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WJARR-2023-1124 Es
WJARR-2023-1124 Es
Departamento de Biología Animal y Medioambiental, Facultad de Ciencias, Universidad de Port Harcourt, East-West Road,
P.M.B. 5323, Port Harcourt, Estado de Rivers, Nigeria.
Resumen
La contaminación por petróleo crudo es un problema medioambiental cada vez mayor en la mayoría de las
regiones petroleras del mundo. En este estudio se evaluó la eficacia del polvo de Eichhornia crassipes (jacinto de
agua) como bioestimulante potencial en la remediación de suelos contaminados con petróleo crudo mediante tres
tratamientos de prueba (20 ml, 60 ml y 100 ml) y un control. El proceso de remediación se supervisó analizando el
contenido total de hidrocarburos (THC) y el pH del suelo en 16 celdas durante 90 días. Se observó una reducción significativa
(p < 0,05) del pH del suelo y del THC con la introducción de E. crassipes en polvo a diferentes concentraciones. El suelo
contaminado enmendado con 40g de Eichhornia crassipes tuvo la pérdida más alta de THC (41%), seguido por el suelo
contaminado enmendado con 60g de Eichhornia crassipes (31%) en el último día de remediación. El total de
bacterias utilizadoras de hidrocarburos cultivables en el suelo contaminado tratado con Eichhornia crassipes aumentó de
1,4×106 UFC/g a 8,2×105 UFC/g, mientras que el total de hongos utilizadores de hidrocarburos cultivables en el
tratamiento con Eichhornia crassipes aumentó de 1,2 ×104 a 4,5 ×104 UFC/g desde la hora cero hasta el día 90 del estudio. El
efecto del tiempo en el proceso de remediación tuvo un valor P inferior a 0,05 para 20, 60 y 100 ml de
contaminación por petróleo crudo, lo que significa que el factor tiempo desempeñó un papel importante en el
proceso de remediación. El uso de fuentes de nutrientes orgánicos, como el polvo nutritivo de Eichhornia
crassipes, es muy útil como fuente de nutrientes limitantes necesarios para la biorremediación del medio
contaminado con petróleo crudo.
Palabras clave: Biorremediación; Petróleo crudo; Bacterias utilizadoras de hidrocarburos; Eichhornia crassipes;
Hongos utilizadores de hidrocarburos; Contenido total de hidrocarburos.
1. Introducción
Antes de los años 60, se prestaba poca atención a los efectos de los vertidos de crudo. Sin embargo, tres incidentes notables
despertaron la atención internacional: el naufragio del Torrey Canyon en 1967 (frente a las costas de Inglaterra), el vertido del
Exxon Valdez en 1989 frente a las costas de Alaska y el vertido masivo de crudo en 1991 durante la guerra del
Golfo. Todo ello dio lugar a un aumento de la investigación medioambiental y a la adopción de varias prácticas de
control nacionales e internacionales, como la Ley de Contaminación por Petróleo de 1990. A pesar de estos controles, los
riesgos medioambientales y la contaminación por petróleo siguen siendo un problema frecuente. Los vertidos
accidentales de petróleo a gran escala presentan un importante volumen de contaminantes en todo el mundo.
Además de estos accidentes catastróficos, los pequeños vertidos procedentes de filtraciones continuas de bajo
nivel, la exploración en alta mar, el lavado de tanques y otras actividades relacionadas también pueden causar
diversos problemas medioambientales debido a la presencia de compuestos tóxicos [1]. Los compuestos tóxicos del
Copyright © 2023 Los autores conservan los derechos de autor de este artículo. Este artículo se publica bajo los términos de la Creative Commons Attribution
Liscense 4.0.
petróleo crudo consisten en una amplia gama de hidrocarburos, compuestos de nitrógeno-oxígeno, compuestos de
azufre y metales pesados, que pueden causar efectos agudos y crónicos en la flora y la fauna [2], por lo que la
remediación de estos contaminantes es vital. Además, los suelos contaminados podrían plantear riesgos potenciales para la
habitación humana y el establecimiento de explotaciones agrícolas debido al aumento de la exposición y la
bioacumulación asociada de compuestos de hidrocarburos nocivos procedentes de las aguas subterráneas y los productos
agrícolas [3]. De ahí que esta investigación sea muy pertinente en el Níger.
∗
Autor correspondiente: Gold Ezinne Agu
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Delta de Nigeria, donde los frecuentes vertidos de petróleo derivados de las actividades de exploración y
explotación de crudo han devastado las tierras de labranza y otros asentamientos agrícolas [4].
Para la limpieza de lugares contaminados por petróleo se han utilizado procesos como el cultivo de la tierra, el lavado del
suelo, la extracción de vapores, la desorción térmica, el compostaje, la incineración y el uso de barreras antipetróleo y la
solidificación; sin embargo, son procesos perjudiciales, laboriosos y relativamente caros [5]. La biorremediación, que es el
uso de microorganismos mediante la adición de fertilizantes para mejorar su población o la adición directa de
microorganismos, se ha estudiado como medio para remediar el efecto nocivo de la contaminación por petróleo
crudo. Cuando el petróleo crudo se vierte en la tierra, las fracciones de hidrocarburos ligeros se evaporan mientras
que las fracciones grasientas penetran lentamente en el suelo y son biodegradadas lentamente por los microbios
que habitan de forma natural en el suelo. Estos microorganismos autóctonos del suelo llevan a cabo el proceso de
biodegradación del crudo con el tiempo. Las técnicas de biorremediación existentes son la atenuación natural, la
bioaumentación y la bioestimulación [6]. Estas técnicas se basan en la funcionalidad subyacente de aumentar el contenido de
materia orgánica del suelo y disminuir su pH para obtener mejores resultados. En algunos casos, la materia orgánica se añade
directamente al suelo contaminado o indirectamente en forma de compost como bioestimulante [3]. A menudo, en
los suelos contaminados, los nutrientes, aparte del carbono, están agotados, por lo que para aumentar la eficacia de
la biorremediación es crucial añadir nutrientes como nitratos y fosfatos para potenciar el crecimiento de los
microbios hidrocarbonoclásticos [7], lo que se denomina bioestimulación. A pesar de los numerosos efectos
positivos de los hidrocarburos del petróleo para la industrialización y la actividad humanas, la contaminación
ambiental por sustancias derivadas del petróleo representa una de las principales causas de contaminación marina y terrestre.
Entre las diversas tecnologías de remediación, la biorremediación se considera un enfoque limpio, rentable y
respetuoso con el medio ambiente, ya que, a diferencia de otros métodos físicos y químicos, no provoca contaminación
secundaria y, por lo general, da lugar a la mineralización completa de los hidrocarburos.
Este trabajo de investigación investigó la posibilidad de utilizar jacinto de agua en polvo (Eichhornia crassipes) como fuente
de nutrientes en el proceso de biorremediación de suelos contaminados con petróleo crudo y la posibilidad de que
sirva como acondicionador del suelo.
2. Materiales y métodos
Se recogió petróleo crudo ligero Bonny en una estación de flujo de la comunidad de Aluu y se analizaron los siguientes
parámetros: Carbono orgánico total (COT), materia volátil, contenido total de hidrocarburos (THC), nitrógeno total
Kjeldahl (TKN), contenido de cenizas y pH.
Se recogieron muestras de suelo limoso (subsuelo) en un terreno agrícola de la comunidad de Rumuekini, de acuerdo
con los procedimientos establecidos por la Organización de las Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentación
[9]. Las muestras de suelo se analizaron para determinar sus propiedades físico-químicas de la siguiente manera:
Nitrógeno total Kjeldahl (TKN), Carbono orgánico total (COT), Materia volátil, Contenido de cenizas, Fosfato, Potasio,
Nitrato, Sodio, Calcio, Magnesio, Materia orgánica y pH.
Los análisis fisicoquímicos de todas las muestras de ensayo se llevaron a cabo mediante el método de extracción
con disolvente, que se ajusta a los métodos de ensayo estándar (ASTMD).
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polvo.
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Se dejó que comenzara el experimento y se regaron y mezclaron los recipientes dos veces por semana para proporcionar
suficiente oxígeno y un entorno adecuado para el crecimiento de las bacterias. El pH y el contenido total de
hidrocarburos (THC) de las 16 cubetas se controlaron cada cuatro semanas durante un periodo de 12 semanas. Durante
todo el experimento se mantuvo una temperatura ambiente de 25oC a 35oC.
Las colonias discretas en las placas de agar nutriente se transfirieron asépticamente a una suspensión de glicerol al
10% (v/v), se etiquetaron bien y se almacenaron como cultivos madre para el mantenimiento de los a i s l a d o s bacterianos.
Mientras que los cultivos puros de aislados fúngicos se subcultivaron en Agar Potato Dextrosa en frasco bijou para la
conservación de los aislados fúngicos [10].
3. Resultados y debate
En la Tabla 1 se indican los resultados del análisis de las características del suelo y el resultado de los diversos tratamientos
empleados mediante tratamientos físicos y biológicos. Asimismo, se indican las propiedades fisicoquímicas del
suelo no contaminado, del petróleo crudo y del jacinto de agua procesado antes de la contaminación.
3.1. Efectos del agua procesada de lechuga (nutriente) en los parámetros fisicoquímicos del suelo
El resultado de los efectos de remediación de diferentes cantidades de jacinto de agua en polvo procesado en las
diversas concentraciones de suelo contaminado con petróleo crudo (CCS) con respecto a dos (2) parámetros
utilizando: pH e Hidrocarburo Total (THC) en diferentes etapas de remediación se muestran en la Tabla 2.
Tabla 2 Resultados de la biorremediación del suelo contaminado con petróleo crudo con jacinto de agua de la semana 0 a
la 12
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2 8.55 107.6 8.30 82.5 6.80 49.7 6.60 44.4
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respectivamente. El recuento microbiano para la atenuación natural (NA) fue de 7,0 × 106 ufc/g, 2,5 × 105 ufc/g, 2,0 × 105
ufc/g y 3,0
× 104 ufc/g respectivamente.
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La Tabla 4 muestra que la semana 12 tuvo 3,6 × 107 u f c / g , 5,0 × 104 ufc/g, 9,4 × 105 ufc/g y 8,0 × 103 ufc/g respectivamente,
mientras que
El recuento microbiano para la atenuación natural (NA) fue de 3,0 × 106 ufc/g, 1,0 × 105 ufc/g, 7,1 × 105 ufc/g y 9,0 × 103
ufc/g respectivamente.
4. Debate
La remediación del petróleo crudo en las distintas celdas se controló midiendo la concentración de contenido total de
hidrocarburos (THC) a lo largo del tiempo, que se utilizó como indicador de la remediación. Se descubrió que a 20,
60 y 100 ml de contaminación por petróleo crudo, la concentración de THC disminuía con el tiempo al variar la
concentración de jacinto de agua. Los gráficos se muestran en las figuras 1-3.
Se utilizó un análisis de varianza de 2 vías (ANOVA) para evaluar el efecto del tiempo y el efecto del jacinto de agua en el
proceso de remediación para 20, 60 y 100 ml de contaminación por petróleo crudo. Utilizando la herramienta de
análisis de datos Excel y asumiendo una hipótesis nula (H0) de ausencia de efecto significativo del proceso de
remediación y una hipótesis alternativa (H1) de efecto significativo en el proceso de remediación. Se acepta un efecto
significativo cuando el valor P es inferior a 0,05 y se acepta un valor no significativo cuando el valor P es superior a
0,05. Las Tablas 5-7 muestran los resultados resumidos del ANOVA de 2 factores de Excel para el efecto del tiempo y del
jacinto de agua para 20, 60 y 100 ml de contaminación por petróleo crudo. El factor tiempo mostró un efecto
significativo, mientras que el jacinto de agua no mostró mucho efecto.
Figura 1 Cambios semanales 20ml de contenido total de hidrocarburos en suelo contaminado enmendado con jacinto de
agua
Figura 2 Cambios semanales 60ml de contenido total de hidrocarburos en suelo contaminado enmendado con jacinto de
agua
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Figura 3 Cambios semanales 100ml de contenido total de hidrocarburos en suelo contaminado enmendado con jacinto de
agua
Los resultados obtenidos de la variación semanal del contenido total de hidrocarburos en Eichhornia crassipes frente al
tratamiento muestran que la biorremediación se produjo más en el nivel más alto de suministro de nutrientes a través de los
tres niveles de tratamiento, lo que a su vez implica que cuanto más altos son los nutrientes en un medio mayor es la
degradación de los contaminantes.
ANOVA
Fuente SS df MS F Valor P F crit
d
e variación
muestra 89941.95 3 29980.65 2.782972 0.10215 3.862548
semana 184949.9 3 61649.96 5.722695 0.017983 3.862548
Error 96956.01 9 10772.89
Total 371847.8 15
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ANOVA
Fuente de SS df MS F Valor P F crit
Variación
muestra 65042.71 3 21680.9 2.405968 0.034669 3.862548
semana 365163 3 121721 13.50759 0.00111 3.862548
Error 81101.71 9 9011.301
Total 511307.4 15
Con 20 ml de contaminación por petróleo crudo para el jacinto de agua, se observó que el valor P era inferior a 0,05
para los efectos del tiempo 2,76 × 10-3 y el valor P superior a 0,05 para el efecto del jacinto de agua era 0,088049.
La hipótesis alternativa se aceptó para el efecto del tiempo, mientras que la hipótesis nula se aceptó para el efecto del
jacinto de agua, respectivamente. Esto implica que el factor tiempo parece desempeñar un papel más importante en
la biorremediación que la contribución del jacinto de agua a la contaminación por 20 ml de petróleo crudo.
Con 60 ml de contaminación por petróleo crudo para el j a c i n t o d e agua, el valor P fue inferior a 0,05 para los efectos del
tiempo 0,017983 y el valor P superior a 0,05 para el efecto del jacinto de agua fue 0,10215. La hipótesis alternativa s e aceptó
para el efecto d e l t i e m p o , mientras que la hipótesis nula se aceptó para el efecto d e l j a c i n t o d e a g u a , respectivamente.
Esto implica que el factor tiempo parece desempeñar un papel más importante en la biorremediación que la
contribución del jacinto de agua a la contaminación por 60 ml de petróleo crudo.
Con 100 ml de contaminación por petróleo crudo para el jacinto de agua, el valor P fue inferior a 0,05 para los efectos
del tiempo 1,11 × 10-3 y el valor P inferior a 0,05 para el efecto del jacinto de agua fue 0,034669. Se aceptó la hipótesis
alternativa para el efecto del tiempo y el jacinto de agua. Esto implica que tanto el factor tiempo como el jacinto de
agua desempeñaron un papel importante en la biorremediación de 100 ml de petróleo crudo contaminado. Por lo
tanto, el jacinto de agua ayudó a la biorremediación de suelos contaminados con hasta 100 ml de petróleo crudo.
Ayudó a enmendar el suelo añadiendo nutrientes al suelo contaminado.
La gestión del jacinto de agua, una especie vegetal problemática e n l o s c u r s o s de agua nigerianos, mediante un uso eficaz
como la biorremediación, será sin duda un avance bienvenido en el África subsahariana y en otras partes del mundo donde la
planta posee problemas ecológicos y se buscan regularmente tecnologías de remediación más baratas.
La respuesta de las b a c t e r i a s autóctonas que utilizan hidrocarburos al tratamiento de biorremediación fue generalmente
positiva, con un aumento progresivo de la población a medida que transcurría el tiempo. Odokuma y Dickson [11] en
un estudio de biorremediación en un manglar del nuevo río Calabar, en el estado de Rivers, fueron capaces de aumentar
las bacterias que utilizan hidrocarburos utilizando fertilizantes NPK. El fertilizante NPK aumentó la biocarga del suelo
contaminado del manglar de 1,5×103 a 1,5×109 UFC/g.
5. Conclusión
El objetivo a largo plazo del diseño de la biorremediación es desarrollar un enfoque rentable y respetuoso con el medio
ambiente. El polvo de jacinto de agua, además de ser rentable, es respetuoso con el medio ambiente.
Los resultados de este estudio han demostrado que el tratamiento biológico con jacinto de agua (Eichhornia crassipes)
nutriente son eficaces en el suministro de nutrientes limitantes necesarios para la biorremediación de suelos
contaminados con petróleo crudo. Esto se vio reforzado por la disminución significativa del pH del suelo y del contenido
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total de hidrocarburos (THC), junto con una elevada pérdida de THC.
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En todos los casos estudiados, el efecto del tiempo desempeñó un papel más importante en la eliminación del petróleo crudo
del suelo. Estas conclusiones se obtuvieron tras someter los datos recogidos a un análisis de varianza de dos vías. Estas
medidas correctoras respetuosas con el medio ambiente están orientadas al desarrollo sostenible del delta del Níger.
Agradecimientos
El autor desea agradecer a la profesora A. I. Hart su orientación, que ha reforzado y mejorado la calidad de este trabajo
de investigación. Estoy muy agradecido a mis padres, el difunto Chief Dcn Okechukwu Agu y Lolo (Sra.) Dorathy
Chinyere Okechukwu Agu, cuyo amor incondicional y apoyo financiero me impulsaron a este logro, y a mis hermanos,
el Dr. Prince Okechukwu y el Sr. Favour Okechukwu, cuyo amor, cuidados y oraciones fueron constantes para la
realización de este trabajo. Les doy las gracias. Mi agradecimiento especial al Sr. Japhet, del Departamento de Ciencias
Vegetales y Biotecnología, al Sr. Ebaddan Curtis Williams, de Analab laboratory services, Ibadan, y al Sr. Austin, del
Departamento de Microbiología, por su cooperación durante los análisis. Se agradece enormemente al Sr. Udi
Emoyoma Ogheneovoh las minuciosas y exhaustivas estadísticas llevadas a cabo en este estudio.
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