.01N (blanco). A cada matraz se agrega 1 ml de solucin de goma arbiga al 0.1% y 1 ml de IK al 15 %, se mezcla bien y se lleva a volumen. Se realiza la determinacin de la densidad ptica a 500 nm llevando a cero con agua destilada. El exceso de (Pd+2 ) con el ion ioduro da lugar a la formacin del complejo I4Pd =2. Luego se lee la absorbancia a 500 nm. Expresin de resultados A partir de la lectura de absorbancia de la solucin blanco, se calcula la concentracin de CO en la muestra inicial. Abst - AbsD mgCO%= Abst 0.05335*520

donde Abst y AbsD representa la densidad ptica del blanco y la muestra desconocida, respectivamente. El resultado se expresa en ml % considerando el factor de conversin correspondiente, el cual tiene en cuenta el PMCO , el volumen que ocupa un gas en CNPT siendo el mismo 0.8 ml/mg. A fin de lograr una adecuada interpretacin de los resultados, es conveniente expresar los mismos como % de carboxihemoglobina. Para ello, es necesario conocer el tenor de hemoglobina de la muestra y considerar que 1g de hemoglobina fija 1.34 ml de CO. INTERPRETACIN DE LOS RESULTADOS El monxido de carbono es el producto endgeno del catabolismo del hemo con un valor de saturacin de carboxihemoglobina entre 0.4 - 0.7%. El valor promedio de carboxihemoglobina encontrada en sangre de individuos no fumadores que habitan zonas urbanas es del 1-2%. Dicho valor llega a 5-6% en individuos fumadores. Los valores encontrados en los casos de envenenamiento fatales registrados representan valores superiores a 50% de saturacin. En vctimas de incendios se han registrado niveles de carboxihemoglobina entre 25 - 85% con un valor medio de 59%. Sin embargo, tambin se ha informado que la carboxihemoglobina en vctimas de incendio puede no ser significativamente alta.

CUESTIONARIO 1) Fundamento de las determinaciones de Gettler Freimuth. Funcin del agregado de cada uno de los reactivos. 2) Fundamento del mtodo de microdifusin. Reacciones involucradas. 3) Fundamento del mtodo de investigacin espectroscpica. Cules son las principales interferencias encontradas?