Unidad 6 – Estructura y metabolismo de hidratos de carbono

Metabolismo de Hidratos
de Carbono
6.4.2 Glicólisis 2
Esteban Ferro- Gilda Vierci
BIOQUIMICA
F. Ciencias de la Salud – U. Católica “Ntra. Sra. de la Asunción”
Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 1
6.4.2 Glicólisis 2

- Regulación
- Sustancias que afectan la glicólisis
- Rol sintético
- Metabolismo de manosa, fructosa
y galactosa
Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 2
 Regulación de la Glicólisis
La glicólisis es la vía metabólica (conjunto de reacciones) que
permite elevar la carga energética celular con mayor
velocidad, particularmente en los músculos. Genera ATP 200
veces más rápido que la fosforilación oxidativa.

Esto es posible por:

- El bajo número de reacciones
- La coexistencia de las enzimas en un solo compartimiento
celular (citosol), sin requerir complejos fenómenos de
transporte.
- La ocurrencia de eventos regulatorios muy eficientes con
base a alosterísmo, regulación covalente y de la
expresión, junto con los efectos hormonales.
No se debe olvidar que la glicólisis cumple importantes
funciones biosintéticas,
Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 3
 Regulación de la Glicólisis
La glicólisis no opera a la misma velocidad en todas las
células y órganos.

En los eritrocitos funciona todo el tiempo a velocidad

constante, consumiendo de 15 a 20 g de glucosa/día,
siempre de manera anaeróbica.

En los músculos esqueléticos la producción de ATP debe

aumentar 20 veces para la contracción vigorosa.

En los tejidos sometidos a isquemia (falta de irrigación), la

glicólisis abastece ATP temporalmente, a costa de la
acidificación (acidosis láctica)
En células tumorales, también se privilegia la glicólisis
anaerobia frente al metabolismo aeróbico. Efecto Warburg.
Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 4
Variación de Energía Libre en las Reacciones Glicolíticas

ΔG °’ y ΔG de las reacciones glicolíticas en músculo

cardiaco

Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 5

 Glucosa

Hexoquinasa

Fosfofructoquinasa

Piruvato
quinasa

Diagrama de cambios de energía libre en la glicólisis (músculo cardiaco) Piruvato

Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 6
 Regulación de la glicólisis
• Tres puntos sensibles: HK, PFK-1y PK (Reacciones 1, 3 y 10)

• Reacción 1 (HK):
• Reacción inicial irreversible
• No es exclusiva de la glicólisis

• Reacción 3 (PFK-1)
• Exclusivo de glicólisis
• Regulación alostérica
• Regulación hormonal/génica

• Reacción 10 (PK):
• Regulación alostérica
• Regulación covalente
• Regulación hormonal/génica
Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 7
 Regulación
Fosfofructoquinasa (PFK-1)

Enzima alostérica que cataliza una reacción irreversible

• Regulación alostérica
• Inhibida por: ATP, citrato (Efecto Pasteur)
• Activada por: AMP, Fru-2,6-bP

• Regulación hormonal/génica (hepática)

• Reprimida por glucagón. cAMP/PKA provoca
fosforilación de PFK-2 con ↓ [Fru-2,6-bP]
• Inducida por insulina. Activa a PFK-2 con ↑[Fru-2,6-bP]
Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 8
 Regulación
Fosfofructoquinasa (PFK-1)

• Es el principal punto de regulación

de la glicólisis.
• Enzima tetramérica con dos estados
conformacionales: R y T.
• Cada subunidad con dos sitios de
unión para ATP .
• Sitio de baja Km: ATP cosustrato.
• Sitio de alta Km: ATP inhibidor

• Unión de ATP favorece la transición

R → T, disminuyendo la afinidad
por Fru-6-P.
Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 9
 Regulación
Fosfofructoquinasa (PFK-1)

• Fru- 2,6-bP es el activador alostérico

más potente de PFK y es sintetizado
por la PFK-2.
Fru-6-P + ATP → Fru-2,6-bP + ADP
• Alta [citrato], originada en
mitocondrias, indica gran capacidad de
producir ATP sin recurrir a glucosa.
• Sin ser una molécula rica en energía,
su acumulación informa sobre la
disponibilidad de sustrato oxidable y
alta carga energética
Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 10
 Regulación
Fosfofructoquinasa (PFK-1)
Sin inhibidores [ATP]↓

Actividad
de
PFK

[Fru-6-P] mM
Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 11
 Regulación
Fosfofructoquinasa (PFK-1). Efecto de Fru-2,6-bP

Actividad
de
PFK
(% de
Vmax)

[Fru-6-P] mM
Km con Fru-2,6bP Km sin Fru-2,6bP
Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 12
Estado T: Residuo de Glu
PFK 1
161 genera repulsión con la Cambios alostéricos
carga negativa de la Frc-6P,
desestabilizando la unión.

Estado R: Residuo de Arg 162

forma puente iónico con Frc-
6P, estabilizando el complejo.

Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 13

 Regulación
Piruvato quinasa (PK)
• Regulación alostérica
• Inhibida por: ATP, AcCoA, ácidos grasos, Ala (h)
• Activada por: ADP, Fru-1,6-bP (por pro-alimentación)
• Regulación covalente (hígado)
• Inhibida por fosforilación mediada por cAMP/PKA
• Activada por desfosforilación, por PPPasa.
• Regulación hormonal/génica
• Inducida por insulina
• Reprimida por glucagón
La conversión Glc → Piruvato es característica del estado absortivo,
por aumento de la expresión de GK, PFK y PK
Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 14
 Regulación de la glicólisis en el músculo
• Es el tejido de respuesta más rápida e intensa al estímulo regulatorio
de la glicólisis.
10% de reducción del inhibidor (ATP), se obtiene un aumento del
flujo glicolítico de 100 veces.

• Esta gran variación solo puede ser explicada por la

intervención de varios mecanismos:
• PFK-1 se inhibe por ATP (T) y se activa por AMP (R).
• Adenilato quinasa (mioquinasa)
• 2 ADP→ ATP + AMP; Keq = [ATP] [AMP]/ [ADP]2 = 0,44.
• [ATP] = 10 [ADP] = 50 [AMP]
Ejemplo con:
• [ATP] + [ADP] + [AMP] = constante [ATP]i = 1mM
[ADP]i = 0,1 mM
• Ciclos de sustrato [AMP]i = 0,02 mM
Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 15
Regulación de la glicólisis en el músculo
Ciclos de Sustrato

ATP ADP

f
→ A B-Pi →
r

Pi Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci H2O 16

 Regulación de la glicólisis en el músculo
Ciclos de Sustrato

Músculo en reposo: Ambas enzimas Músculo en actividad: PFK-1 activada y

(PFK-1 y FBPasa igualmente activas --- FBP inhibida por F2,6-biP --- Flujo
Flujo glicolítico bajo. glicolítico alto. Si una señal alostérica
F6P → FBP f = 100 afecta ambas reacciones en 20%.
FBP → F6P r = 90 F6P → FBP f= 120 (+ 20%)
Flujo neto= 100 – 90 = 10 FBP → F6P r= 72 (- 20%)
F6P → FBP Flujo neto= 120 – 72 = 48 ( + 480%)
Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 17
Regulación hormonal
de la glicólisis en el
hígado

Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 18

 Consideraciones sobre la Glicólisis como Vía
Generadora de ATP
• Generación de ATP por fosforilación a nivel sustrato
• Rinde → 2 ATP/Glc
• Forma más rápida de obtener ATP por oxidación y sustentable
en el tiempo.
• No requiere O2, ni fenómenos de transporte.

• Vía indispensable para:

• Eritrocitos.
Única vía metabólica generadora de ATP.

• Músculo en contracción rápida

Permite actividad física muy intensa (alta potencia) al generar ATP a
muy alta velocidad, aún en ausencia de O2. La duración está limitada
por la acidificación resultante de la regeneración anaeróbica de NAD+
Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 19
 Consideraciones sobre la Glicólisis como Vía
Metabólica Hepática

• En los hepatocitos la glicólisis no tiene como fin relevante

la fosforilación de ADP (Obtener energía).
• En el hígado la glucosa se emplea principalmente para
generar reserva de glucosa (glucógeno) para otros
órganos y células
• La glicólisis hepática es muy activa en el periodo
absortivo para generar piruvato, que oxidado en las
mitocondrias produce AcCoA, precursor de ácidos grasos
y TAG.

• Además, el hígado emplea activamente glucosa para

producir NADPH, sintetizar pentosas-P, y derivados de
glucosa, como glucurónidos para detoxificación.
Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 20
 Sustancias que afectan la glicólisis
Sustancias que detienen el flujo glicolítico y afectan su rendimiento .

• 2-desoxiglucosa: Se fosforila y se convierte en 2-dGlc-6P, que no

puede ser transformada por la fosfoglucosa isomerasa (PGI) y
detiene la vía. 2d-Glc + ATP → 2d—Glc6P + ADP

• Metales pesados (Hg, Pb), etilmaleimida, yodoacetamida: inhiben

a la gliceraldehído-3-P deshidrogenasa

• Fluoruro: Inhibe a la enolasa.

• Arsenato (AsO4-3): Reemplaza al Pi en la reacción catalizada por la

G3PDH formando 1-As-3 P glicerato. Este es inestable y se hidroliza
sin generar ATP.
• Arsenato NO interrumpe la glicólisis, pero disminuye su
rendimiento al no producirse 1,3-bPG.
Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 21
 Rol biosintético de la glicólisis

Además de ser una vía de producción de energía, la glicólisis

provee intermediarios que alimentan varias vías biosintéticas.

• Glc-6-P→ Glc-1-P→ Glucógeno

• Glc-6-P → Rib-5-P → Nucleótidos → Desoxinucleótidos
• Fru-6-P → Aminoázúcares
• Fru-6-P → Fru-2,6-bP
• DHAP → Glicerol-3-P → TAG
• 1,3-bPG → 2,3-bPG
• 3-P-glicerato → Ser
• Piruvato → Ala/Lactato
• Piruvato → Oxalacetato (Glc) →Asp/Asn (pirimidinas)
• PEP+ Eri-4-P → Phe, Tyr, Trp (bacterias/plantas)
Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 22
 Glucosa Glucosa- 6P Glucosa- 1P Glucógeno

Ribosa-5P ATP, GTP,

Fructosa 2,6-biP Fructosa-6P TTP, CTP,
UTP
Fructosamina, aminoazúcares
Fructosa-1,6 biP NAD, FAD
ADN y ARN
GAG, glicoproteínas,
glicolípidos G3P DHAP
Glicerol- 3P TAG
2,3 BPG 1,3 BPG
Colina
3 PG Serina Fosfo y
Proteínas esfingolípidos
Etanola
2 PG mina

Asp, Asn OAA PEP Phe, Tyr, Trp (plantas y MO)

Ala Acidos grasos

Piruvato Acetil CoA
Lactato
Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci
Cuerpos cetónicos
23
 Síntesis del 2,3-BPG
Vía de Rapoport - Luebering

Inhibidor alostérico de la oxigenación de Hb.

Reduce la afinidad de Hb por O2.
Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 24
 Efecto de deficiencia de enzimas glicolíticas sobre la afinidad
de Hb por O2

Deficiencia
de
hexoquinasa
Saturación P50
disminuida
de Hb
por el
oxígeno Eritrocitos normales
(%)
Deficiencia de piruvato quinasa
P50 aumentada

Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 25

Glicólisis
Mapa
conceptual
de su
regulación

Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 26

Oxidación de otros
monosacáridos
Manosa
Fructosa
Galactosa

Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 27

 Oxidación de
Man, Fru y Gal
Estos monosacáridos no
cuentan con vías propias
para su oxidación.

Experimentan
transformaciones para
incorporarse a la glicólisis
en diferentes reacciones
de la vía, y por tanto sus
átomos de C terminan
produciendo piruvato,
como lo hace glucosa.
Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 28
 Oxidación de Manosa

α-D-glucosa α-D-manosa

Epímeros en C-2
Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 29
 Oxidación de Manosa

Glicoproteínas.

Manosa Glucosa

Hexoquinasa

Manosa-6P Fructosa-6P
Fosfomanosa GLICOLISIS
isomerasa

Piruvato
Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 30
 Oxidación de Manosa

Glicólisis

1. Fosforilación por hexoquinasa Man → Man-6-P

2. Isomerización de OH en C-2 por fosfomanosa isomerasa Man-6-P → Fru-6-P
3. Incorporación de Fru-6-P a la vía glicolítica

Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 31

 Oxidación de Fructosa
• Tejidos extrahepáticos que expresan hexoquinasa, la fosforilan en C6
Fructosa + ATP → Fructosa-6-P + ADP.

• Hígado, donde se expresa glucoquinasa no se fosforila en C6 por la

alta Km de la enzima.
• Se fosforila en C-1 por la enzima fructoquinasa
Fructosa + ATP → Fructosa-1-P + ADP.

• Fructosa-1-P es sustrato de la aldolasa I B, que produce DHAP (C1-

C3) y gliceraldehido. (C4-C6)
• Deficiencia congénita de:
• Fructoquinasa → Fructosuria esencial (benigna)
• Aldolasa I B → Intolerancia hereditaria a fructosa.

• Fructosa no es un azúcar esencial, lo sintetizamos a partir de

glucosa.
Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 32
 Oxidación de Fructosa

Glucosa
Hexoquinasa
otros tejidos
Fructosa Fructosa-6P
Fructoquinasa
(hígado)
Fructosa-1P Frc- 1,6 biP
Aldolasa I B GLICOLISIS
(hígado)

Gliceraldehido DHAP Gliceraldehido-3P

Glicerol Glicerol-3P Piruvato

Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 33
 Oxidación de Fructosa
Músculos
Hígado

Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 34

 Oxidación de Fructosa

• El transporte celular no depende de insulina (GLUT5).

• En el hígado, el ingreso de fructosa a la vía glicolítica

escapa a la regulación de PFK-1.

• Consumo excesivo de fructosa (sacarosa, jarabe de maíz

de alta fructosa, azúcar invertido), genera, sin control
glicolítico, grandes cantidades de piruvato y éste se
oxida dando acetil-CoA, que contribuyen a la formación
de ácidos grasos, y se relaciona con niveles sanguíneos
elevados de triacilgliceroles.

Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 35

 Síntesis de Fructosa

• Ocurre principalmente en tejido epididimario.

NADH + H+ NAD+ NAD+ NADH + H+

Glucosa Sorbitol Fructosa

Aldosa Sorbitol
reductasa deshidrogenasa

El exceso de glucosa, mediante la aldosa reductasa, genera sorbitol

en exceso, con gran efecto osmótico y responsable del daño
celular en la DM. (cataratas, daño glomerular renal, trastornos
neurológicos y vasculares).
Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 36
 Oxidación de Galactosa

α-D-glucosa α-D-galactosa

Epímeros en C-4
Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 37
 Oxidación de Galactosa
• Fuente principal: lactosa de la leche.

• Fosforilación en C-1 por la galactoquinasa, para dar

Gal-1-P.

• Reacción de Gal-1-P con UDP-Glc para dar Glc-1P,

mediante la galactosa-1P uridil transferasa.

• Isomerización de Glc-1-P → Glc-6-P por la

fosfoglucomutasa.

Obs: deficiencia congénita de Gal-1P uridil transferasa es la causa principal

de una enfermedad muy grave=Dr.galactosemia . Vierci
Esteban Ferro & Dra. Gilda 38
Oxidación de Galactosa

Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 39

 Oxidación de Galactosa

ENZIMAS
1. Galactoquinasa
2. Gal-1P uridil transferasa
3. UDP-Gal-4 epimerasa
4. Fosfoglucomutasa

Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 40

 Oxidación de Galactosa

La acción de aldosa
reductasa sobre Gal general
el poliol galactitol.

Esto es observable en la
galactosemia.

Ejerce efectos similares a

sorbitol.

Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 41

Incorporación
de manosa,
fructosa y
galactosa a la
glicólisis

Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 42

 Mapa conceptual

Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 43

 Final de la presentación 6.4.2
Glicólisis 2
Regulación
Sustancias que afectan la glicólisis
Rol biosintético
Oxidación de manosa, fructosa y galactosa

Dr. Esteban Ferro & Dra. Gilda Vierci 44