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3) https://www.labclinics.

com/2019/07/22/seis-trucos-para-evitar-la-contaminacion-de-una-pcr/

La sensibilidad de la PCR contribuye a amplificar ADN de muestras útiles para cualquier


investigador, por esto es de suma importancia tener cuidado para evitar contaminación con otras
fuentes de material genético presentes en el entorno y que conlleven a obtener resultados con
secuencias incorrectas.

Una de las principales recomendaciones es la distribución del laboratorio, se recomienda designar


salas específicas para la preparación, adición y análisis de PCR; así como también distribuir los
instrumentos y materiales de forma correcta en cada sala.

El flujo de trabajo debe ser unidireccional. Una vez finalizada la amplificación de ADN se debe
evitar el movimiento hacia las diferentes secciones y los materiales (batas, guantes, gafas
protectoras, etc.) deberán estar duplicados en casa sección para evitar posibles contaminaciones.

Una técnica de pipeteo es fundamental para el rendimiento y la calidad de resultados, las técnicas
correctas minimizan la contaminación entre muestras. Es relevante evitar las salpicaduras durante
la apertura de tubos y placas. Se recomienda centrifugar los viales antes de ser abiertos, para
evitar aerosoles que puedan contener ADN en el medio.

Entre otras recomendaciones se encuentra el cambio frecuente de guantes, limpieza en las


superficies de trabajo, utilizar kits de extracción de ácidos nucleicos e incluir controles positivos
(para asegurar el que el proceso de extracción y amplificación funcionan correctamente) y
controles negativos (para verificar la ausencia de contaminación en los reactivos, los consumibles y
el medio ambiente) en los protocolos.

4) espectrofotometría, fluorimetría, HIBRIDACIÓN CON SONDA (DOT-BLOT Y SLOT-BLOT),


cuantificación enzimática https://eprints.ucm.es/id/eprint/4594/1/T26242.pdf

5) NANODROP: https://www.idipaz.es/ficheros/files/Que%20es/2015/NANODROP(2).pdf

Este equipo permite realizar medidas de espectrofotometría en un amplio rango de longitudes de


onda (220-750 nm) con gran exactitud y reproducibilidad, sin necesidad de emplear cubetas. Tan
sólo requiere un volumen de muestra de 1-2 μl y gracias a su pequeño tamaño y fácil manejo
permite medir un gran número de muestras en poco tiempo.

Su funcionamiento se basa en el empleo de un sistema de retención de muestra que aprovecha la


tensión superficial para formar un puente de líquido entre el pedestal inferior y un pedestal
superior. En los espectrofotómetros NanoDrop el pedestal superior es el extremo de una fibra
óptica conectada a una fuente de emisión de Xenon. Ambos pedestales definen un preciso y
estrecho paso óptico cuya longitud varía automáticamente con la concentración de la muestra,
permitiendo hacer mediciones en un rango muy amplio de concentraciones sin hacer diluciones.
Esta característica lo hace idóneo para determinar la concentración y pureza de los ácidos
nucleicos

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