Tema 9. CLULAS DE LA SANGRE .Eritrocitos. Leucocitos. Plaquetas. Mdula sea y hematopoyesis 9.1.

- Generalidades La sangre es un TEJIDO CONJUNTIVO circulante en una matriz extacelular denominada PLASMA. 1. La sangre supone entre un 7-8 % del peso corporal. 2. La sangre est formada por CLULAS y PLASMA. 3. Los componentes de la sangre pasan a travs de los vasos sanguneos: a. el fluido plasmtico pasa al intersticio y desde all al sistema linftico b. la clulas (slo las de la serie blanca) salen por diapdesis (extravasacion) entre las clulas endoteliales al intersticio. 4. Plasma a. contiene los factores coagulantes y el fibringeno; b. Plasma =. El sobrenadante restante despus centrifugar la sangre a la que previamente se le ha aadido un anticoagulante. 5. Suero a. no contiene fibringeno b. Suero = el fluido recogido despus de que la sangre haya coagulado. 6. TINCION: La tincin de Romanowsky se utiliza para la mayora de los estudios sanguneos. Este procedimiento consiste en fijar las clulas en un portaobjetos con alcohol y luego teirlas con colorante metacromtico (azulprpura). a. Para los reticulocitos (una clulas sangunea inmadura) se utilizan tinciones vitales la clulas no estn muertas antes de la tincin.

9.2.- CELULAS DE LA SANGRE. Eritrocitos, Leucocitos y Trombocitos 9.2.1.- ERITROCITOS o HEMATE (GR) 9.2.1.1. Caractersticas generales a. En forma de disco bicncavo es la clula que provee una mejor difusin y flexibilidad al apretujarse a travs de los capilares. b. En la mayora de las especies carecen de organelas (excepto en las aves y en las especies vertebradas de los ms bajo de cadena en las que son nucleadas).

Tema 9.- Sangre. Eritrocitos. Leucocitos. Plaquetas. Mdula sea

9.2.1.2.Variaciones estructurales: RETICULOCITO son eritrocitos inmaduros que entran en la circulacin. a. se tien con tinciones vitales. b. ligeramente ms grande en tamao (macroctica) Eritrocitos policromatfilos a. similares a los reticulocitos si son macrocticos b. teido de azul oscuro con tincin metacromtica debido a la abundancia de ribosomas y polirribosomas en su citoplasma. Cuerpos Howell-Jolly (H-J) a. clulas rojas sanguneas que contienen restos de material nuclear, el cual es eliminado en el bazo sin destruir las clulas rojas sanguneas. (1% en sangre de gato y caballos) Eritrocitos refractiles (ER) cuerpos de HEINZ a. son reas plidas en la periferia de la clula resultante de la oxidacin de la hemoglobina en pulmones (incrementadas por toxina) b. Los felinos son la especie ms susceptible (anemia hemoltica de cuerpos de Heinz) 9.2.1.3 Formas Anormales 9.2.1.3.1 Anisocitosis (no del mismo tamao)) a. macrocitos y microcitos Rangos normales de los eritrocitos: 4-5 m (cabra, oveja) 5-6 m (caballo, ox, gato, cerdo) 7 m (perro) 9.2.1.3.2 Poiquilocitosis (variacin en la forma) 9.2.1.3.3. Crenacion significa la apariencia de enncogido del eritrocito. (bola con espculas), 1. normal in la sangre de cerdo debido a la tincin de Romanowski. 9.2.1.3.4 Formacion de cartuchera es el apilamiento como monedas 1. Normal en el caballo, tambin se observa en los felinos. 2. 2. Su incidencia esta incrementada en el perro y en el gato sugiriendo un incremento en las concentraciones de fibringeno y globulinas de la protena plasmtica total lo cual origina adhesividad.
Tema 9.- Sangre. Eritrocitos. Leucocitos. Plaquetas. Mdula sea

8.2.11. Duracin de los eritrocitos: 1. viven alrededor de 120 dias 2. luego son eliminados en la el bazo, mdula sea e higado por los macrfagos 3. el hierro es recuperado y algunas veces aparece hemosiderina

9.2.2. LEUCOCITOS O GLBULOS BLANCOS (GB) Monomorfonucleares: Linfocitos, Monocitos, Polimorfonucleares: Neutrofilos, Eosinfilos, Basfilos 9.2.2.1.(MONOMORFONUCLEARES) Agranulocitos 9.2.2.1.1. LINFOCITOS 1. en algunas ocasiones son los leucocitos ms numerosos de algunas especies (p.e. bovino) 2. se diferencian dos tipos: pequeos y grandes 3. ncleo denso y casi redondo (algunas veces los gatos poseen un ncleo dentado) 4. posee un ncleo ms eucromtico que los neutrfilos 5. la ratio ncleo/citoplasma es alta, lo cual indica que el ncleo casi ocupa todo el citoiplasma 6. los linfocitos son las clulas que proporcionan la inmunidad celular y humoral 7. Tipos B y T 8. los linfocitos B se vuelven (inmunocito en la sangre), precursor de las CLULAS PLASMTICAS (en los tejidos), solamente se observan en el torrente sanguneo cuando existe una estimulacin antignica crnica. (p.e. infestaciones parasitarias)

9.2.2.1.1. MONOCITOS 1. ncleo grande de forma irregular (oval to herradura); 2. grandes cantidades de citoplasma azul-grisceo 3. ncleo eucromtico 4. clula ms grande de la sangre (hasta 25 m) 5. Principal fagocito (junto con los neutrfilos )
Tema 9.- Sangre. Eritrocitos. Leucocitos. Plaquetas. Mdula sea

9.2.2.2.(POLIMORFONUCLEARES, Granulocitos) 9.2.2.2.1. NEUTRFILO 1. tambin llamado granulocito neutrfilo, leucocito polimorfonuclear PMN, heterfilo 2. ncleo segmentado (3-5 lbulos) ms condensado (heterocromtico) 3. grnulo primarios pequeos son lisosomas (azurfilos o azules) 4. grnulos pequeos Especficos con enzimas bactericidas (rosa a violeta) 5. las clulas Maduras se denominan Neutrfilo Segmentado 6. clulas Inmaduras Neutrfilo en Banda (ncleo en forma de C); ncleo menos condensado 9.2.2.2.2. EOSINFILOS 1. nico, grnulos grandes acidfilos (muy grandes en el caballo) 2. ncleo de 2-3 lbulos (ms grandes que los del ncleo de los PMN) 3. heterocromtico 3. no debe ser confundido con los Mastocitos (ncleo oval y grande) teido con H/E; sin embargo, cuando los Mastocitos se tien con Azul de Touidina cuando los Mastocitos se tien con Azul de Touidina, los grnulos son azul oscuro. 9.2.2.2.3. BASFILOS 1. normalmente la menos numerosae incluso rara (excepto conejo, aves y conejo de Indias) 2. ncleo menos heterocromtico que el Neutrfilo, pero segmentado 3. grnulos especficos violeta rojizos a violeta oscuro (heparina, histamina,) 4. funciones no muy bien comprendidas 5. Hyperlipidemia origina un incremento de los Basfilos

9.2.3. PLAQUETAS (TROMBOCITOS) 1. fragmentos de membrana citoplamtica sea del Megacariocito de la mdula

2. centros azul plido y poseen granulos violetas pequeos 3. agrupadas o en forma de racimos
Tema 9.- Sangre. Eritrocitos. Leucocitos. Plaquetas. Mdula sea

4. Mamferos (funciones in proceso de la coagulacin) 5. Aves (funciones fagocitarias); trombocitos son clulas nucleadas con citoplasma azul oscuro

9.3. VARIACIONES ESPECFICAS 9.3.1. CANINA 1. el eritrocito es el ms grande de las especies comunes: 7 micrometro de diametro, centro plido distintivo 9.3.2. FELINA 1. Cuerpos HJ 2. Cuerpos Eritrocitos refractile ( cuerpos de Heinz) son fcilmente visibles con la tincin vital Azul de Metileno Nuevo (AMN) 3. grnulos eosinofilos a menudo en forma de rueda 4. los eritrocitos pueden mostrar formaciones en cartuchera 5. Reticulocitos a. Agregado (macrocitico y policromtica) b. Punteado (visualizacin del RER con tinciones ) 6. "Cuerpos de Dohle" cuerpos de tincin azul irregular delcitoplasma de los neutrfilo (indica toxicidad en otras especies) 9.3.3. EQUINO 1. formacin rpida en cartuchera (muy pocos pequeos eritrocitos) 2. No reticulocitos (muy importante, debido a situaciones de anemia) 3. granulos Eosinfilos son muy grandes 9.3.4. BOVINO 1. No hay formaciones en cartuchera o apilamiento 2. Anisocitosis es normal 3. los linfocitos son ms comunes que neutrfilos 9.3.4. OVINO (OVEJA) Y CAPRINOS (CABRA) 1. eritrocitos ms pequeos 2. linfocito puede ser el ms comn de los leucocitos 9.3.5. PORCINO 1. la crenacin de los eritrocitos es comn
Tema 9.- Sangre. Eritrocitos. Leucocitos. Plaquetas. Mdula sea

2. loslinfocitos pueden ser ms comunes quelos neutrfilos 9.3.6. AVES y PECES 1. eritrocitos ovales grandes y nucleados 2. Heterfilo = Neutrfilo 3. Trombocitos son nucleados pero ms pequeos que los eritrocitos y tienen un citoplasma pequeo 9.3.7. CONEJO 1. Heterfilo = Neutrfilo = Pseudoeosinfilo = Amffilo a. grnulos eosinoflicos intracitoplasmticos numerosos 2. Basfilos son comunes (2-7%)

COMPARACIN DE LAS GLBULOS BLANCOS DE LA SANGRE Tama Ratio o( Nuclear/ Citoplasm m) a Mononucleares Linfocitos Modelo Heterocromtico (Het) CITOPLASMA

6-12

Alta

Monocitos

>15

Baja

menos Het, Color azul plido aleatorio, arracimado Het gris con menos Het, Color trenzado linear de vacuolas comunes Het, 3-D effect Mayoritariamente Het, mezclado Mayoritariamente Het, mezclado Mayoritariamente Het, mezclado Grnulos grisceos pequeos indistintos Grnulos rojo/naranja grandes Grnulos azul/violeta de diferentes tamaos

Polimorfonucleares Neutrfilo

12

Media

Eosinfilo

12

Media

Basfilo

12

Media

Tema 9.- Sangre. Eritrocitos. Leucocitos. Plaquetas. Mdula sea

MDULA SEA

La mdula sea es un tejido conjuntivo responsable de la produccin de las clulas sanguneas. Est localizada en la cavidad medular de los huesos. Con la edad, la mdula sea se limita a las epfisis proximales de los huesos largos, vrtebras, esternn y crneo. En ratones y ratas todos los espacios medulares son hemtopoyticos a lo largo de toda la vida. 9.4.1.FORMACION DE LAS CLULAS SANGUNEAS A. Localizaciones hemocitopoyticas: 1.- 2 semanas saco vitelino 2.- 6 semanas - hgado 3.- 8 semana se empieza a formar la mdula sea 4.- del 3er. al 5 mes se empieza formar en menor cantidad en el bazo, timo y otros tejidos linfoides 5. 5 mes a la edad adulta la mdula sea primariamente delos huesos largos y planos B. Hemocitopoyesis extramedular: 1. Bazo, hgado ganglio linftico( bajo extrema demanda) 2. Con la edad, los huesos largos se vuelven menos activos y se llenan de grasa dando lugar a la llamadada mdula amarilla, pero pueden reactivarse por necesidad en cualquier momento.

9.5 TEORA DE LA FORMACIN DE LAS CLULAS SANGUNEAS: 9.5.1. MONOFILETICA A. Una nica CLULA MADRE que es pluripotencial (puede diferenciarse en muchos tipos celuares) dando lugar a las CLULAS MADRES UNIPOTENCIALES (clulas que originaran una linea. B. Las clulas Pluripotenciales dan lugar a las unipotenciales que darn lugar a todas las lineas.

Tema 9.- Sangre. Eritrocitos. Leucocitos. Plaquetas. Mdula sea

9.5.2. PRINCIPALES CLULAS SANGUNEAS GLOBULOS ROJOS (GR) GLBULOS BLANCOS (GB) mononucleares (agranulocitos) polimorfonuclear (granulocitos) PLAQUETAS (trombocitos) Megacariocitos Las clulas de la mdula sea pueden entrar en el torrrente sanguneo bajo ciertas condiciones: * Stress (debido a la secrecin de glucocorticoides) *Anoxia, * Toxemia, Tumores de Mdula sea Cuando existe un aumento de la severidad de las condiciones, se produce una mayor llegada de clulas madre al torrente sanguneo. 9.5.3. CLULAS MADRE El nombre de CFUs deriva de los datos obtenidos experimentalmente de la inyeccin de ratones irradiados, y representa la formacin de las clulas sanguneas de las clulas madre. 9.5.3.1. CFU-S = clulas formadoras de colonias y clulas madres * no son identificables en rutina microscpica 9.5.3.2. Clulas madre identificadas en cultivos experimentales 9.5.3.2.1. BFU-E (clulas de Bolsa) --> CFU-E --> Rubriblasto (R) --> Prorubricito -> Rubricito Rubricyte 9.5.3.2.2. CFU-GM Granulocito/Monocito (GB) a. Granulocito = polimorphonuclear/Monocito = mononuclear) 9.5.3.2.3 CFU-BL/CFU-TL --> Linfoblasto -->2 tipos de linfocitos (GB-mononucleares) a. clulas B = maduracin tiene lugar en la mdula sea b. clulas T = maduracin tiene lugar en el timo 9.5.3.2.4. CFU-Eo --> Eosinofilo (GB-polimorfonucleares) 9.5.3.2.5. CFU-M --> Megacarioblasto
Tema 9.- Sangre. Eritrocitos. Leucocitos. Plaquetas. Mdula sea

9.6. DISPOSICIN DE LA VASCULARIZACIN DE LA MDULA SEA A. Arteria Nutriente (entra en los huesos largo y penetra en la cortical del hueso y mdula sea) B. Arteria longitudinal central irriga el hueso hacia arriba y hacia abajo C. Areterias Radiales se extienden desde las arterias centrale D. Arteriolas entran en las osteonas y salen y entran a la mdula sea y luego llenan lossinusoides. E. Los sinusoides se abre en unas venas centrales longitudinales.

9.7. SIGNIFICADO FUNCIONAL DE LOS TRES ELEMENTOS SINUSOIDALES A. Clula endotelial (especializado , no fenestrado ) is es continuo pero delgado: tiene aperturas temporales B. membrana basal es discontinuo y permite el paso fcil de clulas sangunes. C. clula adventicia es una clula reticular (fibroblasto) that covers the surface of the endothelium and forms a meshwork of reticulin as a filter. Que cubre el TIPOS CELULARES DE LA MDULA SEA 9.8. OTROS A. OSTEOCLASTOS (multinucleados), OSTEOBLASTOS (ncleo excntrico y aparato de Golgi central) B. CLULAS PLASMTICAS Y MASTOCITOS

9.9. RATIO CLULAS MIELOIDES/ ERITROIDES

Especies Perro Gato Caballo Vaca Oveja Cabra Cerdo

Rango 0.75-2.53 1.21-2.16 0.50-1.50 0.31-1.85 0.77-1.68 -0.773-2.81

Media 1.25 1.63 0.93 0.71 1.09 0.69 1.77

Tema 9.- Sangre. Eritrocitos. Leucocitos. Plaquetas. Mdula sea

9.10. NMERO TOTAL DE ERITROCITOS POR ML DE SANGRE: Perro: 6-9 x 10-6 Vaca: 5-8 x 10-6 Caballo: 7-13 x 10-6 Cerdo: 5-8 x 10-6 Cabra8-15 x 10-6 9.11. VALORES LEUCOCITARIOS DIFERENCIALES EN LAS DIFERENTES ESPECIES DOMSTICAS % of Total
Tipo celular Caballo Vaca Perro Gato Oveja Cerdo

Neutrfilos Linfocitos Monocitos Eosinfilos Basfilos Clulas en Banda

30-65 25-70 0-7 0-11 0-3 0-2

15-45 45-75 2-7 2-20 0-2 0-1

60-77 12-30 3-10 2-10 raro 0-4

35-75 20-55 1-4 2-12 raro 0-2

10-50 40-75 0-6 0-10 0-3 0-2

28-47 39-62 2-10 0-11 0-2 0-5

9.12. RESUMEN DE LA ESTRUCTURA/FUNCIN 9.12.1. CLULAS EN SANGRE PERIFRICA Terminologa clnica Erithrocito (GB) Reticulocito Formacin de cartuchera Leucocito (GB) Tipo 1 = (Agranulocito mononucleares) Linfocito Pequeo Grande Monocito Tipo 2 = (Granulocito Polimorfonucleares) Neutrfilos Eosinfilo Basfilos Plaquetas Otra terminologa - mismo como clnica Eritrocito policromatfilo Agregacin eritroctica o - mismo como clnica

- mismo como clnica o Granulocito neutroflico Granulocito acidfilo Granulocito basfilo Trombocito

Tema 9.- Sangre. Eritrocitos. Leucocitos. Plaquetas. Mdula sea

10

9.12.2. MDULA SEA Terminologa clnica Hemocitopoyesis Otra terminologa Hematopoiesis, hemopoiesis

Series de los Gbulos Rojos Rubriblasto (eucromtico con ncleo grande) Prorubricito (citoplasma basfilo, RER) Rubricito (RER productor de hemoglobina) *basocrmico *polycrmic *normocrmico Metarubricito (post mittico / picntico) Reticulocito (gran cantidad de Ribosomas) Erythrocito (eosinofilico debido a la hemoglobina) Proeritroblasto Eritroblasto basofilco Eritroblasto policromatoflico Eritroblasto -mismo como clnica Eritroblasto acidofilico Eritrocito Policromatfilo -mismo como clnica

Polimorfonucleares- Clulas de la Serie Blanca Mieloblasto (ncleo grande eucromtico) Promielocito (grnulos azurfilos que son lisosomas) Mielocito (grnulos Especficos) *neutroflicos (N) (grnulos pequeos rosa/violeta) *eosinoflicos (E) (grnulos grandes rojo/rosa) *basofilico (B) (grnulos grandes azul/violeta) Metamielocito (clula Juvenil) *N/E/B (post mitoticas; nucleus dentados & polarizado) Clulas en Banda *N/E/B Leucocito segmentado *N/E/B Megacariocito (fusin del ncleo a lolargo de una estrauctura multilobulada) -mismo como clnica Progranulocito - mismo como clnica

- mismo como clnica

- mismo como clnica - mismo como clnica Megacariocito

Tema 9.- Sangre. Eritrocitos. Leucocitos. Plaquetas. Mdula sea

11