FASE 4.

CONTEXTUALIZACIÓN DE LA BIOTECNOLOGÍA MODERNA

Presentado por

Diego Segundo Deossa Vasquez

Código: 71388011

Presentado a

NATALIA MARCELA QUINTERO

Tutora

Grupo:

211619_9

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD

INGENIERÍA DE ALIMENTOS

MEDELLÍN

2021
Indice; Actividad Individual
1) Hacer lectura del cap 9 desde la pag 149,162 Actividades; Muñoz,
M. A. (2012). Biotecnología (pp. 149-162). Bernal, Argentina:
Editorial de la Universidad Nacional de Quilmes. Retrieved from
https://elibronet.bibliotecavirtual.unad.edu.co/es/ereader/unad/77
596?page=150
2) Buscar dos artículos con una técnica de biología molecular y el
resumen de los mismos.
3) Elegir un compuesto bioactivo obtenido mediante técnicas
biotecnoligicas.
4) Consolidar documento individual.
1) El nacimiento de la biotecnología Moderna;
La manipulación genética, clonación genética, modificación genética,
nueva genética o otros nombres. Empezó hace mas de 25 años,
estudiando la acción de las bacterias y su acción como agentes
mutágenos, igual que bacterias, virus en las estructuras, sus
proteínas y como influían en sus características genéticas.
Se dieron cuenta que se pueda ejecutar en cualquier ser vivo, sea
planta, animal y por tanto también en humanos. Para unos bueno y
para otros, un tema contradictorio. Es una tecnología llamada ADN
recombinante (Proceso que ocurre normalmente en el cambio celular
meiosis). Con el uso de diferentes técnicas, el objetivo de cada
proceso, identificar la fracción de ADN con la característica deseada,
se corta, se duplica o potencia y luego se transfieren esos genes a
otra especie, dando una nueva especie, un nuevo genoma.
Se han usado prototipos débiles y en medios aislados, para evitar
daños graves al mundo donde vivimos. Sus inicios Paul berg con su
estudio de plasmídicos y cohen y boyero con la enzima de restricción
EcoRI, quienes unieron fuerzas. (Muñoz 2013)
Hoy dia, se dice que no hay registro de peligros en esta clase de
procesos, sin embargo, hay consecuencias ocultas que no salen a la
luz y se quedan en los laboratorios. Y Hoy día, que se infectan
vacunas con ADN recombinante, que dicen ser profundamente
probadas, han causado muerte, casos de neurosis, taquicardia,
esterilidad, entre otras consecuencias secundarias. También
sabemos sobre las consecuencias de consumir productos
transgénicos, que aunque no podemos culpar del todo a estos del
cáncer, se sabe que ocasiona trasmutación celular también en los
consumidores. ¿Es verdad que están libre de peligro consumir
alimentos transgénicos? (James. Philip 2000) Sin embargo, también
està el lado bueno, cuando amplificar un beneficio o cualidad de un
producto, hace sea mas nutritivo, comercia, estable y con
características organolépticas mas aceptables sin causar
consecuencias secundarias en el consumidor. Creo que serán temas
que cada día estarán mas a nuestra mesa para ser debatidos y
estudiados con mente abierta.
María Antonia Muñoz de Malajovich. (2013). Biotecnología (2a. ed.).
Editorial de la Universidad Nacional de Quilmes. https://elibro-
net.bibliotecavirtual.unad.edu.co/es/ereader/unad/77596?page=150
2) Hacer la búsqueda de dos artículos que describa al menos
una técnica de biología molecular y construir un resumen
de cada artículo de almenos 300 palabras;
Describir;
Fundamento y aplicaciones de la técnica de biología molecular
identificada.
Introducción;
El objetivo es ser capaces mediante algunas técnicas recombinar el
ADN y Entre las alternativas diagnósticas propuestas a estos retos, se
describen técnicas como la reacción de cadena de polimerasa,
hibridación de sondas de ADN, secuenciación de genomas, 
secuenciación paralela, también conocida como masiva o de nueva
generación (NGS), pirosecuenciación, Polimorfismo amplificado
aleatorio ADN (RAPD) y Polimorfismo de Longitud de Fragmento de
Restricción (RFLP) (Merchan, torres,días,2017), encontrar cambios
que sean positivos en la producción alimentaria.

Artìculo 1)
Era Biotecnológica: Usos y Aplicaciones de la Biología
Molecular en la Tecnología de Alimentos
El objetivo general es control en productos industriales. Para darnos
cuenta si son productos originales o copias bajo etiquetas falsas. Se
evaluaron dos productos; yogurt y pescado estudiando algunas
variaciones fenotípicas, que se exhiben dependiendo de los
organismos. Ya que cada organismo, tiene una etiqueta, gracias a su
ADN.
La forma de chequeo es amplificando el ácido nucleico mediante una
reacción de polimerasa (PCR) en la cual se pueden detectar
variaciones entre especies, acoplando la reacción (PCR RFLP).
Fragmentos de restricción de longitud polimórfica
De forma alternativa, se estudian los genomas bacterianos (ERIC PCR
y REP PCR). (reacción en cadena de la polimerasa), están basadas en
la amplificación de las secuencias de ADN a través de la PCR, usando
cebadores específicos para cada tipo de secuencia. El polimorfismo
detectado resulta de la variabilidad en la repetición de dichas
secuencias y de la distancia entre copias contiguas, causadas por
inserciones o deleciones del ADN. Usando estas secuencias ha sido
posible, discriminar serotipos estrechamente relacionados de la
misma especie, y grupos de cepas no relacionadas clonal mente, ya
que poseen un gran poder discriminatorio. (Canelo, Rómulo, Ernesto,
Patrón de clonalidad mediante Eric PCR Y REP PCR, 2018)
Estudiando la cepa bifidobacterium spp, Se evalúan dos tipos de
yogurt de la misma casa comercial, evaluando 30 colonias, 60 en
total lo que evidencia la presencia de genero spp y lactis. Controles
para corroborar la existencia de estos productos probióticos y la
calidad de las cepas utilizadas en Venezuela.
En cuanto a la estandarización del atún;(Thunnus spp, T alalunga,
albacares, k pelamis) estos al igual que el salmón tienen un alto valor
comercial. Por cuanto a veces se usan unos 17 tipos de pescado que
tienen características parecidas, pero no son atún. (fraude). Se usa
entonces detergentes iónicos y fenol/ cloroformo en atún real en
varias presentaciones y se evalúa por (PCR RFLP) Ampliando el gen
que codifica para el citocromo b y diferentes enzimas de restricción,
siendo este el método más adecuado para la inspección de este
alimento.
PEREZ, AGUILAR, TAPIA, BARRERO Y ALONSO ,2012. Era
Biotecnológica: Usos y Aplicaciones de la Biología Molecular en la
Tecnología de Alimentos
https://www.researchgate.net/profile/Guillermina-
Alonso/publication/235990787_Era_Biotecnologica_Usos_y_Aplicacio
nes_de_la_Biologia_Molecular_en_la_Tecnologia_de_Alimentos/links/
00b4951545f48e659a000000/Era-Biotecnologica-Usos-y-
Aplicaciones-de-la-Biologia-Molecular-en-la-Tecnologia-de-
Alimentos.pdf
Rubio I, Martin E, Domingo D, López M, Larrañaga E. Extended
spectrum beta-lactamase producing bacteria in a tertiary care
hospital in Madrid: characterology, risk factors and antimicrobial
susceptibility patterns. Emerg Health Threats J. 2012;5(1):1–6.
[ Links] Disponible en: http://dx.doi.org/10.3402/ehtj.v5i0.11589
Segundo artículo;
Biología sintética en la obtención de compuestos de interés
para la industria alimentaria;
La biología sintética; Estudia los sistemas complejos, cuyo
fundamento biológico es para algún proceso, entonces se crean
procesos nuevos o mejorados según lo estudiado. No todos los
organismos tienen la capacidad para realizar modificaciones, pero se
toma en cuenta que califique con la transformación del compuesto de
interés. Las bases, son fragmentos de ADN codificantes, (Biobricks)
Que, introducidos en otros organismos, modificando su genoma podrá
producir un mejor compuesto o limitar una ruta metabólica. Asi que
cada ruta de transcripción se evalúa e igual los transcriptos.
Algunas técnicas usadas;
Ensamble secuencial; Trata de alinear y mezclar una gran cantidad de
pedazos de ADN generando la secuencia de interés.
Golden Gate;
Permite ensamble de muchos fragmentos de ADN en una sola
reacción. Su base es el uso de enzimas de restricción ISS como Bsal
con ADN Ligasa. Se obtiene una eficiencia alta en clonación.

Gibson; Con este método unimos pedazos largos de ADN. Usa

enzimas t4 Nucleasas, polimerasa de fusión y TaqADN ligasa) a estos
se le añaden extremos en la secuencia(overhangs) para lo cual se usa
PCR entre biobricks.

Triple A( I gem)
Se usa para clasificación de unidades funcionales básicas de material
genético. Promover sitios de unión a ribosomas, secuenciar proteínas,
terminadores etc. Se inserta en liquido plásmido EcoRi, spel o xbal y
pstI
Crispr; Agrupación de repeticiones palindrómicas regularmente
intercaladas. Modifica genes de manera específica.
ARNm Sintético;
Tiene secuencia complementaria de un micro ARN target y este
aporta proteínas apoptóticas. Es ARN complementario y reconocido
por complejo silenciador inducido ARN RSC
Producción de compuestos de interés en la industria;
Producción de enzimas usadas para solubilidad, emulsión, actividad
antioxidante, digestibilidad etc. Y Se puede usar saccharomyces
cervisae para producir proteínas recombinantes de forma heteróloga.
La amilasa digiere almidón crudo, uso de lipasas sintéticas usando
levaduras como saborizantes en lácteos, bebidas, carnes, puede
producirse proteasas para ablandamiento de carnes, grupo lab.
Entonces el objetivo principal de este, es que es posible producir
cepas nuevas para producir proteínas, enzimas y productos
metabólicos de interés industrial. Por ejemplo, mutación en lab, en
bacterias acido lácticas, clonar genes de fresa, enzima alcohólica acil
transferasa y (FaNES) linalool nerolidol sintasa, Sabor a fresa sabor a
mango.

3) Elegir el compuesto bioactivo que puede ser obtenido mediante

técnicas biotecnológicas.
Diego Segundo Deossa Vásquez, acido glutámico. (L glutamato)
juega un papel importante en la palatabilidad y la aceptabilidad de los
alimentos. ... El GLU así liberado es responsable de conferir el gusto
particular sabroso o delicioso de estos alimentos conocido como gusto
umami.

Elegir compuesto acido glutámico.

bioactivo;
Enunciarlo en el foro Listo
Construir ficha
técnica
Actividad biológica Es un aminoácido, fuente de energía, aditivo
que presenta para el gusto umami(sabroso), potenciación
de memoria a largo plazo, debido al estímulo
hedónico crea adicción en la dieta
(Resaltador de sabor)
Se añade a los alimentos, entre 0.1 y 0.8%.
Además, su función como nutriente,
maduración intestina.
Existen dos rutas;
1. Oxalacetato+ L-Glutamato L-aspartato
+ α-cetoglutarato (1) GOT o AST
(Aspartato amino transferasa)
2. L-glutamato + Piruvato « α-
cetoglutarato + L-alanina (2) GPT o
ALT(Alaninoaminotransferasa)
En las neuronas glutamatérgicas;
producen despolarización de la membrana
postsináptica excitatoria. El glutamato es
descarboxilado por las enzimas
gad(gad65/67)
metodología para la Por medio de las corynebacterias; la
obtención del Corynebacterium glutamicum, bacilos gran
compuesto bioactivo positivos, pleomofricos, no ramificados, no
esporulados, catalasa positivos, oxidasa
negativos. Este requiere biotina, carecen de
actividad de la enzima alfa cetoglutarato
deshidrogenasa y un alta de glutamato
deshidrogenasa. Asi que la excreción del
exceso de aminoácido depende de la
permeabilidad celular. El contenido de
fosfolípidos en las membranas celulares
impide la excepción del ácido glutámico.
Lo que significa es que este bacilo tiene un
bloqueo genético a la alfa cetoglutarato
deshidrogenasa.
Este puede producir hasta el 50 a 60% de
fuente carbonato en acido glutámico.
Hidrólisis acida; Se hidroliza el raquis del
aceite de palpa para usarlos como sustrato
del Hidrólisis glutamicum, para la obtención
de L glutámico. Para esto se añade H2SO4
Concentración. 2%,4% y 6% una relación de
1/30(peso seco/v de ácido). Se deja por 4,6,
8horas.Los hidrolizados se filtran con carbón
activado y guardan en frascos ámbar,
refrigerados. Se usa luego el método Miller,
los azucares reductores se cuantifican patrón
de glucosa 4g/l y acido 3.5dinitrosalicilico.
Luego se usa la cepa bacteriana Hidrólisis
Glutamicum ATCC 13032

Se activación; la bacteria con 1ml de caldo

(Oxoid Cm 0001 Anex b) Se agita, diluye
formando 9ml de caldo madre.
Se echan 60%de glicerol+40% de caldo
nutritivo y añade 5 alícuotas de 500micro
litros.
 Fermentación;
Se tomaron 50ml a temperatura 35 a 37ºc
por 48 horas.
En un Erlenmeyer 250ml, con dos entradas
en tubo, uno para añadir NH4OH25%
Solución neutralizante.
Nota; Se uso como fuente de hidrógeno
(NH4)2 SO4

Recuperación y purificación;
Con un pH de 9.5 adicionando NAOH, Luego
se centrifuga 10.000rpm por 10 min
separando material, luego se acidifica con
HCL 4N Hasta el punto iso eléctrico (691
metrohm) Se concentra a 70ºC El material
hasta 1/5 parte, formando cristales, los
cuales se ahislan por filtración. Luego estos
se secan a 60ºC y estos se pesan para
evaluar el rendimiento.
estructura química
del compuesto y
características del
mismo tales como
solubilidad,
estabilidad a
diferentes
condiciones
(temperatura, pH,
cargas iónicas,
solvente, etc.)
características Estimula el gusto umami en alimentos. Por
nutricionales o eso se usan para mejorar el sabor en
sensoriales alimentos. Activan la fosfolipasa que hidroliza
fosfolípidos de las membranas. Lo que facilita
la liberación de calcio.
 Desde la nutrición; Determina la selección de
los alimentos, presencia de sodio. Los
preceptores también indican presencia de
azucares, carbohidratos simples y
compuestos, favoreciendo la asimilación.
normatividad que se 1. El Glutamato monosódico L- es un aditivo
deba considerar alimentario utilizado como acentuador de
para el uso de este sabor,
tipo de compuestos que en la actualidad no cuenta con
e identificar si el disposiciones regulatorias en Colombia,
compuesto se usa razón por la cual
actualmente para la para su autorización de uso se tienen en
formulación de cuentas los estudios toxicológicos de los
alimentos principales
referentes sanitarios en el mundo.
2. En la norma general de aditivos
alimentarios del Codex Alimentarius Codex
Stan 192-1995,
la autorización de uso para el Glutamato
Monosódico identificado con el SIN 621 y sus
derivados (SIN: 622, 623, 624 y 625), es
amplia en diferentes categorías de alimentos,
principalmente por buenas prácticas de
fabricación1
, para lo cual el aditivo debe cumplir con:
• “La cantidad de aditivo añadido al alimento
se limitará al nivel más bajo posible
necesario para alcanzar el efecto deseado;
• La cantidad de aditivo que se convierte en
un componente del alimento como
resultado de su utilización en la fabricación,
elaboración o envasado del alimento
y que no está destinada a lograr un efecto
físico o técnico en el propio alimento
debe ser tan reducida como sea
razonablemente posible; y
• El aditivo se debe preparar y manipular de
la misma forma que un ingrediente
alimentario” (minsalud 2021)
La Food and Drug Administration (FDA) de
los Estados Unidos, también permite el uso
del
glutamato monosódico y se encuentra
incluido en la lista de sustancias
generalmente
reconocidas como seguras para el consumo
humano (GRAS)
Conclusiones;
La modificación genética, ha ido avanzando con los años, hasta
convertirse hoy día una herramienta cotidiana para evaluar
alimentos, producir alimentos de forma mas eficiente, y también
aportando bondades nutricionales a los mismos. Modificando el
genoma con características de otros productos, como también
haciendo mas eficiente las características a tanto animales como
plantas. No obstante, es un tema de continua revisión. La
modificación del adn es, detección de fracción de interés, y un medio
que corte y sea posible el ensamble de este en la célula deseada. Por
lo tanto tenemos un mundo por investigar y aprovechar.
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Tecnología de Alimentos
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