Marchitez por Fusarium de las

Musáceas: una Actualización

de los Resultados de la
Investigación en Cuba

Luis Pérez-Vicente

Noviembre 2017 27-30 Noviembre 2017

 Encuesta de superficie cultivada por clones en Cuba
(DNSV, 2014; no publicado)

Superficie ocupada por plátanos de cocción

Superficie ocupada por bananos postre
180 164.7
18 16.91 160
16 140
14 120
Ha x 10 ^3

12
100 86.3

HA X 10^3
10 8.46 78.1
7.43 80
8
6 60
4 40
2 0.42 0.61 20
0.4
0 0
Plátanos Híbridos Plátanos TOTAL
AAB FHIA ABB COCCIÓN
cocción

Noviembre 2017
 Patosistemas comunes de mal de Panamá en Cuba

Raza 1 (VCG 01210) en

Gros Michel en cultivo Raza 1 (VCG01210) en
mixto con café Manzano (AAB) en cultivo
mixto con forestales
Raza 1 VCG (01210) en
Manzano (Silk; AAB)

Noviembre 2017
 Patosistemas comunes de mal de Panamá en Cuba

Raza 2 en Burro CEMSA

(ABB) en Baracoa

FHIA 03 (AABB) en
Santiago de Cuba
Raza 1 en Manzano Vietnamita
(Pisang awak, ABB) en Habana

Noviembre 2017
 VARIABILIDAD DE LAS POBLACIONES
DE Foc DE CUBA : DESARROLLO DE
SISTEMA DIAGNOSTICO:

q  Grupos de compatibilidad vegetativa (VCG)

q  Secuenciación de la región IGS del gen

mitocondrial nuclear, análisis filogenético y
obtención de cebadores para qPCR
SybrGreen para R1/R2 y R4T

Noviembre 2017
Aislamiento y obtención de mutantes Nit M, nit 1 y nit 3
Técnica de Puhalla (1985) y
Correll et al. (1987);
Ploetz, R. y Correll, J. C. 1988.
(Batlle y Pérez, 1996) Aislados resistentes
Medio MM + K2ClO3 a K2CLO3 (crn)

CLONES
Gros Michel (AAA)
Manzano (AAB)
Burro CEMSA (ABB)
Burro Criollo (ABB)
M. Vietnamita (ABB)

Apareamiento Nit M y nit1 Mutante en MM Sector mutante nit

Noviembre 2017
 Grupos de compatibilidad vegetativa (VCG’s)
de las poblaciones de Foc de Cuba

VCGs Raza Frecuencia Número total de

aislamientos (%)
1210 1 17,3 9
1210 2 5,8 3
0124 2 50,0 26
0124 1 3,8 2
0124/125 2 9,6 5
0128 2 1,9 1
New VCG’s? 2 7,7 4
CRN 2 3,8 2
Total 52

Noviembre 2017
Colección de aislamientos utilizados en el análisis filogenético
VCGs Raza No Total VCGs Raza No Total
Nit M 0120 R1/R2 1 Nit M 1210 R1 1
Nit M 0120/1215 R1/R2 2 Nit M 01211 R1/R2 1
Nit M 0121 R4S 1 Nit M 01213 R4T 5
Nit M 0123 1 Nit M 01220 R1/R2 1
0124 R1 2 Nit M 01211 R1/R2 1
0124 R2 4 Nit M 01213 R4T 5
0124 ? 1 Nit M 01220 R1/R2 1
0124/0125 R2 1 F. semitectum 1
Nit M 0124/0125 R1/R2 1 F. oxysporum n. p. 1
Nit M 0126 R1/R2 1 Total aislados 34
0128 R2 1 Total VCG’s 16
Nit M 0129 R1/R2 1 R1/R2 17
01210 R1 1 R4S 1
01210 R2 1
R4T 5
Noviembre 2017
Países 7
 Comprobación de los aislamientos Nit M 01213 (R4T).
Productos de la PCR según protocolo Dita et al., (2010).

Noviembre 2017
 Análisis filogenético y desarrollo de cebadores específicos
para qPCR de Foc R4T R1/R2 (Pérez et al., 2012)
Cebadores para la amplificación de la Región IGS del operón ribosomal:
IGS01f (forward; 5’-CGATAGGAGTTCCGTCGAGTCT-3’)
IGS02r (reverse; 5’-GACTGCATCTACACAGGCATCC-3’)

•  Las secuencias IGS fueron

alineadas mediante el software
CLUSTAL X (Thompson et al., 1997).
•  Se construyó un árbol
filogenético usando el using
Neighbour Joining method (MEGA
4.0 (http://www.megasoftware.net;
Saitou and Nei, 1987)

Noviembre 2017
 Cebadores diseñados y reacciones

Noviembre 2017
Sistema
Diagnóstico
Molecular

Noviembre 2017
 Reacción a Foc RT4de los clones de
bananos y plátanos mas cultivados en
Cuba frente Foc

q  Ensayos en Cuba en campo Caney del Sitio,

Santiago de Cuba: Inoculación con R1 y R2.
q  Resultados parciales de los ensayos en invernadero
en la U. de Wageningen: Inoculaciones con R1 y Foc
R4T
q  Evaluación preliminar del riesgo de impacto de la
aparición de Foc R4T

Noviembre 2017
 Escala de evaluación

Noviembre 2017
 Evaluación de la susceptibilidad de los clones de banano a RT4
Enviados a Universidad de Wageningen Laboratorio Dr. G. Kema
Gran enano (AAA), (Fernando García)
SH 3640 (AAAB), Inoculo:
Burro CEMSA (ABB), •  Raza 1 (aislamiento de R1 de Brasil)
CEMSA ¾ (AAB), •  R4T (aislamiento II-5 from Indonesia).
Curare (AAB), Inoculación:
•  150 ml de una suspensión de esporas de (1 x 106/ml)
FHIA 01(AAAB),
directamente al sustrato de cada contenedor con las plantas.
FHIA 02 (AAAB), •  8 plantas/clon con la raza 1 y la raza 4 tropical y 5 plantas
FHIA 18 (AAAB), testigo
FHIA 20 (AAAB), •  6 meses en el invernadero para el desarrollo de los síntomas
FHIA 21 (AAAB),
FHIA 23 (AAAA),
FHIA 25 (AAAB),
Pisang ceylan (AAB),
Yangambi Km 5(AAA).

Noviembre 2017
 Resultado de las evaluaciones

Noviembre 2017
 Resultado de las evaluaciones (cont.)

Noviembre 2017
 Resultado de las evaluaciones (cont.)

Pisang ceylan

Noviembre 2017
 Análisis preliminar del riesgo de impacto de Foc R4Tde
acuerdo a la superficie aproximada ocupada por
diferentes clones de plátanos (encuesta septiembre 2014)

Clones Ha X 103 % del Total Susceptibilidad R4T

Subgrupo Cavendish 0,42 0.23 Susceptibles

Híbridos FHIA 7,43 0,04 Variables
( AAAA y AAAB postre)
Subgrupo Mysore (AAB) 0,61 0,33 Susceptibles
Subgrupo Pisang awak (ABB)
8,46 0,05 Susceptibles
y otros
TOTAL POSTRE 16,91
Subgrupo Plátanos (AAB) 86,25 34,7 Poco susceptibles
Híbridos FHIA cocción 0,37 0,20 Poco susceptibles
Subgrupo Bluggoe (ABB) 78,08 44,8 Susceptibles
TOTAL COCCIÓN 164,70
TOTAL GENERAL 181,62

Noviembre 2017
 Evaluación de la sensibilidad de Foc a
diferentes ingredientes activos y de un
desinfectante a base de amonio
cuaternario para la desinfección de
superficies y herramientas.

Noviembre 2017
 Valores de inhibición, DE50, y coeficientes de determinación (R2) del
Mekzol FR 5002 para los diferentes fitopatógenos estudiados.
Concentración amonio Inhibición respecto al control en (%).
cuaternario (µg/ (medias de tres réplicas)
ml) Foc R2 Foc RT4 P. citricarpa
25000 100.00 100.00 100.00
20000 100.00 100.00 100.00
10000 100.00 100.00 100.00
7500 100.00 100.00 100.00
5000 100.00 100.00 100.00
2500 76.95 100.00 69.32
1500 73.98 58.73 65.91
1000 71.38 44.44 63.64
750 63.94 34.92 62.50
500 61.71 33.33 57.95
250 57.62 30.16 56.82
100 36.80 20.63 48.86
50 29.00 9.52 40.91
0 0 0.00 0.00
DE50 614.7 1040.68 80.41
R Ecuación regresión
2
0.66 0.84 0.801
dosis-mortalidad

Noviembre 2017
 Crecimiento de D. chrysanthemi en diferentes
concentraciones de Mekzol .

Concentración amonio Repeticiones

cuaternario (µg/ml) 1 2 3
25000 0 0 0
20000 0 0 0
10000 0 0 0
7500 0 0 0
5000 0 0 0
2500 0 0 0
1500 + + +
1000 + + +
750 + + +
500 + + +
250 + + +
100 + + +
50 + + +
0 + + +

Noviembre 2017
 Número de colonias obtenidas de las cuchillas
contaminadas con Foc R2 después de
desinfección amonio cuaternario.
Tiempo de tratamiento (min)
Concentración (media de tres repeticiones)
Mekzol µg/ml
1 5 10 15
0
440,0 412,0 440,3 427,0
500
328,3 233,3 119,0 32,7
1000 1,0 0,0 0,0
5,0
1500 0,0 0,0 0,0
0,0
2500 0,0 0,0 0,0
0,0
5000 0,0 0,0 0,0
0,0
7500 0,0 0,0 0,0
0,0
* Concentración de uso recomendada por el fabricante

Noviembre 2017
 Efecto inhibitorio de diferentes ingredientes activos sobre
Foc R1 (01210), R2 (0124 y 0128) y Nit M R4T (01213)
Ingrediente activo µg/ml Inhibición %*
Thiabendazol 5,0 100,0
Benomyl 5,0 100,0
Fludioxonil 5,0 100,0
Propiconazol 5,0 66,7
Cyproconazol 5,0 75,2
Difenoconazol 5,0 49,5
Triadimenol 5,0 59,2
Pyridil benzamil 5,0 23,8
* Promedio de todos los aislamientos y tres réplicas / concentración.
1.  Foc es muy sensible a benzimidazoles y fenilpirroles; moderadamente sensible a los triazoles
2.  Las especies fungosas sensibles a triazoles son inhibidas usualmente a 1 µg/ml
3.  Los benzimidazoles son fijados por los coloides del suelo y no pueden ser utilizados para ser
absorbidos por raíces, solo por inyección al pseudotallo.
4.  Foc es poco sensible al pyridil benzamil (ingrediente activo del nematicida Verango)
Noviembre 2017
Noviembre 2017
 Siete vías fáciles para proteger la finca de
las amenazas a la bioseguridad

1. Estar informado de las amenazas a la bioseguridad:

Conocer las principales plagas que constituyen riesgo
a la bioseguridad

2. Usar material de plantación sano

3. Prevenir la entrada de plagas a la finca: asegurarse de

que los trabajadores y equipos que entran a la finca se
descontaminan antes de entrar y salir de la finca.

4. Monitorear el cultivo frecuentemente para detectar

plagas ayudará a detectar tempranamente algo
extraño o inusual
Siete cosas fáciles
que se pueden hacer 5. Informar situaciones inusuales inmediatamente
para reducir el riesgo
6. Estar informado sobre las regulaciones existentes
de entrada de plagas para proteger la producción platanera de las
a la finca: amenazas existentes
7. Capacitación trabajadores en síntomas y
procedimientos
Noviembre 2017
Noviembre 2017
 ¡Gracias!

Noviembre 2017