Universidad De Cundinamarca

Facultad De Ciencias Agropecuarias

Ingeniería Agronómica
Fitopatología 602

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE BACTERIA FITOPATOGENA EN

BULBOS DE CEBOLLA CABEZONA (Allium cepa L)

INSULATION AND IDENTIFICATION OF BACTERIA FITOPATOGENA IN BULBS

OF CEBOLLA CABEZONA (Allium cepa L)

Acuña BS¹, Obregón N¹, Victoria YS¹, y Susa RD¹/ UNIVERSIDAD DE

CUNDINAMARCA – FUSAGASUGA CUNDINAMARCA (SEDE PRINCIPAL);
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

RESUMEN
Se realizo un experimento en los laboratorios de la universidad de Cundinamarca
seguido por los lineamientos de 3 prácticas de laboratorio que iban enfocados en
el aislamiento e identificación de bacterias fitopatógenas presentes en una
muestra de cebolla cabezona (Allium cepa L) donde la muestra fue seleccionada
con síntomas de enfermedad presente (magullamiento, y las escamas afectadas
tienen un tono entre amarillo pálido y café claro, y con apariencia
acuosa).posteriormente por la realización de diferentes metodologías como fueron
1. Aislamiento del material vegetal enfermo, 2. identificación de géneros
bacterianos y 3. extracción de ADN; se identificaron las posibles bacterias
presentes y se determinó la existencia de bacterias gramnegativas y la aparición
de__________ en la muestra (bulbo de cebolla).
PALABRAS CLAVES: Bacteria Fitopatógena, Aislamiento, Identificación,
extracción de ADN, Gramnegativas.

SUMMARY
An experiment was carried out in the laboratories of the University of
Cundinamarca followed by the guidelines of 3 laboratory practices that were
focused on the isolation and identification of phytopathogenic bacteria present in a
sample of big-headed onion (Allium cepa L) where the sample was selected with
Symptoms of present disease (bruising, and the scales affected have a pale yellow
to light brown tone, and with an aqueous appearance). Later on, by performing
different methodologies such as 1. Isolation of diseased plant material, 2.
Identification of bacterial genera and 3. DNA extraction; The possible bacteria
present were identified and the existence of gram-negative bacteria and the
appearance of __________ in the sample (onion bulb) were determined.
KEY WORDS: Phytopathogenic Bacteria, Isolation, Identification, DNA extraction,
Gram-negative.

1 Fusagasugá,
Cundinamarca
Colombia
2019
 Universidad De Cundinamarca
Facultad De Ciencias Agropecuarias
Ingeniería Agronómica
Fitopatología 602

INTRODUCCIÓN

La cebolla es un cultivo de gran importancia en Colombia, se estima que al año se producen 400
mil toneladas de este producto principalmente en los departamentos de Boyacá, Cundinamarca,
Santander y Nariño existen muchos factores que pueden afectar la producción de esta, dentro de
los microorganismos fitopatogenos que pueden afectar a la cebolla se encuentran las bacterias las
cuales pueden llegar a causar perdidas significativas, una de las enfermedades comunes causada
por bacterias en la cebolla es la pudrición blanda la cual se presenta principalmente en bulbos
maduros, aunque es mas común de ver en bulbos que han sido almacenados o que están en
proceso de transporte

Para una primera clasificación de las bacterias se lleva a cabo la tinción de Gram ya que es un
método sencillo, económico y eficaz. Esta tinción se basa en las características de la pared celular
de las bacterias; como es sabido las Gram negativas tienen una capa más delgada de
peptidoglicano y una membrana celular externa, en comparación a las Gram positivas que tienen
una capa mas gruesa pero sin membrana externa, características principales y fundamentales
para la diferencia en la coloración de estas

Para la identificación de géneros comunes de bacterias se utilizan diferentes medios de cultivo con
el fin de realizar pruebas bioquímicas estos pueden ser: YDC, King B, citrato de Simmons entre
otros, cada uno le brinda condiciones especificas para su crecimiento, posteriormente se realizan
las lecturas y pruebas para así identificar más fácilmente el posible genero de las bacterias de
interés

Esta serie de laboratorios se realizo con el objetivo de aislar las bacterias presentes en un bulbo
de cebolla e identificar el su genero y conocer una de los protocolos para la extracción de DNA de
las mismas bacterias

2 Fusagasugá,
Cundinamarca
Colombia
2019
 Universidad De Cundinamarca
Facultad De Ciencias Agropecuarias
Ingeniería Agronómica
Fitopatología 602

3 Fusagasugá,
Cundinamarca
Colombia
2019
 Universidad De Cundinamarca
Facultad De Ciencias Agropecuarias
Ingeniería Agronómica
Fitopatología 602

MATERIALES Y MÉTODOS

Ubicación y Características agro climatológicas:

Esta serie de prácticas se desarrolló en la Universidad de Cundinamarca
(Laboratorios agropecuarias) en el municipio de Fusagasugá, región del Sumapáz
situada en el departamento de Cundinamarca.
 Clima templado
 Temperatura promedio de 19,4°C
 Precipitación media es de 1137 mm
 Altitud de 1726 msnm
 Latitud 4,336°
 Longitud -74,364°
 Humedad relativa 80 a 85%

LUGAR:
Fusagasugá
Cundinamar
ca (UDEC)
laboratorios

PROVINCIA
DEL
SUMAPAZ

Esquema 1: Ubicación del lugar empleado para el desarrollo del proyecto

Universo, población y muestra:

El experimento se desarrolló con un bulbo de cebolla cabezona la cual presentaba
síntomas de presencia de bacteria fitopatógena, la cual era necesaria para la
elaboración de las 3 guías de laboratorio suministradas por la docente del área de
fitopatología.

4 Fusagasugá,
Cundinamarca
Colombia
2019
 Universidad De Cundinamarca
Facultad De Ciencias Agropecuarias
Ingeniería Agronómica
Fitopatología 602

Los materiales usados

Fotografía #1: muestra de bulbo de cebolla cabezona (Allium cepa L) con

síntomas de enfermedad bacteriana (Susa, 2019)

5 Fusagasugá,
Cundinamarca
Colombia
2019
 Universidad De Cundinamarca
Facultad De Ciencias Agropecuarias
Ingeniería Agronómica
Fitopatología 602

TABLA 1: pruebas bioquímicas para la identificación de géneros de bacterias Fito

patógenas (Tomada de guía de laboratorio 7, UDEC, 2019 Y Citada por Schadd,
2001).

CONCLUSIONES

 es importante a la hora de realizar una identificación de bacterias el primer paso a

realizar es la tinción de Gram ya que esta nos dice si las bacterias son Gram

6 Fusagasugá,
Cundinamarca
Colombia
2019
 Universidad De Cundinamarca
Facultad De Ciencias Agropecuarias
Ingeniería Agronómica
Fitopatología 602

positivas o Gram negativas y nos dice la forma, ya que esta última es fundamental
porque las bacterias patógenas son bacilos sean largos o cortos.

 Las pruebas bioquímicas son utilizadas únicamente para determinar

bacterias hasta genero
 En la extracción de ADN realizada, se pudo determinar que hay una enzima
que es la encargada de degradar el RNA para el posterior

7 Fusagasugá,
Cundinamarca
Colombia
2019