Test Ames Stephany Campeon Montiel 3°Bb El ensayo de Ames surge a partir de estudios de las interacciones entre la expresion génica y las mutaciones en bacterias. Constituye un ejemplo de como la investigacién basica puede llevar directamente a importantes avances en la salud publica. El mismo es un ensayo bioldgico para evaluar el potencial mutagénico de compuestos quimicos. Como el cancer esta vinculado a menudo con el dafo de el ADN, la prueba también sirve como un ensayo rapido para estimar el potencial cancerigeno de un compuesto, ya que las pruebas estandar para la carcinogenicidad hecho sobre roedorestoman afios para completar y son caras de hacer. El procedimiento se describe en una serie de documentos de principios del decenio de 1970 por Bruce Ames y su grupo en la Universidad de California, Berkeley. La prueba utiliza varias cepas de la bacteria Salmonella typhimuriumque llevan mutaciones en genes implicados en la sintesis de histidina, por lo que requieren histidina para el crecimiento. La variable esta poniendo a prueba la capacidad del mutageno para provocar un retorno al crecimiento en un histidina libre de soporte. Las cepas del probador estan especialmente construidas para tener una Mutacion con cambio puntual en los genes necesarios para sintetizar histidina, que permite la deteccién de mutagenos que actuan a través de diferentes mecanismos. Algunos compuestos son muy especificos, causando reversiones ensolo uno o dos cepas. El probador de cepas también lleva mutaciones en los genes responsables de la sintesis del lipopolisacarido, haciendo que la pared celular de las bacterias mas permeable, y en la supresi6n reparan el sistema para hacer la prueba mas sensible. Extracto de higado de rata se afiade para simular el efecto de metabolismo, ya que algunos compuestos, como el benzopireno, no son mutagénicas, pero si los son sus productos metabolicos. Ames es el método mas comtn que utiliza bacterias para probar si una sustancia quimica en particular puede causar mutaciones en el ADN del organismo de prueba, también sirve como un ensayo rapido y conveniente para estimar el potencial carcinédgeno de un compuesto porque los ensayos carcindgenos estandar en ratones y ratas requieren mucho tiempo (tardan de dos atres afios en completarse) y son costosos. Aunque también se sefiala que se conocen falsos positivos y falsos negativos. possible mutagen a high number of revertants (his: to hist) suggests the mutagen , causes mutations rat liver ae plate incubate ~~ media with ~ minimal histidine ~ plate incubate Salmonella strain : : (requires histidine) control plate (natural revertants) Los mutagenos son agentes que dafian el ADN y pueden, dependiendo de la capacidad de un organismo para reparar el dafio, provocar cambios permanentes (mutaciones) en la secuencia del ADN . Pero los agentes que dafian el ADN también pueden dafar los desoxinucledsidos trifosfato (dNTP), que utilizan las ADN polimerasas para replicarel ADN. Las mutaciones se producen si los nucledtidos dafados se incorporan al ADN de forma incorrecta. Alternativamente, los mutagenos pueden inhibir la reparacion Before: After: Incoming UV photon del ADN como se observa con la accién del cadmio en la via de reparacion de errores de coincidencia . La mayoria de los mutdgenos son agentes enddégenos que estan presentes en la célula en condiciones fisiol6gicas normales e incluyen especies reactivas de oxigeno y agentes alquilantes.