CyTOF

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Flujo de trabajo de CyTOF

La citometría por tiempo de vuelo , o CyTOF , es una aplicación de citometría

de masas que se utiliza para cuantificar objetivos marcados en la superficie y el
interior de células individuales. CyTOF permite la cuantificación de múltiples
componentes celulares simultáneamente usando un detector ICP-MS . 1
CyTOF aprovecha el inmunomarcaje para cuantificar proteínas , carbohidratos o
lípidos en una célula. Los objetivos se seleccionan para responder a una pregunta
de investigación específica y se marcan con anticuerpos marcados con metal
lantánido . Las células marcadas se nebulizan y se mezclan con gas argón
calentado para secar las partículas que contienen células. La mezcla de gas de
muestra se enfoca y se enciende con un soplete de plasma de argón . Esto rompe
las células en sus átomos individuales y crea una nube de iones. Los abundantes
iones de bajo peso generados a partir del aire ambiental y las moléculas biológicas
se eliminan mediante un analizador de masas de cuadrupolo . Los iones pesados
restantes de las etiquetas de anticuerpos se cuantifican medianteEspectrometría
de masas de tiempo de vuelo .  abundancia de iones se correlaciona con la
cantidad de diana por célula y se puede utilizar para inferir las cualidades
celulares. 23
La sensibilidad de la espectrometría de masas para detectar diferentes iones
permite realizar mediciones de más de 50 objetivos por celda y evita los
problemas de superposición espectral que se observan cuando se utilizan sondas
fluorescentes.  Sin embargo, esta sensibilidad también significa que la
contaminación por trazas de metales pesados es una preocupación.  El uso de un
gran número de sondas crea nuevos problemas en el análisis de los datos de gran
dimensión generados.