Materia: Agresión y defensa

Fecha: 28/11/2021

Tema: tinción de gram

 Tinción de gram

Introducción:

Una de las características más importante de las bacterias es su morfología, definida por el tamaño,
la forma, el arreglo y la estructura. Existen bacterias en forma redondeada denominadas cocos, en
forma cilíndrica, denominadas bacilos y una tercera morfología como son las que tienen forma de
espirales, denominadas espirilos. A su vez cada categoría puede subclasificarse con base a diferentes
arreglos.

Estas características pueden determinarse examinando muestras al microscopio. Las células no

teñidas son prácticamente transparentes, pero pueden observarse al microscopio de luz haciendo
preparaciones entre lámina y laminilla o con microscopios especiales como, por ejemplo: de
contraste de fases o de campo oscuro.

Cuando se dispone de un microscopio de luz, se pueden teñir las bacterias para facilitar su
visualización. Si se tiñe una muestra del cultivo extendida y fijada en una lámina portaobjeto con un
colorante dado, las células adquirirán el color del colorante añadido y podrá observarse la forma,
tamaño y el arreglo de las mismas. Este tipo de coloración se conoce con el nombre de coloración
simple. Metodología:

Una tinción simple se fundamenta en la afinidad que va a tener la pared bacteriana por un colorante.
Es una técnica de decantación en la que se hace uso de los puentes de tinción, en los que se colocan
los portaobjetos con las preparaciones secas y fijadas

Objetivos

Comprender la base teórica y química de los procedimientos de tinción diferencial

Comprender la base química de la tinción de Gram

Comprender el procedimiento para diferenciar entre dos grupos principales de bacterias: Gram
positivas y Gram negativas

Pasos

• Recoger la muestra de bacterias a estudio mediante un isopo (bastón estéril de algodón).

• Extender dicha muestra sobre un portaobjetos y dejarla secar.
• Fijar la muestra mediante un alcohol (metanol).
• Aplicar el tinte de violeta de genciana sobre el portaobjetos y esperar un minuto.
• Enjuagar la muestra con agua y aplicar un fijador del violeta de genciana (lugol). El lugol y
el violeta de genciana forman un complejo insoluble en agua capaz de penetrar en la
pared de las células bacterianas.
• Lavar de nuevo el portaobjetos con una mezcla de alcohol y acetona durante unos
segundos.
 • Opcionalmente se puede añadir una tinción de safranina o fucsina para distinguir las gram
negativas que aparecerán bajo el microscopio (en lugar de incoloras) con un tono rosado o
rojo. Lavar con agua.
• Ya se puede observar la muestra al microscopio donde se visualizarán de color violeta las
gram positivas y de color rosa-rojizo las gram negativas.

Resultado

Conclusión

Concluimos esta práctica ya que pudimos identificar cuáles eran las bacterias Gram
positivas y Gram negativas mediante las practica de tinción, todo esto nos ayudó a comprender el
porqué de los diferentes tipos de tinciones cambia debido a que su pared celular, en el caso de la
bacteria Gram positiva el tono es un color azul o morado que se da debido a que la pared celular es
más gruesa, en el caso de la Gram negativa es rojo o rosa de igual forma a su pared celular que en
este caso solo cambia en su grosor siendo menor. La función del proceso es colorear las bacterias
Gram positivas y Gramnegativas, cuya técnica comúnmente es solicitada por médicos para los
pacientes enfermos y así conocer el tipo de bacteria que contraen

Material de uso

Microscopio óptico

Portaobjetos

Cubreobjetos

Asa de siembra

Triángulo de porcelana

Cubeta de tinción Pinzas

Frasco lavador

Mechero de alcohol.