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INGENIERÍA QUÍMICA: ISSN 2664-9969

SISTEMAS QUIMICOS Y TECNOLOGICOS

UDC 66.011
DOI: 10.15587 / 2706-5448.2021.235471 Tipo de
artículo «Informes sobre proyectos de investigación»

Anna Krvavych, OPTIMIZACIÓN DE PARÁMETROS DEL

Roksolana Konechna PROCESO DE EXTRACCIÓN DE SUSTANCIAS
BIOLÓGICAMENTE ACTIVAS DE HIERBA
ADONIS VERNALIS
El objeto de esta investigación es la hierba Adonis vernalis y los extractos hidroalcohólicos obtenidos en su base. Por la
naturaleza de la acción, los fármacos Adonis vernalis pertenecen al grupo de los glucósidos cardíacos y ocupan un lugar
intermedio entre la estrofantina y la digital. En la medicina oficial, los compuestos biológicamente activos de Adonis vernalis se
incluyen en medicamentos como Cardiovalen, Adonis-bromine, Caridiolin y Cardiophyte. En la formulación extemporal, el
extracto es parte de la medicina de Bechterew. Hasta hace poco, los científicos han logrado avances significativos en el estudio
de la acción fitoquímica y farmacológica de la hierba Adonis vernalis. Sin embargo, uno no debe limitarse al uso de Adonis
vernalis solo para estimular la actividad cardíaca, También se debe considerar el prometedor efecto antioxidante de los
flavonoides y compuestos fenólicos que contiene esta planta medicinal. Además, los estudios de las condiciones de extracción
de la hierba Adonis vernalis no se describen en la literatura científica.
El estudio realizó la extracción de la gramínea Adonis vernalis por varios métodos (estáticos y
dinámicos). Se eligió el tipo de extracto como el más racional, que proporciona el máximo rendimiento de
extractos (compuestos fenólicos y glucósidos cardíacos). Para ello, se seleccionaron las condiciones óptimas
de extracción, a saber, el tamaño de partícula, el tipo de extractante, el valor del hidromódulo y el método
de extracción. En consecuencia, el diámetro de partícula óptimo para la extracción máxima de sustancias
biológicamente activas de la hierba Adonis vernalis es de 2,5 mm, el extractante óptimo es alcohol etílico al
70%, la proporción de materias primas: extractante es 1:10, el método de extracción óptimo es la
maceración con agitación constante.
Como resultado de la optimización del proceso y su introducción en producción a escala industrial, se logrará el
efecto de valor agregado. Y también se ha creado un producto de alta calidad que competirá con medicamentos de
amplio espectro ya existentes en el mercado.
Palabras clave: flavonoides, glucósidos cardíacos, compuestos fenólicos, Adonis vernalis, proceso de extracción, condiciones
óptimas, método de extracción.

Fecha de recepción: 08.02.2021 © The Author (s) 2021 Este

Fecha de aceptación: 17.03.2021 es un artículo de acceso abierto
Fecha de publicación: 30.06.2021 bajo la licencia Creative Commons CC BY

Cómo citar
Krvavych, A., Konechna, R. (2021). Optimización de parámetros del proceso de extracción de sustancias biológicamente activas de pasto Adonis vernalis.
Auditoría de tecnología y reservas de producción, 3 (3 (59)), 14-18. doi: http://doi.org/10.15587/2706-5448.2021.235471

1. Introducción - Compuestos fenólicos;

El consumo de medicamentos a base de plantas medicinales
está creciendo rápidamente en todo el mundo. Según la
Organización Mundial de la Salud (OMS), alrededor del 80% de la
población mundial usa plantas medicinales para tratar diversas
enfermedades. Según los expertos de la OMS, en los próximos 10
años, la proporción de fitopreparados en el consumo total de
productos farmacéuticos ascenderá al 60% [1, 2]. Materias primas
de plantas medicinales (MPRM)Adonis vernalis contiene:
- glucósidos cardíacos (cimarina, adonitoxina, 16-hidroxis-
trofantidina, acetato-palonitoxina, vernadigina, 3-
acetilstrofadogenina, fucósido de estrofantidina, 3-
epiperiplogenina, digitoxigenina);
- glucósidos (adonilida, fucuyusonorone, fucuyuson, line-
olona, 12-B-benzoilisolinolona, nicotinoilisoramanon,
isoramanon);
- flavonoides (adonivertin, homoadonivertin, orientin,
homoorientina, isoorientina, luteolina, vitexina);
- quinonas;
- saponinas;
- cumarinas, etc.
Compuestos biológicamente activos (BAS) Adonis verna-
lis tienen un efecto beneficioso sobre el sistema cardiovascular,
tienen actividad antiangiogénica, antibacteriana, antiblastoma,
sedante, antioxidante, antiinflamatoria, antiviral, diurética,
analgésica y acaricida [3-5].
La extracción de materias primas medicinales se usa ampliamente
en la preparación de diversas preparaciones de compuestos naturales.
La integridad de la extracción de compuestos naturales de materias
primas medicinales afecta significativamente la elección del
extractante, que está determinada por las propiedades de las
sustancias extraídas, así como por el tipo

14 RESERVAS DE PRODUCCIÓN Y AUDITORÍA DE TECNOLOGÍA - № 3/3 (59), 2021

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de la preparación obtenida (extracto líquido o extracto seco, o
una sustancia individual). El proceso de extracción de
materiales vegetales secos comienza con la penetración del
extractante en el material, humedeciendo las sustancias
dentro de la célula, y luego su disolución y desorción, difusión
a través de los poros de la membrana celular, termina con la
transferencia de masa de sustancias desde el superficie del
material en la solución.
A pesar de una amplia variedad de trabajos científicos dedicados a
las formas de aumentar la eficiencia de la extracción, así como la
introducción de nuevas tecnologías en la práctica destinadas a
optimizar los procesos de extracción de sustancias biológicamente
activas de las materias primas de las plantas medicinales, la cuestión
de seguir investigando en este el área permanece abierta.
Entonces, los objetos de investigación eran la hierba Adonis
vernalis y los extractos hidroalcohólicos obtenidos en su base.
El objetivo de la investigación es determinar las condiciones
óptimas para la extracción, obtener extractos secos de la hierba
Adonis vernalis y su análisis fitoquímico del contenido de
sustancias biológicamente activas.
2. Métodos de investigación
El experimento se realizó con pasto previamente preparado.
Adonis vernalis. La materia prima se purificó de impurezas e
impurezas mecánicas, la determinación del contenido de
impurezas se llevó a cabo de acuerdo con los requisitos de la
Farmacopea Estatal de Ucrania (SPU) [6, artículo 2.8.2]. Utilizando
tamices de varios diámetros de orificios (0,5, 1,0, 1,6, 2,5 y 4 mm),
la materia prima se dividió en fracciones. Para la extracción, se
vertieron 10 g de materias primas trituradas en un matraz de
fondo redondo de 250 ml y se vertieron 100 ml de alcohol etílico
(EtOH) de la concentración apropiada. El proceso se llevó a cabo
con agitación constante utilizando un agitador magnético a cinco
temperaturas diferentes (20, 25, 30, 40 y 50ºC).°C) durante 6 horas
para cada tamaño de partícula promedio específico (0.5, 1.0, 1.6,
2, 5 y
4,0 mm). Después de cada proceso de extracción, el disolvente se
eliminó en el punto de ebullición del extractante correspondiente.
El experimento, realizado en cualquier conjunto de condiciones, se
llevó a cabo tres veces y se registró el valor medio. El rendimiento
de sustancias extractivasD (%) del material vegetal extraído se
calculó mediante la fórmula:
ω ⋅V
D= , (1)
metroC
dónde V - volumen total del extracto obtenido, ml; ω - residuo
seco en el extracto obtenido,%;metroC - masa de material vegetal
utilizado para la extracción, g.
2.1. Método para estudiar el contenido de flavonoides en
el extracto. El contenido total de flavonoides en el extracto se
estimó por el método colorimétrico con cloruro de aluminio
AlCl3 [7]. Según este método, se utilizó quercetina como
estándar, que se expresó como equivalente de quercetina
(QE). Se construyó una curva estándar de concentraciones
conocidas de quercetina preparando y probando cinco
concentraciones de una solución estándar de quercetina, que
eran 0, 25, 50, 75 y 100 mg / l. Se preparó una solución madre
de quercetina disolviendo 25 mg de quercetina en 100 ml de
etanol al 80%. Luego se prepararon soluciones de trabajo
estándar pipeteando alícuotas de 0, 1, 2, 3 y 4 ml de la
solución madre (250 mg / L) en 10 ml volumétricos
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matraces y ajustando el volumen con etanol al 80%. Utilizando
tubos de ensayo, se hizo reaccionar 1 ml de cada solución
estándar con 3 ml de etanol al 95%, 0,2 ml de una dilución
acuosa al 10% del AlCl.3 reactivo, 0,2 ml de acetato de potasio
1 M y 5,6 ml de agua destilada. La mezcla se mezcló a fondo
con un mezclador de vórtice durante 30 sy se mantuvo a
temperatura ambiente durante 30 minutos. Las lecturas de
absorción se realizaron utilizando un espectrofotómetro
ultravioleta (UV) / visible «Hitachi U-2810» (Japón) a 415 nm.
Preparación de las muestras de prueba: se disolvieron 5 g de cada
muestra de prueba en 25 ml de metanol al 80%. Se transfirió 1 ml de
cada solución de muestra a un tubo de ensayo. Posteriormente, se
utilizaron procedimientos similares utilizados para construir la curva
estándar para analizar 1 ml de cada una de las soluciones estándar.
Para cada muestra, se preparó un blanco para la muestra de manera
similar, pero con la misma cantidad de AlCl al 10%3 La solución (0,2 ml)
se reemplazó con agua destilada. Las lecturas de absorbancia se
tomaron con un espectrofotómetro Hitachi U-2810 UV / Vis a 415 nm.
El contenido de la suma de flavonoides en términos de quercetina y
materia prima absolutamente seca.A,%, se calculó mediante la fórmula:
D⋅metro0⋅100⋅100⋅100
A= , (2)
D0 ⋅ metro ⋅100⋅(100 -W )
dónde D - densidad óptica de la solución utilizada; D0 -
densidad óptica de la muestra farmacopeica de quercetina;
metro - masa de la materia prima, g; metro0 - masa de la muestra
farmacopeica de quercetina, g; W - pérdida de masa durante el
secado de materias primas,%.
2.2. Técnica para estudiar el contenido de compuestos fenólicos
libras en el extracto. El contenido total de fenoles en las muestras
de extracto se determinó mediante el método de Folin-Ciocalteu
[8]. Preparación estándar: Para calcular el contenido total de fenol,
que se expresó como equivalente de ácido gálico (GAE), se
construyó una curva estándar de concentraciones conocidas de
ácido gálico. Se prepararon soluciones estándar en cinco
concentraciones diferentes, que representan 0, 25,
50, 75 y 100 mg / l. Se preparó una solución básica de ácido
gálico disolviendo 25 mg de ácido gálico en 100 ml de metanol
al 70%. Luego, para preparar soluciones de trabajo estándar
de 0, 1, 2, 3 y 4 ml, pipetear por separado alícuotas de la
solución madre de ácido gálico (250 mg / l) en un matraz
aforado de 10 ml y diluir posteriormente hasta un volumen
del 70%. metanol.
Para formar una curva estándar, se pipetea 1 ml de cada una de
las soluciones estándar en un tubo separado. A continuación, se
añadieron 5 ml de una dilución acuosa al 10% de reactivo de Folin-
Ciocalteu y se mezclaron bien con un mezclador vórtex durante 1 min.
Después de 3 a 8 min, 4 ml de 75 g / l de Na anhidro2CO3 se añadió la
solución. La mezcla se agitó completamente durante otro minuto y se
mantuvo en un baño de agua a 45ºC.° С durante 15 min.
Preparación de las muestras de ensayo: se disolvieron 5 g
de cada muestra del extracto obtenido en 50 ml de metanol al
70%. Se transfirió 1 ml de cada solución de muestra de
metanol a un tubo de ensayo. Luego se procesó y midió de
acuerdo con el procedimiento que se utilizó para construir la
curva estándar.
Para cada muestra de extracto, se preparó un blanco de muestra
pipeteando 20 ml de la muestra de extracto en un vaso de precipitados
de vidrio de 100 ml y ajustando el pH a 3,5 añadiendo ácido acético al
20%. Después de agregar 1,6 g de polivinilpolipirrolidona (PVPP), el
extracto se agitó suavemente a mano
15
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a 320 rpm durante 20 minutos. La mezcla de PVPP se filtró a través que se acompaña de la distribución en interfase de
de papel de filtro nº 1, y se tomó 1 ml del filtrado y se ensayó compuestos [9-11].
como se describe anteriormente. Después de enfriar, se leyeron
tabla 1
las absorbancias de los estándares, las soluciones de muestra y las
Efecto del extractante sobre el rendimiento de sustancias extractivas,
referencias en un espectrofotómetro Hitachi U-2810 UV / VIS a 765 la cantidad de glucósidos cardíacos y la cantidad de flavonoides de
nm frente a un blanco absorbente cero. Para calcular el contenido la hierba Adonis vernalis
final de ácido fenólico total (B), se utilizó la siguiente fórmula:
Flavonoide Gluco cardíaco Compuesto fenólico
Extractante
producir, % rendimiento de los lados,% libras de rendimiento,%

(Dmuestra - Dinsertar )⋅Vmuestra ⋅ D ⋅100

B= , (3) Agua 0,65 ± 0,17 0,22 ± 0,03 3,01 ± 0,11
Sstd ⋅ metromuestra ⋅ 103 ⋅ωDM ,muestra
EtOH al 40% 0,71 ± 0,10 0,61 ± 0,05 3,78 ± 0,07
dónde Dmuestra - densidad óptica de la solución; Dinsertar - densidad
EtOH al 50% 0,88 ± 0,01 0,64 ± 0,01 3,81 ± 0,07
óptica, que corresponde al punto de intersección de la curva de
calibración con el y-eje; Vmuestra - volumen de extracción, cm3; D - EtOH al 60% 0,92 ± 0,04 0,66 ± 0,09 3,85 ± 0,07
factor de dilución; Sstr - tangente del ángulo de inclinación de la
EtOH al 70% 1,22 ± 0,07 0,72 ± 0,07 3,92 ± 0,17
recta de calibración; metromuestra - masa de la muestra, g; ωDM,
muestra - pérdida de masa durante el secado de EtOH al 80% 1.01 ± 0,17 0,71 ± 0,03 3,85 ± 0,07
materias primas, %.
EtOH al 90% 1.06 ± 0,17 0,70 ± 0,01 3,81 ± 0,04
Para optimizar el proceso de extracción
se utilizaron los siguientes métodos de
extracción: maceración (infusión), 4.5
remaceración (maceración fraccionada) y
maceración con agitación constante.
4
Según los resultados obtenidos, se utilizó
alcohol etílico al 70% como extractante,
3,5
Concentración de BAS en el extracto,%

METRO fue de 1:10, el grado de molienda de

la planta medicinal fue de 1,6 mm. Con el
3
método de maceración (infusión), la materia
prima medicinal triturada se vertió con
alcohol y se dejó por 6 horas, se realizó 2.5
agitación al inicio y al final del experimento.
Después de la infusión, el extracto se filtró a 2
través de un filtro de papel.
Durante la remaceración (maceración 1,5
fraccionada), la extracción se realizó mediante
un aparato Soxhlet. La extracción se realizó a 1
una temperatura de 78,39°C durante 6 h.
La extracción por maceración con agitación 0,5
constante se llevó a cabo a temperatura ambiente
durante 6 h. Después de la extracción, cada extracto se 0
concentró al vacío para obtener un extracto seco con un agua 40% 50% 60% 70% 80% 90%
contenido de humedad de hasta el 5%. etanol etanol etanol etanol etanol etanol
La eficiencia de los métodos de extractivos glucósidos cardíacos Compuestos fenólicos
extracción se determinó por el rendimiento
de los extractos. El contenido cuantitativo de Figura 1. Influencia del extractante en el rendimiento de extractos

extractos se realizó mediante el método

espectrofotométrico. Tabla 2
Influencia del grado de molienda de las materias primas en el rendimiento.

3. Resultados de la investigación y debate de flavonoides, glucósidos cardíacos y la cantidad de compuestos fenólicos

de la hierba Adonis vernalis
De acuerdo con la fórmula (1), se realizaron los
cálculos del rendimiento de sustancias extractivas a partir Molienda
Rendimiento en términos de materias primas secadas al aire,%

de la materia prima vegetal extraída, cuyos resultados se la licenciatura,

Glucósidos cardíacos Compuesto fenólico
presentan en las Tablas 1, 2 y en la Fig.1, 2. mm Rendimiento de flavonoides,%
producir, % libras de rendimiento,%

De acuerdo con los resultados experimentales (Tabla 1, Fig. 1),

el rendimiento máximo de BAS se logra tras la extracción con 0,5 0,91 ± 0,20 0,54 ± 0,11 3,79 ± 0,97

EtOH al 70%. Este resultado puede explicarse por la estructura del

1.0 0,98 ± 0,21 0,64 ± 0,04 3,88 ± 0,44
BAS extraído, es decir, por la presencia de grupos hidroxilo. A una
concentración de extractante del 70%, se combinan las 1,6 0,92 ± 0,24 0,67 ± 0,07 3,92 ± 1.07
propiedades de desorción y solvatación del EtOH. La polaridad y
propiedades de penetración del EtOH al 70% permiten influir en 2.5 1,22 ± 0,07 0,71 ± 0,09 3,76 ± 0,33

todas las etapas de extracción, proporcionar los procesos de

4.0 1,21 ± 0,04 0,67 ± 0,04 3,64 ± 1.02
difusión interna, molecular y convectiva,

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4.5

3,5
Concentración de BAS en el extracto,%
3

2.5

1,5

0,5

0
1:05 1:10 1:15 1:20

extractivos glucósidos cardíacos Compuestos fenólicos

Figura 2. Influencia del grado de molienda de las materias primas en el rendimiento de los extractos

El grado óptimo de trituración al que se alcanza la máxima Tabla 3

extracción de flavonoides, glucósidos cardíacos y la suma de El rendimiento de los extractos en función de la relación de las fases.
materia prima / extractante
compuestos fenólicos es de 2,5 mm (Tabla 2, Fig. 2). Esto se
debe al aumento de la superficie de contacto para una mejor Rendimiento en términos de materias primas secadas al aire,%
extracción. Materia prima / ex-
Flavonoide Gluco cardíaco Compuesto fenólico
Con una molienda adicional, se observa una disminución proporción de tractantes

producir, % rendimiento de los lados,% libras de rendimiento,%

en el contenido de sustancias biológicamente activas, que
puede explicarse por un aumento de las sustancias de lastre 1: 5 1.05 ± 0,07 0,22 ± 0,03 3,01 ± 0,11

en el extracto. 1:10 1,11 ± 0,10 0,61 ± 0,05 3,78 ± 0,07

Los resultados del cálculo del contenido final de ácido 1:15 1.08 ± 0,01 0,64 ± 0,01 3,81 ± 0,07
fenólico total de acuerdo con la fórmula (2) se presentan
1:20 1.02 ± 0,04 0,66 ± 0,09 3,85 ± 0,07
en la Tabla 3 y la Fig.3.

4.5

3,5
Concentración de BAS en el extracto,%

2.5

1,5

0,5

0
1:05 1:10 1:15 1:20

extractivos glucósidos cardíacos Compuestos fenólicos

Fig. 3. El rendimiento de extractos en función de la relación de las fases materia prima / extractante

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SISTEMAS QUIMICOS Y TECNOLOGICOS
La transición de una sustancia de una fase sólida a una
líquida ocurre solo antes de alcanzar un estado de equilibrio
entre las fases, que se considera como la etapa final del
proceso de extracción. En condiciones de equilibrio, la
concentración de las sustancias diana en el extracto que llena
el espacio libre de la fase sólida debe corresponder a una
cierta concentración de equilibrio de estas sustancias en el
volumen principal del extractante. Se encontró que esta
concentración se logra en una relación de fases de 1:15.
Los resultados del cálculo del contenido final de ácido
fenólico total según la fórmula (3) se presentan en la Tabla
4.
Cuadro 4
El contenido cuantitativo de extractivos en el extracto seco.
de la hierba Adonis vernalis
Contenido de extractivo
No. Método de extracción
sustancias,%
1 Maceración (infusión) 8,91 ± 0,19
2 Remaceración (maceración fraccionada) 14,77 ± 0,31
3 Maceración con agitación constante 20.41 ± 0,27
Como resultado de los estudios, se ha encontrado que el
método óptimo para extraer la hierba Adonis vernalis es la
maceración con agitación constante (Cuadro 4).
El extracto resultante es un extracto seco de Adonis vernalis,
un polvo amorfo de color marrón con un olor específico, con un
contenido de humedad de hasta el 5%.
4. Conclusiones
Los estudios realizados permitieron determinar los valores
óptimos de los parámetros que afectan el proceso de
extracción de sustancias biológicamente activas de la hierba.
Adonis vernalis. Entre los que se encuentran el grado de
trituración de las materias primas, la selección del extractante, la
proporción de la materia prima y el extractante (hidromódulo).
Según los resultados de la determinación del contenido de
sustancias biológicamente activas en las muestras obtenidas, los
parámetros óptimos del grado de molienda de las materias
primas. D = Se seleccionaron 2,5 mm, el extractante, que excluye
como máximo a BAS, fue EtOH al 70% con una relación materia
prima: extractante de 1:10.
A partir del estudio de las propiedades de las materias
primas y del proceso de extracción, se eligió el método de
maceración con agitación constante como el más óptimo para
la extracción de la hierba. Adonis vernalis.
18
ISSN 2664-9969
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Anna Krvavych, PhD, Asistente, Departamento de Tecnología de Sustancias
Biológicamente Activas, Farmacia y Biotecnología, Universidad Nacional
Politécnica de Lviv, Lviv, Ucrania, ORCID: https://orcid.org/
0000-0002-7402-2689, correo electrónico: anna.s .krvavych @ lpnu.ua
Roksolana Konechna, PhD, Profesor Asociado, Departamento de Tecnología
de Sustancias Biológicamente Activas, Farmacia y Biotecnología, Universidad
Nacional Politécnica de Lviv, Lviv, Ucrania, ORCID: https: // orcid.org/
0000-0001-6420-9063, е-mail: rkonechna @ ukr.net
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