INTRODUCCIÓN

La infección por Virus de Inmunodeficiencia Humana (VIH) tipo 1 o tipo 2, se

caracteriza por el deterioro progresivo del sistema inmune y clínicamente por
una infección asintomática o poco sintomática durante un período variable de
hasta alrededor de 8 años (actualmente se considera de 10 años), debido al
equilibrio entre la replicación viral y la respuesta inmunológica del paciente.
Posteriormente se rompe este equilibrio aumentando la carga viral y
deteriorándose la función inmune, lo que permite la aparición de diversas
infecciones, clásicas y oportunistas, y tumores con lo que se llega a la etapa de
SIDA

A medida que el cuerpo combate el VIH, el sistema inmunológico desarrolla

anticuerpos contra el virus. La prueba de anticuerpos contra el VIH no mide ni
detecta al virus, pero sí detecta la reacción del cuerpo contra el virus (la
presencia de anticuerpos anti-VIH). Existen tres análisis de anticuerpos que se
usan comúnmente para realizar el diagnóstico: ELISA, Western Blot e IFA.

ELISA
La prueba de ELISA (también llamada EIA) generalmente es la primera prueba
que se hace; no es cara y es muy sensible para detectar la presencia de
anticuerpos anti-VIH. En la mayoría de los casos se analiza una muestra de
sangre, pero existen otros tipos de ELISA que analizan saliva y orina. La
prueba de ELISA tarda de 3.5 a 4 horas en dar resultados, pero la mayoría de
los sitios de prueba envían la muestras a un laboratorio que las analiza en
camadas y por lo tanto hay que esperar de una a dos semanas para obtener
los resultados.

Después del «período ventana» rara vez las pruebas de ELISA dan resultados

«negativos falsos». Ésto significa que si obtiene un resultado negativo y se hizo
la prueba al menos seis meses después de la última exposición al virus, usted
es realmente VIH negativo. Rara vez la prueba ELISA puede dar resultados
«positivos falsos». Un resultado positivo falso puede ocurrir si la persona se
hace la prueba justo después de haber tenido una estimulación temporal del
sistema inmunológico, debido a una infección viral o a una vacunación.
También pueden ocurrir debido a errores del laboratorio o debido a la alta
sensibilidad de la prueba (ver a continuación).
Por este motivo, los resultados positivos a la prueba de ELISA siempre deben
ser confirmados con una prueba de Western Blot o IFA. En los sitios serios de
diagnóstico ésto se hace automáticamente, lo que quiere decir que no tiene
que volver a dar sangre.

Existe una prueba relativamente nueva llamada «detuned» ELISA, que se

viene usando en el área de investigación y que pronto estará ampliamente
disponible. La prueba «detuned», que se usa sólo después de que se confirmó
la presencia de anticuerpos mediante una prueba Western Blot, puede
determinar si la infección es reciente (dentro de los últimos seis meses), lo que
puede contribuir a tomar decisiones sobre tratamiento temprano.
Ensayo Western Blot (WB)
El Western Blot (WB) es un método confirmatorio: sólo se hace si el ELISA
resulta positiva. El WB puede dar un resultado positivo, negativo
o indeterminado. Los resultados indeterminados no son positivos ni negativos.
Un resultado indeterminado generalmente significa que una persona recién
comienza la conversión serológica en el momento en que se le hace la prueba.
En los raros casos en que esto sucede, deberá volver a hacerse la prueba un
mes después. Los resultados positivos falsos son extremadamente raros, lo
que confirma (demuestra) que los anticuerpos contra el VIH están presentes.
Ensayo por inmunofluorescencia indirecta (IFA)
El ensayo por inmunofluorescencia indirecta (IFA, siglas en inglés) se puede
usar en lugar de la prueba WB para confirmar los resultados de la prueba
ELISA. Al igual que WB, la prueba IFA detecta la presencia de anticuerpos en
una muestra de sangre. La estrategia es diferente ya que utiliza un
microscopio. Puede ser más rápida que la prueba WB, y los laboratorios
pueden entregar los resultados al paciente con mayor rapide

PROCEDIMIENTO

RESULTADOS
PRUEBA INDIRECTA
 Abs. M+= 2.792

Abs M- = 0.284

Abs M1 = 0.070

Abs M2 = 2.833

Abs M3 = 2.848

Western blot M1 Prueba directa M3

NEGATIVO (-) POSITIVO (+)

El resultado de las pruebas indican que el ensayo se encuentra en buen estado
porque los contrales están funcionando correctamente por lo que los resultados
de las pruebas son validos mostrando en ellas 2 positivas y el primero positivo
confirmándose son el ensayo de western blot y la prueba directa par HIV

DISCUSIÓN
De acuerdo a los resultados la muestra 2 tendría un problema sin embargo este
es identificado con las pruebas directas que confirman su positividad. Los virus
de la inmunodeficiencia humana (HIV-1 y HIV-2) son los agentes causales del
Síndrome de la Inmunodeficiencia Adquirida (SIDA). Estos retrovirus son
transmitidos por la exposición a ciertos fluidos corporales infectados,
principalmente secreciones genitales y sangre o productos contaminados
derivados de la sangre y por pasaje a través de la placenta. La evidencia
serológica de la infección por HIV-1 y HIV-2 puede ser obtenida determinando
la presencia de antígenos y anticuerpos en el suero de individuos en los que se
sospecha que tienen la infección. Los antígenos pueden generalmente ser
detectados en la fase aguda y durante la fase sintomática de la enfermedad.
Los anticuerpos pueden ser detectados a lo largo de toda la infección,
comenzando en la fase aguda o inmediatamente después de ella. Por ello es
de fundamental importancia la utilización de una determinación de alta
sensibilidad que pueda detectar antígenos y anticuerpos.
Los pocillos de la policubeta están recubiertos con proteínas recombinantes y
péptidos sintéticos de HIV-1 (gp41) y HIV-2 (gp36) y anticuerpos monoclonales
anti-p24(*). La muestra se incuba en los pocillos, si la misma contiene antígeno
p24 y/o anticuerpos contra HIV-1 o HIV-2 se unirán a los antígenos y/o
anticuerpos del pocillo. El material no unido es removido por lavado. En el paso
siguiente se agrega el Conjugado 1 que contiene anticuerpos y antígenos
marcados con biotina que se unirán a los antígenos/anticuerpos si están
presentes en la muestra. Luego se agrega el Conjugado 2 (peroxidasa
conjugada a estreptavidina) que se unirá al Conjugado 1. El conjugado no
unido se remueve por lavado. A continuación se agrega una solución
conteniendo tetrametilbencidina (TMB) y peróxido de hidrógeno. Las muestras
reactivas desarrollan color azul que vira al amarillo cuando la reacción se
detiene con ácido sulfúrico (Stopper)
CONCLUSIÓN
El resultado de las pruebas indican que el ensayo se encuentra en buen estado
porque los contrales están funcionando correctamente por lo que los resultados
de las pruebas son validos mostrando en ellas 2 positivas y el primero positivo
BIBLIOGRAFIA