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2) Biorremediacion de Suelos Contaminados Con Diesel
2) Biorremediacion de Suelos Contaminados Con Diesel
ISSN: 0124-177X
rgya@unalmed.edu.co
Universidad Nacional de Colombia
Colombia
Arrieta Ramírez, Olga Maria; Rivera Rivera, Angela Patricia; Arias Marin, Lida; Rojano, Benjamín
Alberto; Ruiz, Orlando; Cardona Gallo, Santiago Alonso
Biorremediación de un suelo con diesel Mediante el uso de microorganismos autóctonos
Gestión y Ambiente, vol. 15, núm. 1, febrero-mayo, 2012, pp. 27-39
Universidad Nacional de Colombia
Medellín, Colombia
Resumen
En este estudio, se aisló y caracterizó bioquímica y molecularmente un consorcio bacteriano
capaz de degradar los diferentes hidrocarburos presentes en un combustible diesel, conformado
por los siguientes géneros: Enterobacter sp, Bacillus sp, Staphylococcus aureus, Sanguibacter
soli, Arthrobacter sp y Flavobacterium sp, a partir de un suelo contaminado con diesel a escala de
laboratorio, y tratado mediante 2 tecnologías de biorremediación: atenuación natural y bioestimulación.
Se definió como parámetro de control la concentración de Hidrocarburos Totales del Petróleo (HTP)
y para el cual, se obtuvo una reducción en la concentración en un periodo de 4 meses de 36,86%
para atenuación natural y 50,99% para bioestimulación. La medición de la eficiencia de remoción de
hidrocarburos se cuantificó por cromatografía de gases acoplada a masas (GC-MS). 1. Magister en Medio Ambiente y
Desarrollo, Especialista en Gestión
Ambiental, Universidad Nacional
de Colombia, Sede Medellín.
Palabras claves: Consorcio bacteriano, Hidrocarburos, Biorremediación, Atenuación
Natural, Bioestimulación. 2. Ingeniera Biológica, Universidad
Nacional de Colombia, Sede
Medellín
In this study was isolated and characterized biochemical and molecular a bacterial consortium 4. G r u p o d e I nve s t i g a c i ó n
able to degrade hydrocarbons several, comprised of the following genres: Enterobacter sp, Bacillus sp, en Ciencia de los Alimentos,
Staphylococcus aureus, Sanguibacter soli, Arthrobacter sp y Flavobacterium sp, from soil contaminated Universidad Nacional de Colombia,
Sede Medellín
with diesel fuel in a laboratory scale, and treated with two technologies for bioremediation: natural
attenuation and biostimulation. We obtained a reduction in the concentration of Total Petroleum 5 . D i re c t o r L a b o ra t o r i o d e
Hydrocarbons (TPH) in a period of 4 months was 36,86% for natural attenuation and 50,99% for Suelos, Universidad Nacional de
biostimulation. Measuring the oil removal efficiency was quantified by gas chromatography coupled Colombia, Sede Medellín
1. INTRODUCCIÓN
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2. MATERIALES Y MÉTODOS
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Figura 2. Dosificación de
nutrientes en las bandejas de
bioestimulación.
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3. Resultados y discusión
B1 B2 B3 B4 B5 B6 B7
Gram + + + - V* + -
Tabla 3. Resultados de la
identificación bioquímica del
Morfología Bacilo Coco Bacilo Bacilo Bacilo Bacilo Bacilo
consorcio bacteriano aislado Catalasa + + + + - + -
(Results of the biochemical Oxidasa - - - - - - -
identification of isolated bacterial
consortium) Los géneros aislados han mostrado tener la capacidad metabólica de transformar los
hidrocarburos, contenidos en el combustible diesel, transformando las moléculas con características
de peligrosidad en subproductos y metabolitos, convirtiendo los elementos tóxicos y mutagénicos en
productos que pueden ser reincorporados a los ciclos biogeoquímicos naturales.
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A continuación se muestran los cromatogramas de las bandejas del control en la Figura 1, así
mismo los tratamientos de atenuación natural en la Figura 2 y bioestimulación Figura 3, además el
suelo inicial antes del derrame experimental en la Figura 4.
Figura 5. Cromatograma
por GC/MS Inicial vs Final del
tratamiento de Bioestímulo
(GC/MS chromatograms Initial
and Final in the Biostimulation
treatment)
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4. DISCUSIÓN
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mínimo de sales, el cual es bastante restrictivo en los elementos que aporta a los microorganismos
para su crecimiento y desarrollo.
Pese a ello, lograron aislarse a partir del suelo 7 cepas bacterianas correspondientes a
los siguientes géneros Enterobacter sp, Bacillus sp, Staphylococcus aureus, Sanguibacter soli,
Arthrobacter sp y Flavobacterium sp, éstas mostraron la capacidad de adaptarse a las nuevas
condiciones del medio, pues el suelo empleado para el estudio, era un suelo de pastoreo que no
había tenido contaminación previa con hidrocarburos, como se evidenció en la Figura 6.
En el seguimiento realizado al experimento, se pudo evidenciar una condición de anoxia,
aproximadamente en los días 10 a 20, lo cual se manifestó con olor amoniacal en los microcosmos
correspondientes al tratamiento de bioestimulación, en este mismo tiempo el rendimiento en la
degradación para este tratamiento presentó una disminución; la falta de oxigenación en el medio, hizo
que el aceptor final de electrones en el sistema fuera el nitrógeno; biológicamente en sistemas
aeróbicos parte del amoniaco puede ser oxidado a nitrito y nitrato por bacterias autóctonas (Cookson.
1995).
Otro factor determinante para el crecimiento y desarrollo óptimo de las bacterias
hidrocarbonoclastas es el tiempo de incubación, las cajas después de la siembra fueron incubadas
a temperatura ambiente durante 7 días, se hicieron ensayos en los cuales algunas de las cajas se
dejaron el doble del tiempo, obteniéndose un crecimiento mayor.
Pudo determinarse, de acuerdo al porcentaje de degradación de diesel, que el tratamiento de
bioestimulación es más eficiente en la remoción de hidrocarburos a partir de suelos contaminados. La
atenuación natural, presentó buenos resultados pero es una técnica poco recomendable para tratar
derrames de hidrocarburos, pues los tiempos necesarios para el restablecimiento o la recuperación
del ecosistema suelen ser tan largos, que permiten que el contaminante se mueva y genere impactos
negativos no solo en el sitio del derrame sino también en ecosistemas adyacentes. Claro está que un
suelo con baja porosidad y arcilloso el movimiento de los contaminantes puede ser mínimo.
Es importante dilucidar que otros procesos pueden intervenir en la degradación de HTPs. En el
caso del tratamiento control, es posible que se estén dando procesos abióticos, como transformaciones
químicas y en menor medida volatilización o fotólisis, debe tenerse en cuenta que a pesar de haber
controlado el pH para inhibir el crecimiento bacteriano y de haber aplicado un antimicótico ambiental,
existe la posibilidad que hayan microorganismos, tanto hongos como bacterias, metabólicamente
activos, capaces de adaptarse a estas nuevas condiciones y llevar a cabo el proceso de degradación.
Queda para futuras investigaciones, establecer la posibilidad de definir cuál es el rol que
cumple cada una las especies microbianas al interior del consorcio, pues se sabe que cada un de las
especies involucradas cumple un determinado papel en el proceso de biodegradación. Sorkhoh y Col
(1995) sugieren que cada cepa o género tiene un papel específico en los procesos de transformación
de los hidrocarburos, pues observaron un cambio en la composición de las poblaciones bacterianas
a través del tiempo.
4. CONCLUSIONES
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para llevar a cabo un proceso óptimo de degradación, controlar otras variables, como son: cantidad
de nutrientes, viabilidad, temperatura, pH y oxígeno, este último considerado uno de los factores más
limitantes en los procesos de biodegradación de hidrocarburos, su disminución o baja disponibilidad
puede conducir a la formación de metabolitos tóxicos que finalmente inhiben el crecimiento bacteriano
(Sudarat et al., 2000).
El uso de inóculos microbianos exógenos especializados en la descontaminación ha
tenido éxitos y fracasos (Alexander, 1999). En casos de suelos potencialmente contaminados por
hidrocarburos con exposiciones largas o recurrentes, la población autóctona habitualmente responde
eficientemente a estrategias de bioestimulación incrementando su población y consiguiendo una
biodegradación significativa de los contaminantes (Alexander, 1999). De hecho, se han descrito
resultados favorables en procesos de bioestimulación en suelos contaminados con distintas familias
de hidrocarburos; con aceites minerales pesados (Sabaté et al., 2004), en suelos contaminados por
Hidrocarburos Aromáticos Policíclicos (HAPs) (Samanta et al,. 2002; Atagana, 2004), en enclaves
contaminados con crudo de petróleo (Macnaughton et al., 1999; Van Hamme et al., 2003; Kaplan y Kitts,
2004), con Bifenilos Policlorados (PCBs) (Nogales et al., 2001) y con herbicidas (Singh et al., 2003).
En las situaciones en que la población nativa degradadora de hidrocarburos es inexistente o
muy baja, debido características de peligrosidad intrínseca de la matriz contaminante o por ser un
sitio contaminado recientemente, el uso de inóculos exógenos puede ser beneficioso (Vogel, 1996;
Alexander, 1999). Se han descrito numerosas situaciones en las que el bioaumento ha funcionado,
en suelos, lodos y aguas subterráneas contaminadas. Sin embargo, es necesario en cada caso
particular estudiar la necesidad o no de aplicar inóculos exógenos, así como sus condiciones óptimas
de aplicación (Vogel, 1996).
5. AGRADECIMIENTOS
REFERENCIAS
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