Protocolo Tipificación EBV (EBNA3C)

Semi Nested
Primer Round

X1

Buffer 2,5ul

MgCL 0,75ul

dNTPs 2ul

Primer FW 1,25ul

Primer RV 1,25ul

Taq 0,2ul

Agua 14,05ul

ADN 3ul

Primers:

EBNA3Cfwd 5´-AGAAGGGGAGCGTGTGTTGT-3´

EBNA3C-AS: 5’ -AGCAGTAGCTTGGGAACACC-3’

Condiciones de ciclado:

5’ a 94°C

45” a 94°C

1’ a 55°C 40 ciclos

1’30” a 72°C

7’ a 72°C
Segundo round

X1

Buffer 2,5 ul

MgCL 0,75 ul

dNTPs 2ul

Primer FW 1,25ul

Primer RV 1,25 ul

Taq 0,125ul

Agua 14,125ul

Producto del 1° round 3ul

Primers:

EBNA3Cfwd 5´-AGAAGGGGAGCGTGTGTTGT-3´

EBNA3Crev 5´-GGCTCGTTTTTGACGTCGGC-3´

Condiciones de ciclado:

5’ a 94°C

45” a 94°C

1’ a 55°C 40 ciclos

45” a 72°C

7’ a 72°C