UNIVERSIDAD DE LA AMAZONIA

MINISTERIO DE EDUCACIÓN NACIONAL

NIT:891.190.346-1

FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS

PROGRAMA DE BIOLOGIA

BIOLOGÍA GENERAL

PRACTICAS DE LABORATORIO
MICROSCOPIA

1. INTRODUCCIÓN
El microscopio es una herramienta que permite observar objetos, que son
demasiado pequeños para ser observados a simple vista. El tipo más común y
el primero que fue inventado es el microscopio óptico. Se trata de un
instrumento que contiene dos lentes que permiten obtener una imagen
aumentada del objeto y que funciona por refracción.

2. OBJETIVOS
- Estudiar los principios ópticos y propiedades del microscopio.
- Conocer y ejercitar el correcto uso del microscopio.
- Determinar el diámetro del campo óptico.

3. MATERIALES
- Biológicos: tierra de diatomeas, alas de una mosca o una abeja
- Equipo: Microscopio
- Vidriería: portaobjetos, laminillas
- Reactivos: aceite de inmersión

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- Otros: block de papel blanco, papel milimetrado, lápiz, gotero, papel

periódico (impreso), trozo de tela de colores, tijeras, gotero, papel
absorbente, papel para lentes (papel de arroz).

4. METODOLOGÍA

Antes de iniciar la práctica tenga en cuenta lo siguiente para un correcto uso

del microscopio:

- Transporte el microscopio con ambas manos, una en el brazo del aparato, y

la otra sosteniendo la base y en posición derecha.
- Descargue suavemente el microscopio sobre la mesa.
- Revise el instrumento y reporte cualquier irregularidad al auxiliar o al
profesor.
- Use papel de arroz para limpiar las lentes del microscopio.
- Si usa el objetivo de inmersión debe limpiarlo antes de guardar el
microscopio.
- El porta objeto siempre debe permanecer seco en la parte inferior para
evitar daños por fricción al desplazarlo con el carro.
- Regule a la menor intensidad luminosa cuando deje de observar por el
microscopio por un periodo largo de tiempo o antes de apagarlo. Cuando la
practica finalice o no se vaya a usar más el aparato, déjelo enfriar antes de
guardarlo.
- El cable de conexión debe siempre enrollarse alrededor del tubo y nunca
por la parte inferior del mismo para evitar desajustes en el diafragma y
condensador.
- Evitar que el lente del objetivo entre en contacto con la laminilla, al ser
desplazado con el tornillo macrométrico.

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- Realizar el enfoque inicial con el objetivo de menor aumento, para evitar el

desgaste innecesario de la cremallera y el tornillo micrométrico.

4.1 PARTES DEL MICROSCOPIO.

OCULAR: Lente situada cerca del ojo del observador. Amplía la imagen del objetivo.
OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparación. Amplía la imagen de ésta.
CONDENSADOR: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparación.
DIAFRAGMA: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador.
SOPORTE: Mantiene la parte óptica. Tiene dos partes: el pie o base y el brazo.
PLATINA: Lugar donde se deposita la preparación.
CABEZAL: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser monocular,
binocular,
REVÓLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar, cambiar
los objetivos.
TORNILLOS DE ENFOQUE: Macrométrico que aproxima el enfoque y micrométrico
que consigue el enfoque correcto.

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4.1.1 Enfoque visual a menor aumento (10x)

Gire el revólver y coloque el objetivo de menor aumento (10x) en el eje óptico
frente a la abertura de la platina a una distancia aprox. de 2 cm. Mire a través
de los oculares y gire el tornillo macrométrico acercando lentamente la platina
hacia el objetivo. Observe el campo óptico como una luna llena. Acerque o
separe los tubos de las lentes oculares para graduar a su distancia interpupilar.

Coloque el objeto a observar en montaje húmedo (letra de imprenta) sobre la

platina en el centro de la abertura. Escoja la letra i. Proceda a enfocar la
imagen girando el tornillo macrométrico alejando la platina del objetivo hasta
lograr una primera imagen. Gire ahora suavemente el tornillo micrométrico
hasta que observe la imagen nítida. Con este aumento regule la intensidad
luminosa, tenga en cuenta como afecta la observación del micro preparado.

4.2 Enfoque visual a mayor aumento (40x):

Pase al objetivo de mayor aumento, gire suavemente el revólver. Si la lente
tropieza con la preparación (no para focales), levante el objetivo con el tornillo
macrométrico y proceda como en el caso anterior, acerque el objetivo a la
preparación; coloque el objetivo a menos de 1 mm de distancia de la
preparación. Observe por fuera y no a través del ocular, ahora enfoque la
imagen con la ayuda del tornillo micrométrico. Aleje siempre el objetivo de la
preparación.

Realice el mismo procedimiento utilizando el trozo de tela o hilo, un cabello, el

ala de cualquier insecto y la tierra de diatomeas, de la siguiente manera:

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Visible al ojo 10X 40X

4.3 Enfoque visual con el objetivo de inmersión (100x):

Enfoque con el objetivo de menor aumento. Una vez obtenida la imagen nítida,
coloque una gota de aceite de inmersión sobre la laminilla ( si la preparación es
un extendido fijado al calor, coloque la gota de aceite directamente sobre la
lámina) y pase al objetivo de inmersión. La distancia de trabajo es menor y se
requiere de mayor intensidad lumínica.

4.4 Determinación del diámetro del campo óptico():

Para medir objetos microscópicos existen métodos de micro medición por
medio del ocular micrométrico, que sirven de escala de referencia, en la cual
sea calibrado el valor de una división con la ayuda de un objetivo micrométrico.

Determinación del diámetro del campo óptico a menor aumento (10x).

Realice un montaje húmedo de un área aproximado de medio cm 2 de papel

milimetrado o utilice el micro preparado. Observe con el objetivo de mayor
aumento y determine el diámetro de campo óptico. Generalmente oscila entre
un milímetro y fracción de mm hasta 2 mm. Una vez obtenido el diámetro en
mm realice la conversión a micrones (m).

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Ejemplo:  10x = 1.300 m

Determinación del diámetro del campo óptico a mayor aumento (40x):

Con el objetivo de mayor aumento repita el procedimiento anterior, en caso de
que se imposibilite la lectura, realice el cálculo de la siguiente manera:

 10x = 1.300 m entonces  40x = 1.300 x 10/ 40 = 325 m

Indique el diámetro del campo estimado para cada aumento en su microscopio:

Magnificación Diámetro del campo (mm)

_____3.2X __________
_____10X __________
_____40X __________

Ahora con los anteriores datos, determine la longitud de la letra i, incluyendo el

punto y el diámetro de éste. Expréselo en mm y micras. Haga lo mismo para
determinar el diámetro de un cabello suyo.

Nota: Tenga en cuenta que cada esquema debe ir acompañado con el nombre
del objeto, el tipo de montaje (húmedo o coloreado), el aumento en el que se
encuentra y una breve descripción de los montajes. Finalmente compare los
resultados y saque sus propias conclusiones. Por ejemplo, usted cree que cada
una de las propiedades del microscopio se cumplieron a través de la práctica,
¿será que tiene alguna utilidad conocer el microscopio?

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5. CUESTIONARIO
- ¿Por qué es importante conocer el tamaño de un organismo microscópico?
Calcule el tamaño de un organismo en micrones con base en los siguientes
datos, diámetro de campo () en 10x = 1.5 mm, el organismo ocupa la mitad
del diámetro del campo con el objetivo de 40x
- ¿El microscopio a su disposición es para focal? Explique su respuesta.
- ¿Qué otro tipo de microscopios existen aparte del que conoció en esta
práctica?
- Haga un dibujo del microscopio manejado y señale sus partes.
- Consulte que es la tierra de diatomeas.

6. BIBLIOGRAFÍA
ALEXANDER, P., et.al. 1987. Biología. Prentice Hall. E.U.
BERNSTEIN, R. & BERNSTEIN, S. 1998. Biología. McGraw Hill. 10ª. Edición.
GUNSTREAM, S. 1997. Biological explorations. A Human Approach. 3a. Ed.
Prentice Hall. E. U.
MANUAL DE LABORATORIO. Curso “Biología Celular”. Universidad Nacional
de Colombia. Sede Bogotá. 2001.
SERWAY, 1998. R. Física. McGraw-Hill. México

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