Identificación de Carbohidratos

Jennifer Natalia Prieto Solano1/Laura Sofia Avendaño 2/Valeria Rodríguez

Rodríguez3
Resumen medio de las diferentes pruebas realizadas
Introducción. Los carbohidratos son con los reactivos se identificó la muestra
compuestos de gran importancia ya que patrón donde se concluye que es
son una gran fuente de energía para el monosacárido reductor, que es aldosa,
cuerpo, estos constituyen tres grupos pentosa, siendo esta una ribosa.
funcionales, un alcohol, un aldehído y una Discusión de Resultados. La

cetona, para la identificación de identificación de carbohidratos, a partir de

carbohidratos es fundamental conocer la la prueba de molisch, donde se identifica
prueba de Molisch, Benedict, Bial, los carbohidratos, benedic donde se
Seliwanoff, Barfoed y Lugol, así mismo identifica los azúcares reductores, Barfoed
para que sirve cada uno de ellos, de igual donde se diferencia los disacáridos
forma conocer la clasificación de los reductores de monosacáridos reductores,
carbohidratos, donde se encuentra los Seliwanoff donde se identifica cetosas, Bial
monosacáridos, oligosacáridos y donde se identifica pentosas y Lugol donde
polisacáridos, también se que son los se identifica si es un almidón y glucógeno,
azucares reductores y reconocer la así mismo, las reacciones de los diferentes
glucosa, fructosa, almidón, y ribosa, así reactivos y que se observa en cada uno.
mismo el ácido sulfúrico, B-naftol y ácido Conclusiones. Se logra identificar el
clorhídrico. azúcar presente en una muestra problema,
Objetivo. Reconocer e identificar el azúcar así mismo identificar azúcares utilizando
presente en una muestra problema, así pruebas cualitativas.
mismo Identificar azúcares utilizando Palabras Clave. Carbohidratos, reactivos,
pruebas cualitativas. Metodología. A partir pruebas, azúcares reductores, reacción
de las pruebas de Molish, Bial, Seliwanoff, química.

Benedict, Barfoed, y Lugol con sus Abstract

respectivos reactivos se identifica los Introduction. Carbohydrates are very
carbohidratos en las muestras, cada important compounds as they are a great
prueba se distinguirá por una solución source of energy for the body, these
patrón y se expondrán a procesos de constitute three functional groups, an
ebullición y precipitación. Resultados. Por alcohol, an aldehyde and a ketone. This
1.
Estudiante de la Universidad de la Salle, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Programa
Medicina Veterinaria, Asignatura Bioquímica Código 10202026, Grupo 01/2. Estudiante de la
Universidad de la Salle, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Programa Medicina Veterinaria,
Asignatura Bioquímica, Código 14202087, Grupo 01./3.Estudiante de la Universidad de la
Salle, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Programa Medicina Veterinaria, Asignatura
Bioquímica, Código 14202061, Grupo 01.
laboratory report dealt with the Key words
identification of carbohydrates in the Carbohydrates, reagents, tests, reducing
standard sample, through different tests sugars, chemical reaction.
with reagents such as molish, bial,
Introducción
seliwanoff, lugol, barfoed, benedit.
A continuación, se abordará un tema de
Objective. Recognize and identify the
mucha importancia como es la
sugar present in a problem sample, as well
identificación de carbohidratos.
as Identify sugars using qualitative tests.
Los carbohidratos (también llamados
Methodology. From the tests of Molish,
hidratos de carbono, glúcido, sacáridos,
Bial, Seliwanoff, Benedict, Barfoed, and
azúcar) son biomoléculas compuestas por
Lugol with their respective reagents, the
carbono, hidrógeno y oxígeno.
carbohydrates in the samples will be
Los carbohidratos funcionan como reserva
identified, each test will be distinguished by
energética, pudiendo usarse de manera
a standard solution and they will be
inmediata porque las despensas
exposed to boiling and precipitation
energéticas tienen la capacidad de
processes, subsequently we will observe in
movilizarse rápidamente para producir
the microscope.
glucosa en caso de que sea necesario. Es
Results. Through the different tests
la primera fuente de energía de los seres
carried out with the reagents, the standard
vivos. (Cox, 1970)
sample was identified as a reducing
Los carbohidratos no son sólo una fuente
monosaccharide, which is aldosa, pentose
importante de producción rápida de
of 5 carbons, this being a ribose
energía en las células, sino que son
Results Discussion. Identifying
también las estructuras fundamentales de
carbohydrates, from the molisch test,
las células y componentes de numerosas
where carbohydrates are identified,
rutas metabólicas. (Trudy McKee, s.f)
benedic where reducing sugars are
Los carbohidratos se definen
identified, Barfoed where reducing
sencillamente desde el punto de vista
disaccharides differ from reducing
químico como polihidroxialdehídos o
monosaccharides, Seliwanoff where
polihidroxicetonas, o bien sustancias que
cetosas are identified, Bial where pentose
por hidrólisis dan lugar a este tipo de
and Lugol are identified where it is
compuestos. Los polihidroxi aldehídos son
identified if it is a starch and glycogen, as
compuestos orgánicos en los que todos los
well as the reactions of the different
átomos de 2 carbono están unidos a un
reagents and that is observed in each.
grupo hidroxilo excepto uno de ellos que
Conclusions. It is possible to identify the
forma parte de un grupo aldehído, mientras
sugar present in a problem sample, as well
que las polihidroxicetonas son compuestos
as Identify sugars using qualitative tests.
orgánicos en los que todos los átomos de
carbono están unidos a un grupo hidroxilo
excepto uno que forma parte de un grupo
cetona. (Andión, s.f)
Los monosacáridos son azúcares simples
se pueden unir entre sí por deshidratación
para formar disacáridos, trisacáridos o
polisacáridos. Estos son solubles en agua
o disolubles en éter. Están formados por un
grupo cetona o un grupo aldehído.
Su grupo funcional es la cetona CO o C=O
localizados en el C2; y los aldehídos CHO
localizados en el C1.
Los Oligosacáridos son la maltosa, lactosa
y la sacarosa. Se dan por la unión de dos
o más monosacáridos hasta 10. Por medio
de la hidrólisis liberan 2 o más moléculas
de monosacáridos
El grupo más importante de los
oligosacáridos es el de los disacáridos, o
azúcares dobles, que son la unión de dos
monosacáridos, mediante pérdida de una
molécula de agua formando así un enlace
tipo éter. (MAÑAS, s.f).
Los disacáridos son carbohidratos
compuestos por 2 unidades de
monosacáridos unidos por un enlace
glucosídico. (Uriel Zierra Martinez, s.f).
Los monosacáridos más importantes son:
fructosa, galactosa y glucosa, mientras
que los disacáridos más importantes son:
sacarosa, lactosa y maltosa. (Universidad
del Turabo, s.f).
Los polisacáridos son biomoléculas
formadas por la unión de una gran cantidad
de monosacáridos. Se encuentran entre
los glúcidos, y cumplen funciones diversas,
sobre todo de reservas energéticas y
estructurales.
Los Polisacáridos como el glucógeno, el
almidón, la celulosa y la quitina. Estos se
hidrolizan liberando más de 10 moléculas
de monosacáridos. (Antonio Peña Díaz,
2002).
Los azúcares reductores son aquellos
azúcares que poseen su grupo carbonilo
intacto, y que a través de este pueden
reaccionar como reductores con otras
moléculas que actuarán como oxidantes.
(Lehninger, 1988)
El análisis cualitativo revela la identidad de
las sustancias presentes en una muestra.
Los análisis cualitativos se fundamentan
en reacciones químicas o en la medida de
alguna propiedad física característica de la
sustancia. (Almiñana, 2014)
Reactivo de Molish permite el
reconocimiento general de carbohidratos
en el que los polisacáridos y disacáridos se
hidrolizan con ácido sulfúrico concentrado
hasta monosacáridos y se convierten en
derivados del furfural o 5-hidroximetil
furfural los cuales reaccionan con α-naftol
formando un color púrpura violeta. (Jorge
tadeo lozano Universidad de Bogotá, s.f)
Figura 1: Estructura del reactivo de
Molish
Obtenido de: Figura 3: Estructura del reactivo de
https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/1/
Seliwanoff
19/Molisch_test.png/700px-Molisch_test.png

Reactivo de Bial: “Esta reacción detecta la

presencia del furfural producido en medio
ácido por las pentosas. El reactivo de Bial
contiene orcinol disuelto en HCl
Obtenido de: https://i0.wp.com/quimicafacil.net/wp-
concentrado. El ácido provoca la formación
content/uploads/2018/12/Seliwanoff.jpg?resize=1024%2C
del furfural y el orcinol se condensa con 286&ssl=1

este último para producir cromógenos de

Reactivo de Benedict: Se fundamenta en
color verde-azul.”
que el ion cúprico proveniente del sulfato
Figura 2: Estructura del reactivo de
cúprico, en medio alcalino es capaz de
Bial
reducirse por efecto del grupo Aldehído del
azúcar a su forma de Cu +. Este nuevo ion
se observa como un precipitado rojo ladrillo

Obtenido de: https://i2.wp.com/quimicafacil.net/wp-

correspondiente al óxido cuproso. La
content/uploads/2018/12/Bial-ensayo.png?w=728&ssl=1 reacción es similar a la reacción con el
reactivo Fehling.
Reactivo de Seliwanoff: Es una reacción
para diferenciar cetosas de aldosas; Figura 4: Estructura del reactivo de
aunque ambas dan la reacción. Los Benedict
azúcares son distinguidos a través de su
función como cetona o aldehído. “El
fundamento químico del ensayo es que las
cetosas al ser calentadas en un medio
Obtenido de:
acido, se deshidratan más rápido que las http://bdigital.unal.edu.co/55024/7/TatianaAlejandraHuerta
aldosas, y reaccionan con dos sN.2016.pdf

equivalentes de resorcinol para producir

Reactivo de Barfoed: “Es débilmente ácido
una molécula de color rojo cereza,
y es reducido solamente por
indicativo de reacción positiva Las aldosas
monosacáridos, formándose como
también reaccionaran, pero más
producto de reacción óxido cuproso. Se
lentamente, dando un ligero tono rosado
fundamenta como muestra la figura en la
fácilmente diferenciable del resultado
reducción de cobre 2+ que hace parte del
positivo.” (Huertas Tatiana, 2016)
acetato cúprico a cobre 1+ en forma de
Óxido cuproso, formando un precipitado
color rojo ladrillo.” (Anónimo. 2014)
Figura 5: Estructura del reactivo de
Barfoed
Obtenido
http://almez.pntic.mec.es/~mbam0000/paginas/LABORAT
ORIOs/azucares_archivos/image001.jpg
Reactivo de Lugol: “Sirve para identificar si
se está manejando un polisacárido, un
disacárido o un monosacárido. En la
presencia de un polisacárido como el
almidón, el ion triyoduro reacciona para
generar un complejo con la estructura del
almidón, que se visualiza con
coloración azul oscuro.” (Ánimo, 2019).
Con el Almidón reacciona para dar una
coloración azulada o negra gracias a la
formación de hélices donde la cadena
lineal del almidón se une con las moléculas
de yodo. El glucógeno forma
coloración pardo-rojiza, debido a que es
parcialmente hidrolizada.
El agua destilada es aquella sustancia
cuya composición se basa en la unidad de
moléculas de H2O y ha sido purificada o
limpiada mediante destilación. (Jorge
tadeo lozano Universidad de Bogotá, s.f)
NaOH 10% también conocido como soda
cáustica. Se utiliza en la industria petrolera
en la elaboración de lodos de perforación
base agua. A nivel doméstico,
reconocidas sus utilidades para
desbloquear tuberías de desagües de
cocinas y baños, fabricar jabón casero,
entre otros.
El ácido clorhídrico (HCl) concentrado es
una disolución acuosa del gas cloruro de
hidrógeno. Es muy corrosivo y ácido.
aprovecha el ácido clorhídrico a veces en
la síntesis de cloruros orgánicos bien por
de: sustitución de un grupo hidroxilo de un
alcohol o por adición del ácido clorhídrico a
un alqueno- aunque a menudo estas
reacciones no transcurren de una manera
muy selectiva.
Ácido Sulfúrico (H2SO4) Concentrado es un
compuesto químico extremadamente
corrosivo. Una gran parte se emplea en la
obtención de fertilizantes. También se usa
una para la síntesis de otros ácidos y sulfatos y
en la industria petroquímica.
β-naftol, es un sólido cristalino incoloro de
fórmula C10H7OH. Es un isómero de 1-
naftol, que difiere según la ubicación del
hidroxilo de naftaleno. Los naftoles son los
una homólogos del naftaleno de fenol, con el
grupo hidroxilo más reactivo que en los
fenoles. Ambos isómeros son solubles en
alcohol, éter y cloroformo. Se pueden
utilizar en la producción de tintas en la
síntesis orgánica. (NIST, s.f)
La ribosa es una pentosa (monosacárido
de cinco átomos de carbono) de alta
relevancia biológica en los seres vivos,
porque en una de sus formas cíclicas, la β-
D-ribofuranosa (a menudo denominada
también como "ribosa", aunque
son
impropiamente), constituye uno de los
principales componentes del ARN y de contiene, por adición deliberada, la
otros nucleótidos no nucleicos como el presencia de ningún analito o sustancia
ATP. La ribosa procede de la por determinar, pero que contiene los
polimerización de la eritrosa. A partir de la mismos disolventes, reactivos y se somete
ribosa se sintetiza la desoxirribosa en la al mismo procedimiento analítico que la
ruta de la pentosa fosfato. Además, se le muestra problema. (Olmos, 2003)
considera uno de los azúcares
oligosacáridos con mayor carácter Metodología
hidrosoluble. (Allinger, 1978) Materiales
La fructosa, es un tipo de glúcido Figura 6: Pinzas de metal
encontrado en los vegetales, las frutas y la
miel. Es un monosacárido con la misma
fórmula molecular que la glucosa,
C6H12O6, pero con diferente estructura,
es decir, es un isómero de ésta. Es una
cetohexosa (6 átomos de carbono y un
grupo cetona). (Calvo, s.f)
El almidón, o fécula, es una
macromolécula que está compuesta por
dos polímeros distintos de glucosa, la
amilosa (en proporción del 25 %) y la Figura 7 Vaso precipitado
amilopectina (75 %). Es el glúcido de
reserva de la mayoría de los vegetales.
La glucosa es un monosacárido con
fórmula molecular C6H12O6.Es una hexosa,
es decir, contiene 6 átomos de carbono, y
es una aldosa, esto es, el grupo carbonilo
está en el extremo de la molécula (es un
grupo aldehído). Es una forma de azúcar
que se encuentra libre en las frutas y en la
Figura 8 Embudo
miel. Su rendimiento energético es de 3,75
Kcal/g en condiciones estándar. Es un
isómero de la galactosa, con diferente
posición relativa de los grupos -OH y =O.
(Kahle, 2001)
Blanco analítico o de reactivos: agua
reactiva o matriz equivalente que no
 Reactivos
Figura 12 Reactivo alfa naftol 5%

Figura 9 Gradilla para tubos de ensayo

Figura 13 Reactivo Barfoed

Figura 10 Pipeteadora

Figura 14 Reactivo de Bial

Figura 11 Estufa Eléctrica

Figura 15 Lugol Figura 19 Ribosa

Figura 20 Lactosa

Figura 16 Reactivo Benedict

Figura 21 Sacarosa

Figura 17 Reactivo Seliwanoff

Métodos

Prueba de Molisch
1. Tome 3 tubos de ensayo y adicione 2
ml de agua destilada, solución patrón 2
Figura 18 Fructuosa
ml de glucosa al 1% y 2 ml de solución
problema.
2. Después de mezclar adicione
cuidadosamente por las paredes a
cada tubo, 0.2 ml de alfa naftol al 5 %y
deje reposar por un minuto.
3. Cuando la prueba esté homogeneizada
se le agrega un 1ml de H2SO4.
La aparición de un anillo violeta en la
interfase de los líquidos es una reacción
positiva.
Prueba de Benedict
1. Tome 3 tubos de ensayo y adicione en
un tubo 2 ml agua destilada, en otro
tubo 2 ml de solución patrón ribosa 1 %
y en otro 2 ml de solución problema.
2. Coloque 2ml del reactivo de benedict a
cada tubo.
3. Caliente los seis tubos de ensayo en
baño maría a ebullición durante 3
minutos.
La formación de un precipitado verde,
amarillo o rojo indica la presencia de
azúcares reductores.
Prueba de Barfoed
1. Tome 4 tubos de ensayo y adicione 2
ml de agua destilada, solución patrón 2
ml de Glucosa al 1%, y ribosa al 1%
separados y 2 ml de solución
problema.
2. Posteriormente coloque 3ml
reactivo de Barfoed en cada tubo.
3. Caliente a baño María hasta ebullición
por 3 minutos.
Esta prueba se utiliza para diferenciar
monosacáridos de disacáridos por el
tiempo de reacción.
La prueba se considera positiva cuando
hay formación de un precipitado rojo de
óxido cuproso. Para los Monosacáridos en
un tiempo de 5-7 minutos y de 7-12
minutos para disacáridos reductores.
Prueba de Seliwanoff
1. Tome 3 tubos de ensayo y adicione 2
ml de agua destilada, solución patrón 2
ml de fructosa al 1% y 2 ml de solución
problema.
2. Colocar 2ml del reactivo de seliwanoff
en cada tubo.
3. Caliente los 3 tubos de ensayo a baño
de María hasta ebullición durante 3
minutos.
La reacción es positiva indicando la
presencia de cetohexosa con una
coloración roja intensa.
Prueba de Bial
1. Tome 3 tubos de ensayo y adicione 2
ml de agua destilada, solución patrón
ribosa al 1% y 2 ml de solución
problema.
2. Colocar 2ml del Reactivo de Bial en
cada tubo.
3. Se colocan los tubos a baño maría
durante 3 minutos.
La reacción positiva es una coloración
violeta, azul, roja o verde que nos indica la
del presencia de pentosas.
Prueba del Lugol
1. Tome 3 tubos de ensayo y adicione 2
ml de agua destilada, solución patrón 2
ml de almidón y 2 ml de solución
problema.
2. Posteriormente coloque 1 gota de
Lugol en cada tubo.
La aparición de una coloración azul indica
la presencia de almidón mientras que el
glucógeno y el almidón parcialmente
hidrolizado presentan una coloración
parda rojiza.
Resultados
Muestra problema: Es un Monosacárido
reductor (Ribosa)
Tabla 1 Resultados Identificación de
Carbohidrato
REACC MOLI BENE BARF BIA SELI LU Positivo
IONES SH DICT OED L WAN GO
QUÍMIC OFF L (MP)
AS Muestra
POSITI + + + + problema
VA (+)

NEGATI _ _ Tabla 3 Prueba de Benedict

VA (-) Agua Prueba Muestra
TUBOS destilada patrón patrón

Tabla 2 Prueba de Molisch (B) (P) (MP)

Agua Prueba Muestra Negativo

TUBOS destilada patrón patrón
(B) (P) (MP)

Negativo (B) Agua

destilada

(B) Agua
destilada

(P)
Positivo
Glucosa
 Positivo (P) Positivo
Ribosa
5min

(P)
Ribosa

(P) Positivo
Glucosa
5mim
Positivo

(MP)
Muestra
problema (MP) Positivo
Muestra
problema
5min

Tabla 4 Prueba de Barfoed

TUBOS Agua Prueba Muestra
destilada patrón patrón
(B) (P) (MP)

(B) Agua Negativo

destilada
Tabla 5 Prueba de Seliwanoff Tabla 6 Prueba de Bial
TUBOS Agua Prueba Muestra TUBOS Agua Prueba Muestra
destilada patrón patrón destilada patrón patrón
(B) (P) (MP) (B) (P) (MP)

(B) Agua Negativo Negativa

destilada

(B) Agua
destilada

(P) Positivo Positivo

Fructosa

(P)
Ribosa

Positiva
(MP) Negativo
Muestra
(MP)
problema
Muestra
problema
Tabla 7 Prueba de Lugol utilizó glucosa y muestra problema dio
positivo a la presencia de un carbohidrato,
TUBOS Agua Prueba Muestr
donde se observa la formación de un anillo
destilad patrón a
violeta en la interfase de los líquidos.
a (P) patrón
Debido a que se produce una reacción
(B) (MP)
donde se hidrolizan los polisacáridos o
Negativ
o monosacáridos con ácido sulfúrico y se
convierten en derivados del furfural o 5-
(B) hidroximetil furfural los cuales reaccionan
Agua con alfa naftol formando un color violeta.
destilad En la tabla 2 en la prueba de Benedict se
a observa el patrón donde se utiliza ribosa y
muestra problema dio positiva a la
presencia de azúcar reductor, donde se

Positivo observa un precipitado rojo ladrillo. Debido

a una reacción del cobre que tiene color
azul y pasa al óxido cuproso que tiene
color rojo- naranja. En la tabla 3 en la
(P) prueba de Barfoed, el patrón que se utilizó
Almidón es glucosa y ribosa, donde a los 5 minutos
se observa un precipitado rojo lo cual
indica que ambos son un monosacárido
reductor y la muestra problema también se

Negativ observa positiva a los 5 minutos lo cual

o indica que es un monosacárido reductor.
Se basa en la reducción de cobre en forma
(MP)
de acetato a cobre en forma de óxido
Muestra
formando un precipitado rojo ladrillo. En la
problem
tabla 4 en la prueba de Seliwanoff, el
a
patrón que es fructosa dio positivo ya que
es una cetosa y la muestra problema dio
negativa lo cual quiere decir que es una
aldosa. la cetosa deshidratada reacciona
Discusión de Resultados
con el resorcinol para producir un color

Como se puede observar en la tabla 1 en rojo. En la tabla 5 en la prueba de Bial, el

la prueba de molisch, el patrón donde se patrón donde se utiliza ribosa y la muestra

problema dan positivo donde se observa
una coloración verde que indica la Bibliografía
presencia de pentosa. En la tabla 6 en la 1. Huertas Navarro Tatiana Alejandra,
prueba de Lugol, el patrón que es el (2016), Unidad didáctica para la
almidón dio positivo donde se observa una identificación cualitativa experimental
coloración parda rojiza y la muestra de carbohidratos; una estrategia de
problema dio negativo. El ion triyoduro aula para la construcción de loncheras
reacciona para generar un complejo con la saludables, Universidad Nacional de
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De manera exitosa en este laboratorio, se azucares/reaccion-de-barfoed
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profesional. eh%C3%ADdos%20son%20compuest
os%20org%C3%A1%20nicos,unidos%
20a%20un%20grupo%20hidroxilo
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