Procedimiento experimental

Preparación de diluciones
1. Selección de le muestra.
2. Triturar la muestra.
4. Mesclar la muestra de agar con 120 ml de agua.
5. Pesar 25g de la muestra, dentro del matraz que contiene 225ml de agua de peptona
(solución madre).
6. El homogeneizado debe ser realizado en el agitador vortex.
7. Con la ayuda de una pipeta se toma 1ml de la solución madre (10 −1), se coloca a uno de
los tubos que contenga 9 ml de agua de peptona (diluyente), para obtener la dilución 10 −2
homogeneizar la dilución obtenida y de esta transferir 1ml a otro tubo que contenga 9 ml
de diluyente para obtener la dilución 10−3, repetir estos pasos hasta obtener el número de
diluciones requeridas.

Vertidos en placas
1. A cada caja verter 15 o 20 ml de agar (medio de cultivo) a temperado a 45.
2. Homogeneizar su contenido con movimientos lentos.

3. Dejar solidificar.

4. Las diluciones seleccionadas se homogeneizan en un agitador vortex por 5 segundos.

5. Con una pipeta estéril se transfiere en duplicado de cada una de las diluciones
preparadas 0.1 ml de muestra que se deposita en la superficie del agar estéril y
solidificado contenido en una caja Petri.
6. Se procede a flamear el asa de drigalski, sumergida en alcohol.
7. Desplazar el asa por el medio haciendo un movimiento en forma de zeta desde un
borde de la placa hacia el opuesto. Cuando se llega al centro de la placa, se levanta el asa
y se repite el movimiento empezando por el otro extremo de la misma.
8. Incubar a 35° por 48 horas.