Biología molecular.

Fundamentos y aplicaciones en las ciencias de la salud >Extracción de ácidos

nucleicos
Adriana María Salazar Montes, Ana Soledad Sandoval Rodríguez, Juan Socorro Armendáriz Borunda+
Cuadro 11-2.
Ventajas y desventajas de diversos métodos de extracción de ácidos nucleicos. De las diversas técnicas disponibles para la extracción de ácidos nucleicos, algunas como la extracción por cloruro de cesio se
consideran ideales para ADN plasmídico. Algunas otras, como la extracción fenol-cloroformo, se emplean para cualquiera de los ácidos nucleicos (se realizan ligeras modificaciones para la extracción de ARN).

Método Ventajas Desventajas

Fenol/cloroformo (ADN) e isotiacianato de guanidina/fenol- •El producto purificado requiere ser precipitado con alcaloides.
•Buen rendimiento.
cloroformo (ADN) •El fenol es tóxico y caústico.
•Permite el aislamiento de todo tipo de ácido nucleico.

•Laborioso y prolongado.
•Excelente método para obtención de ADN plasmídico.
•BrEf es cancerígeno.
Cloruro de cesio ADN plasmídico •Alta pureza de los ácidos nucleicos.
•Requiere eliminación de CsCl.
•Requiere muy pocas manipulaciones, lo que elimina el riesgo de
•Indispensable el uso de material especializado.
contaminaciones esporádicas con rinasas.

•Tiempos de separación cortos y bien definidos. •La recuperación del ácido nucleico purificado es ineficiente
Cromatografía por exclusión de tamaño (ADN o ARN)
•Alta sensibilidad. (pérdida de muestra).
•Reproducible.

•Requiere una cantidad grande de muestra para obtener

Salting-out (ADN) •Reactivos inocuos.
cantidades adecuadas de ADN.
•Material barato.

Chelex (ADN) •Previene la degradación del ADN por sus agentes quelantes. •Se obtiene ADNes, el cual no puede usarse para RFLPs.
•No hay pérdidas considerables de ADN.

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