EMPLEO DEL MICROSCOPIO OPTICO

INTRODUCCIÓN
El microscopio es una de las herramientas básicas en el estudio de la Biología Celular.
Mediante un conjunto de lentes, el microscopio aumenta el tamaño de los objetos bajo estudio. Dos principios están involucrados
en el uso del microscopio: La MAGNIFICACIÓN, que es la capacidad de aumentar el tamaño de una imagen y la RESOLUCION que
es la capacidad de producir una imagen nítida, o bien la capacidad del instrumento para dar imágenes bien definidas de dos
puntos situados muy cerca uno del otro en el objetoa observar.

Evolución de la Microscopia a través del tiempo

R: 0,17
µm x 1000

Teoría Celular
Microscopio
Micrographia M.Schleiden Contraste de Fase
1590 R.Hooke 1674 T.Schwann 1878 F. Zernike
Z.Janssen 1665 A.van Leeuwenhoek 1838-39 E. Abbe 1932
Microscopio Microscopio Teoría de la
Compuesto Simple Formación de la
imagen
R: 3
µm x R : 0,61 x 
270 AN

Microscopio de Fuerza
Atómica (AFM)
Utilización de anticuerpos + G. Binnig
colorantes fluorescentes 1965 H.Rohrer 1988
1938
E. Ruska 1941 1981
Microscopio Electrónico Coons Microscopio Confocal
de Transmisión (MET) (-) nm
Electrónico de ( nm)
Barrido
Von (MEB)
Ardenne DNA  2,5 Microscopio de Rastreo

R: 0,2 nm
x 500.000

ACTIVIDADES
1. Uso y manejo del Microscopio Óptico (MO):

•El objeto a observar y los lentes deben estar limpios (Utilice solo papel tissue)
•Mantenga el microscopio a una distancia prudente del mesón.
•Verifique que el lente objetivo de menor aumento (lupa) esté en el eje óptico.
•Verifique que la fuente luminosa este en buenas condiciones.
•Trate de observar con ambos ojos.
•Una vez terminado el trabajo practico debe limpiar y guardar el MO.
2. Identificación de los componentes mecánicos y ópticos de un MO

3. Nomenclatura utilizada en el MO
 COMPONENTES DEL MICROSCOPIO

SISTEMA MECÁNICO SISTEMA DE ENFOQUE SISTEMA ÓPTICO SISTEMA DE

ILUMINACIÓN
Pie o Base Tornillos macrométricos Ocular (10x) Fuente luminosa artificial
Columna o brazo Tornillos micrométricos Objetivos:(4x, 10x; 45x y o natural
Tubo de 100x (inmersión)
Revólver portaobjetivos Condensador
Platina Diafragma
Pinza y Carro

CALCULO
DEL AUMENTO TOTAL: Aumento del Ocular multiplicado por el Aumento del Objetivo.
Ej: 10x x 4x = 40x (la muestra se ve aumentado 40 veces)

INST RUCCIONES:
1. Complete el esquema que se encuentra en su guía de acuerdo a las características que
le señala su profesor en relación al microscopio. Luego, asegúrese que comprende bien
la función de cada parte del instrumento o espere las instrucciones de su profesor.
2. Usted recibirá una preparación, en la cual está incluida una letra (ñ-e).
3. Coloque la preparación sobre la platina en la posición en que usted la lee normalmente.
Posteriormente, enfóquela con el objetivo de menor aumento
4. Observe la misma preparación con los objetivos de mayor aumento. Al emplear
el objetivo de inmersión (100x), deberá tener cuidado de no dañar este objetivo ni
el preparado.

ACTIVIDADES:

1. ¿Cuál es la posición aparente de la letra cuando se ve por el microscopio ?

2. Compare cómo se ve la letra a través del microscopio v/s a simple vista. Realice
un esquema.

3. ¿Cuanto más detalles pueden verse de la letra, al observarla con los objetivos mayores?

4. ¿Es el entintado de la letra uniforme? ¿Por qué?

5. ¿Cómo varía el entintado de la letra en su aspecto cuando es vista con el ojo a

simple vista y con un objetivo de menor o mayor aumento?

6. Al emplear los aumentos 10x y 40 x ¿Cuántas veces fue amentado el tamaño de la

muestra?

7. ¿Por qué se emplea aceite de inmersión con 100x? Fundamente su respuesta.

 TIPOS CELULARES

INT RODUCCIÓN:

La célula es la unidad morfológica y fisiológica en la estructura de los seres

vivos, así como el átomo lo es en la estructura química.
La mayor parte de las células tiene entre 10 y 100 µm de diámetro. Esto se debe a
que existe un límite para el crecimiento celular.
El conjunto de células de la misma clase y sustancia intercelular elaborada por
ellas, son capaces de realizar la misma función, asociándose en un gran número, unidas
por membranas celulares o por material intercelular para formar TEJIDOS.

ACT IVIDADES:

1. Observación de: CÉLULAS ANIMALES

Material: Raspado de mucosa (mejilla interna humana)
Tinción: Azul de toluidina, colorante vital (no daña a la célula)
Procedimientos:
Con cuidado y con ayuda de un palito de fósforo, raspe suavemente el interior de su boca
(mejilla interna), cuide de raspar con la zona que no tiene pólvora, evite hacerse daño.
Humedezca con saliva su cavidad bucal en forma abundante, de esta forma le será más fácil
obtener la muestra. Coloque la muestra en un portaobjetos que le será proporcionado por su
profesor, luego colóquele una gotita de colorante (azul de toluidina) y cubra la muestra con un
cubreobjetos.
Coloque su preparación en la platina y enfoque con menor aumento. Posteriormente, pase al de
40x (no se empleará el de 100x). Diferencie las características
celulares. Describa y dibuje lo observado.

2. Observación de: FROTIS SANGUINEO

Material: sangre humana
Tinción: sin coloración / hematoxilina-eosina
Procedimientos:
Con una aguja pinche la yema de un dedo y luego deje caer una gota de sangre en el
portaobjetos. Posteriormente, con el el cubreobjetos esparsa lo más posible la gota, para evitar
aglomeración de células, cubriendo luego la muestra. Realice el chequeo con aumento
menor (10x) y describa su observación. Pase a aumento mayor (40x), observe y dibuje. Compare
con el preparado de sangre fijada y teñida. Dibuje lo observado.
 CITOESQUELETO

1 2 Citoesqueleto

3 Microvellosidad
4 Cilios

5 Musculo esquelético. (MET)

6 Sarcómero

TAREA
1) Realizar esquema de un corte transversal de AXONEMA (9+2)
2) Esquematice un SARCOMERO con todas las proteínas que lo conforman
 ENDOMEMBRANAS Y SECRECION CELULAR

Modelos de Membrana

Unidad de membrana (ME)

J.D. Robertson 1957

Modelos de Membrana Plasmática

Eritrocito

Modelo Membrana
Singer y Nicholson, 1972

Enterocito MET
Sistema Endomembranoso y Sistema Endosomal

COPI

CLATRINA

COPII

cis medial trans

CI TGN

Polarización del Esquematice los Sistemas Endomembranosos que se muestran en

Complejo de Golgi las siguientes microfotografías (MET)

REL

RER

C. GOLGI
RUTA DE SECRECIÓN REGULADA Y CONSTITUTIVA

Proteína recién
sintetizadas para su Lípidos de membrana
secreción recién sintetizados
constitutiva Secreción
constitutiv
Fusión de
membrana a
no regulada Membrana
Proteína de membrana plasmática
recién sintetizados

Señal de tipo
TGN hormonal o
neurotransmisor

Transducció
n de señal
Secreción
Regulada
Fusión de
Vesícula de membran
Complejo de a regulada
secreción
Golgi

Acino pancréatico
1: Células centroacinares
a: Hematoxilina-Eosina x400
b:Azul de metileno-azur x400 Diagrama de la célula acinar pancréatica,
de Bloom and Fawcett, 1972

Radioactividad de leucina-H3 medida

como gránulos bajo el MET, en función
del tiempo. (De J.D. Castle et al.)
 Las vesículas secretoras empaquetan y descargan cúmulos
concentrados de proteínas.

Complete la siguiente figura con las diferentes etapas de una vía de secreción.
 BIOENERGETICA: MITOCONDRIAS

La respiración celular es una reacción exergónica, donde parte de la

energía contenida en las moléculas de alimento es utilizada por la célula para sintetizar
ATP.
 NUCLEO Y MITOSIS

2 Núcleo (MET)

3 Poro nuclear

4 Esquema del complejo del poro

5 6
Nucleólo Reticular Nucleólo Segregado
(Célula madura) (Célula envejecida)
7
8
Brazo corto p

Brazo largo q

10 11

12
INTRODUCCIÓN:

Es un proceso secuencial muy ordenado, que en la mayoría de las células tanto animales
como vegetales es más o menos rápido, pero esta rapidez puede ser variada ante
cambios ambientales (temperatura), o bien agregando algunas sustancias químicas
(colchicina), que producen alteración del aparato mitótico.
Durante la mitosis los cromosomas que están laxamente espiralizados al final del período
S y G2, experimentan un proceso gradual de acortamiento y condensación, cambios que
indican el inicio de la mitosis. Este proceso es continuo y secuencial y se ha dividido en 4
etapas: Profase, Metafase, Anafase y Telofase. El máximo acortamiento de los
cromosomas ocurre en la Metafase (Fig. 1), es en esta etapa donde se pueden visualizar
claramente los cromosomas.
La mitosis da como resultado la formación de dos núcleos hijos, cada uno de los cuales
lleva una información génetica contenida en los cromosomas, semejante a la de la célula
original. Para los organismos unicelulares, la mitosis significa reproducción, en cambio,
para los organismos pluricelulares, significa crecimiento, desarrollo y/o reparación de
tejidos dañados o destruídos.

ACTIVIDADES:

1. Usted recibirá una preparación, en la cual se ha realizado un aplastado de raicilla de

cebolla.
2. En este preparado deberá ubicar etapas de la Mitosis con la ayuda de las imágenes que
se observan tanto en la Fig.1 como en la Fig. 2. Además de ayudarse con la hoja de las
claves para la identificación de las diferentes etapas de este proceso..
3. Deberá observar y dibujar los diferentes estados que encuentre en su preparado,
indicando a que etapa de la Mitosis se refiere.
Fig. 1

Fig. 2
CLAVE PARA LA IDENTIFICACION DE ESTADOS MITOTICOS

I.- Cromosomas no visibles (II)

A.- célula de tamaño normal INTERFASE
B.- dos células ocupando el mismo espacio en una
célula normal
CELULAS HIJAS
II.- Cromosomas visibles.
A.- la membrana nuclear visible ( B )

1) núcleo visible PROFASE INICIAL

2) dos núcleos visibles TELOFASE FINAL

B.- la membrana nuclear no visible

1) Un conjunto de cromosomas visibles ( 2 )
a.- cromosomas esparcidos por el huso PROFASE FINAL
b.- cromosomas dispuestos en línea
recta en el centro del huso METAFASE

2) dos conjuntos de cromosomas visibles unidos por el centrómero

( cromátidas)
a.- dos conjuntos levemente separados
(cromosomas hijos) ANAFASE INICIAL
b.- dos conjuntos completamente separados
b’.- aún individualizables ANAFASE FINAL
b”.- no individualizables TELOFASE FINAL
 Preparado:
Tinción :

Aumento Aumento

Preparado:
Tinción :

Aumento Aumento

Observaciones:
 TRABAJO PRÁCTICO N
TITULO

INTEGRANTE

DESCRIPCION A MICROSCOPIA OPTICA

PREPARADO

TINCION AUMENTO

INTERPRETACION DE LA MICRIFOTOGRAFIA

Pegar Fotografía.

Leyenda más interpretación de simbología.