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SERVICIO DE SALUD
SGC HJNC AD LAB D Nº 001
ARICA Y PARINACOTA Fecha Ultima Revisión: Diciembre 2011
HOSPITAL EN REGIONAL
“DR. JUAN NOE CREVANI” Próxima Revisión: Diciembre 2013
CR APOYO DIAGNOSTICO
SCR LABORATORIO CLINICO Versión 1

MANUAL TOMA DE MUESTRA BACTERIOLOGICA


SCR LABORATORIO CLINICO

ARICA, DICIEMBRE 2011


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BACTERIOLOGICA
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INDICE

Página
Introducción 3

Procedimiento toma muestra 4

Información general 6

Transporte muestra 7

Instructivo toma muestra 8

Muestra orina: Urocultivo 9

Muestra Hemocultivos 11

Muestra deposición: Coprocultivo 13

Secreción rectal 14

Muestra Tracto Respiratorio Superior 15

Muestra Tracto Respiratorio Inferior 17

Muestra Tracto Genital Femenino 20

Secreción Uretral 22

Muestra Directa Flujo Vaginal y Uretral 23

Muestra Herida y Ulceras 24

Muestra Líquidos Cavidades Cerradas 26

Muestra Secreción Ótica 27

Muestra Secreción Ocular 28

Toma muestras Virales 29

Muestra Anaerobias 29

Anexos 31

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INTRODUCCION

Dada la importancia vital y clave que juega el Laboratorio Clínico en el diagnóstico


de la medicina moderna y enmarcado en la gestión de calidad que adopte dicha UNIDAD,
EL Jefe de Laboratorio abajo firmante y el equipo de Tecnólogos Médicos de la sección
Bacteriología, se complacen en proporcionar la presente actualización del Manual de
Toma Muestras Bacteriológicas.

Dentro de la Calidad de un resultado bacteriológico, es muy importante considerar


la etapa pre-analítica de él, por lo tanto este Manual tiene como objetivo principal
minimizar al máximo el error en la toma de la muestra, ya que es imposible conseguir
un buen resultado desde una muestra deficiente

TM. LIC. RICARDO ZEPEDA BARRIOS


JEFE LABORATORIO CLINICO

ARICA, DICIEMBRE 2011

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PROCEDIMIENTO TOMA MUESTRA

1. OBJETIVO: Obtener muestras de buena calidad con el propósito de contribuir en la


eficiencia diagnóstica para apoyar y orientar al médico clínico en el tratamiento del
paciente.

2. CAMPO DE APLICACIÓN:A todas las muestras para diagnóstico bacteriológico.

3. FUNDAMENTO: No aplica.

4. REFERENCIA: Nch 2547 of 2003 “Requisitos particulares para la calidad y


competencia de Laboratorios Clínicos” (etapa Pre-analítica. Cap. 5.4).

5. TERMINOLOGIA:
Estudio Microbiológico: Comprende examen directo, cultivo y en aquellos
agentes etiológicos que se justifica el antibiograma
Cultivo: Es el crecimiento in Vitro de bacterias en medios de cultivos líquidos y
sólidos, lo que permite el aislamiento del agente etiológico y su identificación
posterior
Cary Blair: Medio de transporte para deposición (tubo tapa roja)
Stuart: Medio de transporte para estudio de bacterias aerobias en todo tipo de
muestras (tubo tapa azul)
Thayer Martin: Medio de cultivo selectivo para Neisserias patógenas
UFC : unidad formadora de colonias.

6. DESARROLLO: El Centro de Responsabilidad (CR) de Laboratorio Clínico entregará


a todos los CR Clínicos, de Especialidades, Servicio de Atención Primaria (Sermus) y
Gendarmería:
Medios de transporte Stuart
Medios de transporte Cary Blair
Medios de transporte para anaerobios Portagerm
Tubos cónicos individuales tapa rosca estériles
Frascos estériles de 60 ml.
Frascos de hemocultivos adultos, pediátricos y neonatales.

Todas las muestras que lleguen al Servicio de Laboratorio Clínico deben ser tomadas
según Instructivos del Manual de toma muestra.
Las muestras deben venir debidamente rotulada y su orden de solicitud de
examen con todos los datos que el Servicio de Laboratorio solicite: nombre
completo, servicio. Edad, fecha de nacimiento, carné de identidad, diagnóstico,
tipo de muestra, fecha de obtención de la muestra

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Las muestras deben entregarse en recepción de 8.00 hrs. AM a 9,30 hrs. AM

7. REGISTROS:
Formulario solicitud de examen
Registro de persona responsable de la toma de muestra e indicaciones al
paciente

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INFORMACION GENERAL

UBICACIÓN DEL LABORATORIO Hospital Regional de Arica “Dr. Juan Noé Crevani”
Sección Bacteriología
18 Septiembre 1000
Primer piso Teléfonos 204618 (19)
584618 (19)

HORARIO DE RECEPCION DE MUESTRAS Y ENTREGA DE RESULTADOS

1.- Servicios Clínicos

Lunes a Viernes 8:00 a 16:00 hrs.


Sábado, Domingo 9:00 a 12:00 hrs
y Festivo

Fuera de estos horarios, las muestras que no sean tomadas en medios de transporte se
recibirán en el Laboratorio de Urgencia y las muestras que sean tomadas en medio de
transporte quedarán en el Servicio que lo solicita y se traerá al día siguiente al Servicio
Laboratorio Clínico (lunes a domingo)

2.-CONSULTORIOS DE ESPECIALIDADES, SERMUS, INSTITUCIONES

Lunes a Jueves 8:00 a 10:00 hrs.


13:30 a 14:30 hrs. Servicio UNACESS.

PLAZO ENTREGA DE RESULTADO EXAMENES

Urocultivos 24 horas si es negativo y 48 a 72 horas si es positivo


Cultivos en general: 48 a 72 horas
Hemocultivos: Información positivo: en el momento que aparezca la
positividad.
Información final a los 5 días de incubación
Coprocultivos: 48 a 72 horas
Anaerobios: 7 días

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TRANSPORTE DE MUESTRAS

OBJETIVO: Proteger la muestra, a la persona que la transporta, a la que la recibe y al


medio ambiente

MATERIALES:
Contenedor plástico
Refrigerantes

DESARROLLO:

Tomada la muestra debe ser enviada de inmediato, ya que 1 a 2 horas de retraso en la


siembra favorece la pérdida de viabilidad de los patógenos más fastidiosos.
Las muestras de orinas debe mantenerse REFRIGERADA a 4°C hasta su traslado, si su
traslado no es posible de inmediato.
Las muestras con medio de transporte deben permanecer a temperatura ambiente. Hasta
su traslado al laboratorio. Plazo máximo 24 horas.

Las muestras bacteriológicas deben venir en contenedor plástico o metálico que


sea de tamaño apropiado para colocar los tubos de las muestras especialmente si
éstas son líquidas.
Esta gradilla o contenedor se colocará dentro de una caja plástica de tapa
hermética. Llevar al Laboratorio con su respectiva orden.
Las muestras de orinas asépticas, se transportarán en contenedor plástico con
refrigerantes

Muestras de orinas tomadas en la Sección Toma de muestra del CAE:(sólo niños(as)


menores de 10 años)

 Condiciones del lugar


Debe contar con baño, insumos para higienización de manos, ducha teléfono para
lavado genital en niños, camilla pediátrica.
La Técnico Paramédico encargada de la toma de muestra de orinas a menores de
10 años, debe colocar la muestra en un contenedor plástico que tenga
refrigerantes.
Tomará las muestras a todos los menores citados en el día.
Debe efectuarse higienización de manos entre cada paciente

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Cuando estén tomadas todas las muestras, debe llamar a la Técnico Paramédico
de la Sección Bacteriología para trasladar las muestras al Servicio de Laboratorio
Clínico con su orden respectiva.

INSTRUCTIVO TOMA MUESTRA BACTERIOLOGICAS


OBJETIVO:

Obtener una muestra no contaminada, para aislar agentes etiológicos de una probable
infección, a fin de apoyar al médico clínico en la confirmación diagnóstica y orientar el uso
racional de antimicrobiano cuando se decide indicar terapia

RESPONSABILIDADES:

Responsable de la indicación: Médico tratante, de turno o residente.


Matronas pueden solicitar urocultivos, cultivo endocervical y cultivos de flujo vaginal.
Baciloscopías pueden ser solicitadas por cualquier miembro del equipo de salud

Responsable de ejecutar el procedimiento de la toma muestra: Enfermera,


Matrona, Técnico paramédico de los CR, de CAE y Extra sistema, según la presente
normativa

Responsabilidad del encargado Tecnólogo Médico de la Sección Bacteriología:


revisar calidad de la muestra, y efectuar todo el proceso para llegar a diagnóstico
bacteriológico y efectuar las modificaciones a este manual cuando corresponda.

Responsable del monitoreo y evaluación Tecnólogo Médico encargado de


Calidades responsable de efectuar monitoreo de los indicadores. Oficina de Calidad
es responsable de supervisar el cumplimiento del monitoreo.

PROTECCIÓN DEL PERSONAL

El personal que transporta muestras microbiológicas debe manipularlas siempre con


guantes de procedimiento y transportarlas en envase hermético, según lo indicado en
puntos anteriores
Debe evitar el contacto de las muestras con el medio ambiente mientras realiza el
traslado.
Los envases se esterilizan y se desechan en laboratorio.

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MUESTRA DE ORINA: UROCULTIVOS

Responsable de tomar la muestra: Enfermera, Matrona. En CAE, TPM

Tipo de técnica: limpia

MATERIALES:
Tórulas de algodón para aseo y jabón.
Toalla de papel.
Guantes de procedimiento.
Bolsa de polietileno para desecho.
Envase plástico estéril con tapa rosca.
Una chata.
Frascos estériles
Recolector pediátrico de orina.

DESARROLLO:
Explicar lo que se le va a hacer al paciente.
Acostar al paciente decúbito dorsal y piernas flectadas y separadas.
Lavarse las manos.
Colocarse los guantes de procedimiento.
Realizar aseo perineal prolijo, separando los labios con técnica de arrastre desde
arriba hacia abajo en los pacientes mujeres y retrayendo el prepucio hacia atrás en
los hombres. Se usa una tórula cada vez.
Repetir esta técnica las veces que sea necesario. Elimine las tórulas en las bolsas
de polietileno.
Enjuague con agua corriente.
Hacer orinar al paciente en la chata, eliminar el primer chorro y en la mitad de la
micción recibir la orina en el envase plástico estéril, mínimo 10 ml.
Cerrar el envase evitando contacto con los dedos, genitales externos o ropas.
Rotular la muestra con nombre completo, servicio, tipo muestra y su orden
correspondiente.
Lavarse las manos
Enviar al laboratorio.

Con el objeto de no alterar el recuento bacteriano la muestra debe ser sembrada


dentro de las primeras dos horas de tomada. Por lo tanto si no es enviada de
inmediato al Laboratorio, ésta debe mantenerse refrigerada a 4º C y ser trasladada a esta

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temperatura (con cadena de frío). En estas condiciones puede mantenerse hasta 24


horas.

Toma de muestra orina a lactantes:


Realice aseo prolijo como se describió anteriormente
Seque con tórulas estériles la zona pubiana.
Coloque recolector de orina pediátrico.
Si el paciente en media hora NO ha orinado, cambiar el recolector.
Recolecte la orina, sellar, rotular con nombre completo, servicio, tipo muestra, hora
de la toma de muestra y orden correspondiente.
Envíe al laboratorio.

Catéter urinario permanente:


En lo posible el catéter debe estar recientemente instalado previo a la toma de muestra,
ya que estos se colonizan a las 48 horas siendo los microorganismos aislados no
necesariamente el agente causal de la infección. Se debe registrar en la orden de examen
que la muestra fue tomada a través del catéter.
Desinfecte el sitio de punción en tercio proximal del catéter urinario permanente,
puncionar en un ángulo de 30º, aspirar muestra con Técnica Aséptica
Vaciar3 a 5 ml en un tubo o frasco estéril y transportarla en la misma forma que la
muestra miccional.
No se debe obtener la muestra de la bolsa recolectora ni cultivar los catéteres
urinarios.

Muestra por punción suprapúbica:


Este procedimiento lo realiza el médico pediatra, procedimiento con técnica aséptica. Es
el método de referencia en el diagnóstico de infección urinaria, dado que evita la
contaminación con flora uretral .Es un método invasor, por lo que se utiliza sólo en casos
en que las técnicas de rutina han fracasado.
Desinfectar la piel en el sitio de punción, aspirar con Técnica Aséptica entre 3 a 5 ml de
orina y ponerlos en frasco estéril.

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MUESTRA PARA HEMOCULTIVOS

RECOMENDACIONES GENERALES:

El momento de la toma de muestra dependerá del cuadro clínico que se quiera confirmar.
Se recomienda tomar las muestras antes de iniciar el tratamiento antibiótico.
La técnica debe ser practicada por personal entrenado, previo lavado clínico de manos y
antisepsia de la piel con alcohol 70%.

FACTORES CRÍTICOS EN EL RENDIMIENTO:

1. Volumen de sangre
2. Método de desinfección de la piel
3. Número de muestras
4. Momento de la toma de la muestra

MOMENTO DE LA TOMA DE MUESTRA:

En bacteremias permanentes En cualquier momento


Bacteremia intermitente o sepsis de *Antes o durante los escalofríos.
origen extravascular * Rama ascendente de la curva febril
Tomar la muestra lo más alejada de
Si el paciente está con antibiótico la última dosis de tratamiento
antibiótico.
Bacteremias asociadas al uso de catéteres: tomar muestra en vena periférica
Si se toma a través del catéter o se envía a cultivo la punta del catéter, siempre
deben ir pareadas con otra muestra de vena periférica, por la colonización de
los catéteres presente a las 48 h de instalado.

MATERIALES:

Frascos de hemocultivo de 30 ml.= adultos.


20 ml = pediátrico y neonatal.
Antisépticos.
Tórulas de algodón.
Jeringas.
Agujas estériles.

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Jabón antiséptico.
Guantes de procedimiento.
Alcohol 70%.
Ligadura de goma.

Volumen de la muestra:
Adultos : 5 a 10 ml de sangre (30ml de caldo).
Pediátrico y neonatal: 1 a 3 ml de sangre (20ml de caldo).

Cantidad de muestras a tomar:


2 muestras de sangre tomadas en intervalos de 1/2 hora .de diferentes sitio
anatómico
En endocarditis infecciosa tomar 6 muestras de sangre de diferentes sitios de
punción
Con relación a los intervalos no existe consenso, sin embargo se recomienda 30
minutos entre cada extracción y en lo posible extraer de diferentes sitios
anatómicos.
Se recomienda mantener una proporción sangre/caldo de cultivo de 1/10, que
permite neutralizar las propiedades bactericidas de la sangre y de los agentes
antimicrobianos que puedan estar presentes en la muestra.

DESARROLLO:

PREPARACIÓN DE LA PIEL:

Técnico Paramédico: Lavado clínico de manos. Uso de guantes de procedimiento

El Técnico paramédico prepara la piel del paciente


Lava el área de punción elegida con agua y jabón
Enjuaga con agua estéril y seca con apósito estéril.
Frota la zona en forma concéntrica comenzando por el centro, con alcohol al 70%
durante 30 seg. Repetir la operación con Clorhexidina y dejar actuar hasta que se
seque
Desinfecta la tapa del frasco de hemocultivo con alcohol

Enfermera Clínica: Higienización de manos con clorhexidina alcohólica. Si no cuenta con


ella: lavado con jabón antiséptico
Ponerse guantes estériles.
Seleccionar la vena periférica de más fácil acceso al paciente.

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Punciona la vena
Aspira el volumen indicado.
Retira la jeringa y presiona con tórula estéril y coloca un sello estéril.
Retira con pinza la aguja de la jeringa y coloca una aguja nueva.
Inocula directamente a través de la tapa de goma del frasco de hemocultivo.
Mezcla con movimientos rotatorios suaves el frasco de hemocultivo.
Rotula con nombre completo, servicio, hora, tipo muestra y orden correspondiente
en la etiqueta del frasco. Cuidar de no tapar el código de barra.
Envía al laboratorio en forma inmediata. Estos exámenes se reciben en forma
continua en el laboratorio.
NO REFRIGERAR.

MUESTRA DE DEPOSICION: COPROCULTIVO

Técnica limpia

MATERIALES:
Tubo estéril con medio de transporte Carry Blair.
Guantes de procedimiento.

DESARROLLO:
Explique lo que se le va a hacer al paciente.
Acueste al paciente en posición SIMS.
Lávese las manos.
Colóquese los guantes de procedimiento.
Abra los glúteos del paciente e introduzca la tórula estéril en el canal anal unos 3
cm.
Rote la tórula suavemente. Repita con una segunda tórula.
Cuando la deposición es líquida, debe obtenerse mediante sonda rectal,
empleando una sonda nelatón fina con jeringa. Tomar de 1 a 5 ml. de deposición.
Introduzca cuidadosamente la muestra en Cary Blair
Retírese los guantes y lávese las manos
Rotule la muestra con el nombre completo, servicio, tipo de muestra.
Envíe al laboratorio con la orden correspondiente.

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SECRECION RECTAL
Técnica limpia

MATERIALES:
Guantes procedimiento
Tórula estéril
Tubo con medio de cultivo Stuart

DESARROLLO:
Explique lo que se le va a hacer al paciente.
Acueste al paciente en posición SIMS.
Lávese las manos.
Colóquese los guantes de procedimiento.
Abra los glúteos del paciente e introduzca la tórula estéril en el canal anal unos 3
cm.
Rote la tórula dejándola unos segundos para mejor absorción de los
microorganismos
Retire la tórula, girándola por las paredes del canal anal.
Introduzca cuidadosamente la muestra Cary Blair
Retírese los guantes y lávese las manos
Rotule la muestra con el nombre completo, servicio, hora, tipo de muestra y su
orden.
Envíe al laboratorio.

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MUESTRA TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR

MATERIALES:
Tubo estéril con medio de transporte con tórula individual incluida en el envase
estéril
Toalla de papel
Baja lengua
Fuente de luz artificial

DESARROLLO

 SECRECION FARINGEA Y AMIGDALAS

Técnica limpia

Lávese las manos.


Explique al paciente lo que se le va hacer.
Coloque toalla de papel en los hombros del paciente.
Lávese las manos póngase guantes de procedimiento, mascarilla y protección
ocular.
Pídale al paciente que abra la boca para visualizar faringe. Si fuese necesario
utilice luz artificial.
Presione la lengua con el baja lengua, evitando estimular el reflejo de nauseas del
paciente.
Abra el envase del medio de transporte y retirar la tórula.
Frote la tórula por la amígdalas, pilares anteriores y pared posterior de la faringe
tocando cualquier exudado visible (movimiento circular envolvente)
Evite tocar la lengua, úvula o las paredes interna de la boca.
Introduzca la tórula cuidadosamente en el tubo con transporte Stuart (tapa azul)
Deseche baja lengua.
Retírese los guantes y lávese las manos.
Retire toalla de papel del paciente.
Retírese y deseche la mascarilla, retire la protección ocular y deseche o envíe a
limpieza según corresponda.
Rotule la muestra con el nombre completo del paciente, servicio, tipo de muestra
y orden solicitud examen.
Envíe la muestra al Laboratorio Central.
Lávese las manos una vez finalizada la toma de la muestra.

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Para investigar Corynebacteriundifterieae, tomar dos muestras con tórula


estéril, utilizando baja lengua ,pasando la tórula por el borde de la pseudo
membrana

 SECRECION NASAL:

Técnica limpia

Lávese las manos.


Coloque toalla de papel en los hombros del paciente.
Explique al paciente lo que se le va hacer.
Lávese las manos y póngase guantes de procedimiento
Incline levemente la cabeza del paciente hacia atrás
Levante la punta de la nariz.
Introduzca la tórula humedecida con suero fisiológico a la fosa nasal
Rote la tórula estéril humedecida con solución salina
Introduzca cuidadosamente la tórula en el tubo con medio de transporte Stuart
(tapa azul)
Retirarse guantes y lavarse las manos
Retire la toalla de papel del paciente
Rotule la muestra con el nombre completo del paciente, servicio, tipo de
Muestra y orden solicitud de examen
Envíe la muestra al Laboratorio Central
Lávese las manos una vez finalizada la toma de muestra
La secreción nasal no es representativa de una infección sinusal, para ello debe
tomarse muestra de los senos paranasales
Senos paranasales: La muestra debe ser obtenida por médico especialista. Se
punciona en forma aséptica con jeringa a nivel de la cavidad paranasal
Enviar muestra al Laboratorio en la misma jeringa, ya que es importante el estudio
anaerobio.

 SECRECION NASOFARINGEA

El estudio portación nasofaringe, sólo se justifica en casos de


1. Brotes epidemiológicos de IIH cuando se sospecha que el reservorio del
agente causal del brote se encuentra en esta localización.
2. Estudio viral

DESARROLLO
Deprima la lengua con baja lengua
Con tórula estéril humedecida con solución salina, tomar la muestra por detrás de
la úvula, en la porción nasal de la faringe
Introduzca cuidadosamente la muestra en el tubo con medio de transporte Stuart
(tapa azul)

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Deseche baja lengua. Retire toalla de papel del paciente


Rotule la muestra con el nombre completo del paciente, servicio, tipo de muestra
y orden solicitud de examen
Envíe muestra al Laboratorio Central
Lávese las manos una vez finalizada la toma de la muestra

 MUESTRA TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR

MATERIALES:

Equipo de aseo para cavidad bucal


Toalla de papel
Mascarilla
Guantes de procedimiento.
Tubo estéril sin medio de transporte
Frasco estéril boca ancha y tapa rosca (frasco de urocultivo)
Equipo estéril de punción

DESARROLLO:

EXPECTORACIÓN

La muestra de expectoración debe ser tomada antes de iniciar tratamiento de


antibióticos
Se debe tomar en ayunas o en horas alejadas de las comidas
La toma de muestra debe ser supervisada por profesional responsable. La muestra
salival no sirve.
Es recomendable facilitar la expectoración con kinesioterapia y drenaje postural.
Una muestra adecuada se caracteriza por contener un mínimo de células
epiteliales ( < de 10 x campo) y un número significativo de
polimorfonucleares ( > de 25 x campo)
La muestra podrá ser tomada entre los 8.00 y 16 horas y debe enviarse de
inmediato. Plazo máximo 1 hora.
En el Laboratorio debe verificarse la buena calidad de la muestra mediante la
observación al fresco de la porción más purulenta. Se considerará apropiado si
están presentes más de 25 PMN por campo

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El profesional o Técnico Paramédico encargado de la toma de muestra:

Explica al paciente lo que se le va hacer


Se lava las manos y se pone mascarilla y guantes de procedimiento
Sienta al paciente
Retira prótesis dentaria si hubiese
Le pide al paciente que se lave los dientes, lengua y paladar
Que realiza colutorios con agua, para limpiar bien la cavidad oral
Le pide al paciente que tosa y elimine una muestra de expectoración en el envase
estéril conservando la asepsia
Rotula la muestra con nombre completo, servicio, hora , tipo de muestra y su
orden.
Envía al Laboratorio
Se lava las manos una vez finalizada la toma de muestra

 SECRECION BRONQUIAL

El profesional encargado de la toma de muestra es la Enfermera clínica


responsable del paciente.
La muestra debe ser recibida en el tubo que viene en el equipo de aspiración
bronquial(tapa blanca)
Rotula la muestra con nombre completo, servicio, tipo de muestra y su orden
Envía al Laboratorio
Se lava las manos una vez finalizada la toma de muestra

 ASPIRADO ENDOTRAQUEAL

Es una técnica de muy baja especificidad ( 0 – 30 %) y de alta sensibilidad ( 60- 90%), por
lo cual , los resultados negativos en pacientes que no han recibido antimicrobianos
previos, permiten descartar la posibilidad de NAVM

El encargado de la toma de muestra es la enfermera


La muestra debe ser recibida en el tubo que viene en el equipo de aspiración (tapa
blanca)
Se rotula la muestra con nombre completo, servicio, tipo de muestra y su orden.
Se envía al Laboratorio
Se lava las manos una vez finalizada la toma de muestra

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 ASPIRADO ENDOTRAQUEAL CUANTITATIVO (A.E.T.): se indica esta técnica a


todo paciente con sospecha de Neumonía asociada a ventilación mecánica (conexión
mayor a 48 hrs y presencia de criterios clínicos radiológicos) y en el cual no se hayan
efectuado cambios de tratamiento antimicrobiano en las últimas 72 hrs.

TÉCNICA
Se utiliza un catéter de aspiración introducido por el tubo endotraqueal y se conecta el
otro extremo del catéter a un colector o trampa estéril apropiada .El procedimiento
debe ser realizado con técnica aséptica y por un profesional entrenado. El catéter
debe ser introducido hasta encontrar resistencia. No se debe diluir la muestra con el
fin de facilitar su recolección .Si las secreciones son espesas se debe aspirar en forma
intermitente.

INTERPRETACIÓN
La aplicación de un recuento > a 106 ufc./ml , permite una sensibilidad razonable y
una especificidad significativa. Valores iguales o superiores a este recuento se
asocian a NAVM en aproximadamente el 80% de los casos.

MUESTRAS INVASIVAS
Son las más específicas en el diagnóstico etiológico de las NEUMONIAS
NOSOCOMIALES. Tienen la desventaja de requerir médico especialista para la
realización del procedimiento.

LAVADO BRONCOALVEOLAR (LBA) POR BRONCOSCOPÍA: método que permite


obtener un lavado del compartimiento alveolar. Se debe instilar entre 100-200 ml de
solución salina. La sensibilidad en promedio es de 69% y la especificidad 88 %. El
nivel de corte considerado positivo es de 104ufc/ml .Realizar el procedimiento a través
de broncoscopía y con técnica aséptica, recuperar entre 15 a 50 ml del lavado en un
tubo o frasco estéril. Transportarlas de inmediato al laboratorio para su estudio.

BIOPSIA PULMONAR: El estudio histopatológico del pulmón es considerado el patrón


de referencia para el diagnóstico de NAVM .Por su dificultad técnica no es
considerada para el diagnóstico de NAVM en el inmunocompetente. Se envía un
trocito de tejido en tubo estéril o en medio de transporte con caldo específico,
solicitado previamente al laboratorio, obtenido mediante procedimiento quirúrgico.

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Trasladar la muestra de inmediato .No refrigerar, ni colocar en líquidos preservantes o


fijadores.

Las muestras para estudio de Tuberculosis y otras micobacterias, deben enviarse al


Instituto Nacional del Tórax y las virales (refrigeradas), al ISP.

PUNCIÓN PLEURAL

Son de resolución médica


La enfermera y Técnico Paramédico deben: Preparar en forma física y
psíquica al paciente
Tener colaboración activa en la toma de muestra junto al Médico
Obtener 5-10 ml de muestra por toracocentésis en tubo estéril medio de
transporte (tubo cónico tapa rosca),ó tubo del equipo de aspiración ó en frasco
de urocultivo
Debe enviar la muestra en tubo estéril sin medio de transporte.
Deben rotular la muestra con nombre completo, servicio ,hora, tipo de muestra
y su orden

MUESTRAS SECRECIÓN TRACTO GENITAL FEMENINO


MATERIALES:
Guantes de procedimiento
Espéculo estéril
Tubo con medio de transporte Stuart
Sabanilla desechable
Mascarilla
Tórulas estériles individuales
Pinzas basseman
Receptáculos para desechos
Fuente de luz artificial
Frascos de penicilina con suero fisiológico
Jeringas
Sondas estériles

DESARROLLO:

Explique lo que se le va hacer al paciente.


Reúna el material.

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Acueste a la paciente en mesa ginecológica con sabanilla desechable


Haga aseo genital
El operador debe colocarse pechera desechable, lavarse las manos y colocarse
guantes
Introduzca especulo sin lubricar en la vagina de la paciente

 LOQUIOS: Visualice cuello uterino, límpielo con tórula estériles.


Introduzca la tórula estéril por el cuello del útero hasta llegar a la cavidad
uterina sin tocar pared vaginal. Hacer girar la tórula.
Retire la tórula e introdúzcala en el tubo con medio de transporte Stuart.

 SECRECION VAGINAL: Tome la muestra con tórula estéril de la mucosa vaginal si se


desea investigar “Listeria”.
Para buscar hongos, tricomonas y Gadnerella, introduzca una sonda a través de la
vagina, conectada a una jeringa que contenga 2 ml suero fisiológico. Haga lavado
vaginal, aspire y coloque el producto del lavado en tubo estéril

 SECRECION CERVIX: Ubique cerviz, limpie secreción vaginal y mucus con gasa
esteril. Tome muestra de exudado endocervical, haciendo girar la tórula. Introduzca la
tórula en tubo con medio de cultivo Stuart. Para Chlamydia (Inmunofluorescencia
Directa) ver Anexo 2.

 SECRECION VULVAR: Tome muestra de la lesión con tórulas estériles. Si hubiese


nódulo, irrigar con 0,5 ml. suero fisiológico y aspire con jeringa estéril .Introduzca
muestra en tubo estéril

Retire especulo. Pídale al paciente que se baje de la mesa ginecológica y se vista.


Retire sabanilla desechable
Rotule la muestra con nombre completo, servicio ,tipo de muestra y su orden
Lávese las manos una vez finalizada la toma de muestra
Envíe muestra al Laboratorio

 FONDO DE SACO DE DOUGLAS: Aspire por punción del fondo de saco vaginal
previa desinfección. Envíe en la misma jeringa taponada como para estudio de
anaerobios.

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 CULTIVO ANAEROBIO: Si existe la sospecha de infección anaerobia, sólo se realiza


el estudio en las siguientes muestras: placenta obtenida por cesárea, endometrio
obtenido por cirugía o por aspiración cervical con catéter protegido, aspirado por
punción de fondo de saco de Douglas, tejidos anexiales y aspirado de glándula de
Bartolino

 LIQUIDO AMNIOTIVO Técnica que debe ser realizada por Médico gineco-obtetra:

Por amniocentesis
Aspiración trans cutánea.
Una vez tomada la muestra se introduce en un tubo estéril. Levar al Laboratorio
con orden correspondiente y debidamente rotulada.

 ABSCESOS OVARICOS Y TROMPAS DE FALOPIO: Técnica debe ser realizada por


Médico gineco-obtetra .Una vez tomada la muestra se debe introducir en un tubo
estéril. Lleve al Laboratorio con orden correspondiente y debidamente rotulada.

MUESTRA DE SECRECIÓN URETRAL


MATERIALES:
Guantes de procedimiento
Tubo con medio de transporte Stuart
Vidrio porta-objeto
Placa con medio de cultivo Tayer Martin
Frascos de penicilina con suero fisiológico
Tórula estéril.

DESARROLLO:
Explicar lo que se le va hacer al paciente
Lavarse las manos
Colocarse guantes de procedimiento
Visualizar glande Previo aseo genital, exprimir uretra y recibir la secreción en
tórula estéril, colocar en medio de transporte Stuart. La muestra debe tomarse a
primera hora de la mañana o después de una hora de orinar.
Si la secreción es abundante, tomar la muestra con la tórula estéril
Si la secreción es escasa, introducir una tórula de arginato en la uretra unos dos
centímetros.
Al retirar la tórula, girarla en ambos sentidos.
Si no hay secreción se puede tomar orina de primer chorro

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Introducir cuidadosamente la muestra en medio de transporte Stuart


Rotular la muestra con nombre completo, servicio, hora, tipo de muestra y su
orden
Enviar la muestra al Laboratorio
Retirarse los guantes
Lavarse las manos una vez finalizada la toma de muestra
Para Inmunofluorescencia Directa para Chlamydia ver Anexo 2
En Secreción prostática: Se procede de igual forma que en el caso de muestra
para secreción uretral, previo masaje prostático
Las muestras obtenidas por masaje prostático son responsabilidad del médico
urólogo.
Los pacientes de ETS, la matrona debe tomar la muestra según corresponda y
sembrar la muestra directamente en una placa con medio de cultivo TM. En forma
de Z y poner la (las) placa en un contenedor metálico con vela.
Enviar al Laboratorio

MUESTRA DIRECTA DE FLUJO VAGINAL Y URETRAL

OBJETIVO:
Mantener viabilidad de tricomonas principalmente para obtener un resultado confiable.

MATERIALES:
Tórulas estériles
Frascos con suero fisiológico
Espéculo
Mesa ginecológica

DESARROLLO:
El responsable de la toma muestra es la matrona
Explicar al paciente lo que se le va hacer
Acostar a la paciente en posición ginecológica
Introducir espéculo sin lubricar
Tomar muestra con tórula estéril del fondo de vagina
La tórula con muestra, emulsionarla en el frasco de suero fisiológico.
Eliminar la tórula
Rotular la muestra con nombre completo, servicio, hora, tipo de muestra y su
orden
Enviar la muestra inmediatamente al Laboratorio
Sacarse los guantes y lavarse las manos una vez finalizada la toma de muestra

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MUESTRA DE HERIDAS Y ULCERAS


El diagnóstico de infección es clínico y se basa en la presencia de signos y síntomas en el
sitio de la lesión. El cultivo se solicita solo
1. En la duda del diagnóstico de infección
2. Si se requiere confirmar etiología con fines epidemiológico, especialmente en
pacientes hospitalizados, para definir precauciones o medidas de aislamiento
3. Si el clínico decide que el estado del paciente amerita un tratamiento
antibiótico sistémico

MATERIALES
Suero fisiológico, Ringer o agua destilada
Tubos con medio de transporte Stuart
Frascos con medio de transporte Portagerm para bacterias anaeróbicas

DESARROLLO:
Existen dos tipos de cultivos de heridas, dependiendo del microorganismo a aislar:
Cultivo aerobio
Cultivo anaerobio

TOMA DE MUESTRAS

 Cultivo aerobio superficial:

Se limpia cuidadosamente la herida por arrastre mecánico con suero fisiológico


Ringer o agua destilada
Tome la muestra con tórula estéril, frotando el centro y los bordes internos en
zigzag (tocar 10 puntos de referencia a la superficie)
Rote la tórula al avanzar en zigzag.
Introduzca cuidadosamente la muestra al tubo de medio de transporte Stuart
Rotule la muestra con nombre completo, servicio, tipo de muestra y orden
correspondiente.
Envíe al Laboratorio.

 Cultivo aerobio profundo:

Limpie cuidadosamente la superficie dañada con suero fisiológico estéril


Tome muestra con tórula estéril, de la parte mas profunda de la herida
Introduzca cuidadosamente la muestra en un tubo de medio de transporte Stuart
Rotule la muestra con nombre completo, servicio, tipo de muestra y orden
correspondiente.
Envíe al Laboratorio.

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 Cultivo anaerobio:

Limpie cuidadosamente la superficie dañada con suero fisiológico estéril.


Aspire alrededor de 0,5 ml de secreción de la zona más profunda de la herida, con
jeringa estéril.
Retire jeringa, eliminando las burbujas de aire.
Introduzca cuidadosamente la muestra en el frasco portagerm.
Cambie la aguja de la jeringa, pinchando la goma que cubre el frasco con medio
de cultivo.
Rotule la muestra con nombre completo, servicio, tipo de muestra y orden
correspondiente.
Si no es posible aspirar muestra, introducir la tórula de cultivo en lo más profundo
de la herida y colocarla en un tubo de thioglicolato solicitado al Laboratorio en el
momento de su uso.
De mayor rendimiento es tomar un trocito de tejido (6mm) con pinza estéril en
forma aséptica y dejarlo caer en tubo de thioglicolato.
Envíe muestra al Laboratorio.

 Abscesos cerrados:

Limpie sitio de punción con antiséptico


Aspire secreción con jeringa , en lo posible 10 ml.
Vacié a tubo con medio de transporte Stuart para cultivo aerobio y portagerm para
cultivo anaerobio

Comentario: El pH ácido del pus destruye rápidamente los microorganismos, por lo que
las muestras purulentas deben ser enviadas de inmediato al laboratorio para su siembra.

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MUESTRA DE LIQUIDOS DE CAVIDADES CERRADAS


Liquido cefalorraquídeo, liquido pleural, liquido ascítico, liquido sinovial y liquido
pericardio

MATERIALES:
Equipo de punción.
Alcohol 70%.
Algodón.
Jeringa y aguja estéril.
Tubos estériles tapa rosca.

DESARROLLO.
Estas muestras deben ser tomada por Médico por punción con técnica aséptica
Las muestras deben introducirse en tubos cónicos estériles
Los líquidos pleural, ascítico, sinovial, Pericardio y peritoneal: deben introducirse
en tubo cónico estéril y la otra mitad en frasco de hemocultivo
Rotule con nombre completo, servicio, hora, tipo muestra y orden correspondiente
Envíe al Laboratorio.

 LCR : Es importante la edad del paciente dado que la etiología de la meningitis


depende del grupo etario

Con técnica aséptica, se obtiene la muestra por punción lumbar


Se recolecta el LCR en dos tubos estériles tapa rosca
Si se ha tomado un solo tubo con muestra, el laboratorio de microbiología debe
procesarlo primero
Una vez obtenida la muestra ésta debe ser enviada al laboratorio en
forma rápida para su procesamiento

 LCR de drenaje ventriculares: En sospecha de Ventriculitis (DVE) aspire, en


formaaséptica2 a 3 ml y enviar en la misma jeringa o en tubo estéril de inmediato al
laboratorio. No refrigerar.

 Absceso y biopsia cerebral: Estas muestras se deben obtener por aspiración y se


deben enviar en la misma jeringa o en tubo estéril, en horas de funcionamiento del
laboratorio.

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MUESTRA DE SECRECIÓN ÓTICA

MATERIALES:
Tubo con medio de transporte Stuart (tubo tapa azul)
Ampolla de agua destilada o suero fisiológico.

 OTITIS MEDIA: La muestra óptima es el aspirado timpánico por punción.


No se recomienda obtener la muestra con tórula, ya que la flora del conducto auditivo
externo contamina la muestra y oculta el patógeno causal. Sólo puede usarse este
sistema cuando existe perforación timpánica y fluye pus en forma espontánea

 OTITIS EXTERNA:

Explique al paciente lo que se le va hacer.


Lávese las manos el operador.
Tome el lóbulo de la oreja del paciente, tirándola suavemente hacia fuera, dejando
a la vista el conducto auditivo externo y lávelo con suero fisiológico
Humedezca la tórula con agua destilada o suero fisiológico estéril
Introduzca la tórula humedecida, por el conducto auditivo externo llegando hasta
la cercanía del tímpano
Dirija la tórula en sentido oblicuo, de atrás hacia delante y de abajo hacia arriba
Introduzca cuidadosamente la muestra al tubo de transporte Stuart(tapa azul)
Rotule la muestra con nombre completo, servicio, tipo de muestra y su 0rden.
Envíe al Laboratorio
Lávese las manos una vez finalizada la toma de muestra

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MUESTRA SECRECIÓN OCULAR

MATERIALES
Ampolla de agua destilada estéril o suero fisiológico estéril
Tubo con medio de transporte Stuart

DESARROLLO

La muestra debe ser tomada antes de la aplicación de ungüento tópico.


Debe ser tomada por Profesional y ayudante para inmovilizar la cabeza del paciente
(niño)
Lávese las manos el operador
Explique al paciente o al familiar del paciente lo que se le va hacer
Afirme la cabeza del paciente
Limpie superficie externa del ojo comprometido con suero estéril
Con los dedos pulgar e índice, abrir párpados del paciente
Frote con tórula humedecida con suero fisiológico el borde interno de la conjuntiva
y el extremo interno del párpado superior
Rote la tórula suavemente para que toda la superficie del algodón de la tórula
quede con secreción purulenta.
Introduzca cuidadosamente la muestra al tubo de medio de transporte Stuart (tapa
azul).
Rotule la muestra con nombre completo, servicio, tipo de muestra y su orden
Envíe al Laboratorio.
Lávese las manos una vez finalizada la toma de muestra.

 ULCERAS CORNEALES: La muestra óptima es el raspado corneal y no la secreción


superficial. Debe ser tomada y sembrada por oftalmólogo, en la clínica o sala de
atención del paciente.

Limpie superficie externa del ojo comprometido con suero estéril, frotar con tórula
humedecida el borde interno de la conjuntiva y colocarla en el tubo con medio de
transporte Stuar

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TOMA DE MUESTRA VIRALES. (I F I)


1. Adenovirus.
2. Virus respiratorio sinsicial.
3. Virus parainfluenza.
4. Virus influenza A y B.

Este procedimiento está normado por el ISP, donde deben enviarse las muestras IFI (+) y
por el Servicio de Salud de Antofagasta, donde se envían las muestras IFI (-), según
documento adjunto (Anexo 1).

MUESTRA PARA ANAEROBIO


MATERIALES:
Equipo de toma muestra estéril
Jeringas estériles
Tubo cónico estéril
Frasco con medio de transporte para anaerobio Portagerm.
Guantes estériles

DESARROLLO:

 Muestras que no se deben cultivar en anaerobiosis

Secreciones tracto respiratorio superior


Deposición, excepto para el Cl. Difficile
Secreción tracto genital
Secreciones de la piel

 Muestras que deben sembrarse en anaerobiosis


Material aspirado: pus de absceso, punción transtraqueal, suprapúbica
Tejidos: biopsias, muestras quirúrgicas y autopsias
Líquidos de cavidades cerradas

Las técnicas más usadas para la recolección de material clínico son: Aspiración,
Punciones, Biopsias o incisión quirúrgica
La muestra debe ser realizado por Médicos si fuese quirúrgico
Una vez que elija la técnica, debe tomar la muestra con técnica aséptica

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Elimine aire si hubiese en la jeringa


Introduzca la muestra en tubo de transporte Portagerm ( ver IT)
Lleve al Laboratorio con orden correspondiente y debidamente rotulada

DISTRIBUCIÓN.

 Dirección
 SDAC y sus CR Clínicos dependientes
 SDAA y sus respectivos CR dependientes
 Sección Bacteriología del Laboratorio Clínico
 Asesoría Jurídica
 Of. Calidad y Seguridad del paciente.

MODIFICACIONES

Párrafo que se modifica Página Fecha

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ANEXOS

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ANEXO 1

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ARICA Y PARINACOTA Fecha Ultima Revisión: Diciembre 2011
HOSPITAL EN REGIONAL TOMA MUESTRA
“DR. JUAN NOE CREVANI” Próxima Revisión: Diciembre 2013
BACTERIOLOGICA
CR APOYO DIAGNOSTICO
SCR LABORATORIO CLINICO Versión 1

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ANEXO 2

TOMA DE MUESTRA PARA INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA


(ID) PARA CHLAMYDIA

SECRECION CERVIX
MATERIALES:

Guantes de procedimiento
Espéculo estéril
Sabanilla desechable
Mascarilla
Pinzas basseman
Receptáculos para desechos
Fuente de luz artificial
Jeringas
Gasa estéril
Kit toma de muestra para Chlamydias

DESARROLLO:

El responsable de la toma de muestra es la matrona.

Dado que C. trachomatis infecta específicamente a la células columnares y la


infección es intracelular, las muestras deben ser obtenidas raspando el sitio
apropiado para obtener tantas células como sea posible, luego de haber retirado
cuidadosamente las secreciones mucupurulentas que cubren la mucosa.

Explicar lo que se le va hacer al paciente


Lavarse las manos
Colocarse guantes de procedimiento
Utilizar espéculo sin lubricante.
Ubique el cervix. Limpie la mucosidad presente en el ectocérvix y orificio cervical
con gasa estéril.
Introducir una tórula de algodón o alginato en el canal endocervical, la distancia
suficiente como para que no se observe la punta de algodón.

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Rotar la tórula por unos segundos y luego retirar cuidando de no contaminar con
secreción vaginal.
Una vez tomada la muestra hacer rodar la tórula, aplicando una ligera presión,
dentro del área del pocillo de 6 mm presente en el portaobjeto que viene en el kit
de toma de muestra. Dejar secar la muestra al aire a temperatura ambiente (15 –
30°C) y luego fijar con acetona fresca durante 10 minutos. Secar al aire.
Rotular el contenedor del porta-objeto con nombre completo, servicio y tipo de
muestra y enviar de inmediato al Laboratorio junto a su orden correspondiente

SECRECION URETRAL

MATERIALES:

Guantes de procedimiento
Kit toma de muestra para Chlamydia

DESARROLLO:

Explicar lo que se le va hacer al paciente


Lavarse las manos
Colocarse guantes de procedimiento
Introducir una tórula de arginato en la uretra unos dos centímetros.
Al retirar la tórula , girarla en ambos sentidos.
Una vez tomada la muestra hacer rodar la tórula, aplicando una ligera presión,
dentro del área del pocillo de 6 mm presente en el portaobjeto que viene en el kit
de toma de muestra. Dejar secar la muestra al aire a temperatura ambiente (15 –
30°C) y luego fijar con acetona fresca durante 10 minutos. Secar al aire.
Rotular el contenedor del porta-objeto con nombre completo, servicio y tipo de
muestra y enviar de inmediato al Laboratorio junto a su orden correspondiente
Retirarse los guantes
Lavarse las manos una vez finalizada la toma de muestra.

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