CALCULO GRAFICO DE LOS pKa DE LOS AMINOACIDOS POR MEDIO DE

SU CURVA DE TITULACION

1. Después de obtener el grafico en Excel o en papel milimetrado, se deben

reconocer las zonas buffer del aminoácido. En esta curva de titulación el
aminoácido posee tres zonas buffer, la primera esta entre un pH de 1,5 a 3,4
aproximadamente o de 0 a 4,6 mL de NaOH adicionados. La segunda de 7 a 9
unidades de pH aprox, y la última de 10 a 11 unidades de pH aproximadamente,
siento esta la mas difícil de identificar.

2. Teniendo en cuenta estas zonas hay que trazar dos líneas de tendencia que me
limiten las zonas buffer, estas líneas de tendencia se trazan verticales y
precisamente siguen la tendencia del grafico en donde termina la zona buffer (En
el grafico son las líneas verticales con inclinación que tienen color negro, el
grado de inclinación depende del grado de inclinación que posea el grafico). En
la primera zona buffer el eje Y nos sirve como la línea de tendencia en la parte
izquierda, la de la parte derecha se traza siguiendo los puntos del grafico, tal
como muestra la figura, hay que trazar la línea sobre los puntos del grafico.

13,0
12,5
12,0
11,5
11,0
Zona 3
10,5
10,0
9,5
9,0 Zona 2
8,5
8,0
7,5
7,0
pH

6,5
6,0
5,5
5,0
4,5
4,0
3,5
3,0 Zona 1
2,5
2,0
1,5
1,0
0,5
0,0
0 0 ,5 1 1,5 2 2 ,5 3 3 ,5 4 4 ,5 5 5,5 6 6 ,5 7 7,5 8 8 ,5 9 9 ,5 10 10 ,5 11 11,5 12 12 ,5 13 13 ,5 14

Volumen NaOH 0,1 N (mL)

3. Para encerrar la zona buffer luego se trazan dos líneas horizontales, en el grafico
se encuentran en verde, vamos a tomar como ejemplo la segunda zona buffer del
grafico para realizar la explicación. Estas líneas horizontales deben conectar las
dos líneas de tendencia que limitan la zona buffer (negras). Para trazar la
horizontal inferior debemos observar el punto en el cual la parte superior de la
línea de tendencia que limita la parte izquierda de la zona buffer abandona la
 curva de titulación, en este punto se comienza a trazar la horizontal de izquierda
a derecha.

13,0
12,5
12,0
11,5
11,0
10,5
10,0
9,5
9,0
8,5
8,0
7,5
7,0
pH

6,5
6,0
5,5
5,0
4,5
4,0
3,5
3,0
2,5
2,0
1,5
1,0
0,5
0,0
0 0 ,5 1 1,5 2 2 ,5 3 3 ,5 4 4 ,5 5 5,5 6 6 ,5 7 7,5 8 8 ,5 9 9 ,5 10 10 ,5 11 11,5 12 12 ,5 13 13 ,5 14

Volumen NaOH 0,1 N (mL)

Para trazar la horizontal superior, tomamos en cuenta el mismo principio, debemos ver
en que punto de la parte inferior de la línea de tendencia que limita la parte derecha de
la zona buffer abandona la curva de titulación, en este punto se debe iniciar el trazo de
la horizontal de derecha a izquierda. Al finalizar la zona buffer debe quedar encerrada
en un paralelogramo.

13,0
12,5
12,0
11,5
11,0
10,5
10,0
9,5
9,0
8,5
8,0
7,5
7,0
pH

6,5
6,0
5,5
5,0
4,5
4,0
3,5
3,0
2,5
2,0
1,5
1,0
0,5
0,0
0 0 ,5 1 1,5 2 2 ,5 3 3 ,5 4 4 ,5 5 5,5 6 6 ,5 7 7,5 8 8 ,5 9 9 ,5 10 10 ,5 11 11,5 12 12 ,5 13 13 ,5 14

Volumen NaOH 0,1 N (mL)

 4. Luego deben trazarse dos diagonales que unan vértices opuestos del
paralelogramo (líneas rojas).

13,0
12,5
12,0
11,5
11,0
10,5
10,0
9,5
9,0
8,5
8,0
7,5
7,0
pH

6,5
6,0
5,5
5,0
4,5
4,0
3,5
3,0
2,5
2,0
1,5
1,0
0,5
0,0
0 0 ,5 1 1,5 2 2 ,5 3 3 ,5 4 4 ,5 5 5,5 6 6 ,5 7 7,5 8 8 ,5 9 9 ,5 10 10 ,5 11 11,5 12 12 ,5 13 13 ,5 14

Volumen NaOH 0,1 N (mL)

5. Ahora debemos trazar una perpendicular (Azul) desde el punto de cruce de las
líneas diagonales (rojo), hasta la curva de titulación, esto se realiza si el punto de
cruce no cae sobre la curva, en el caso de este grafico solo se hace para la zona 1
y 2.

13,0
12,5
12,0
11,5
11,0
10,5
10,0
9,5
9,0
8,5
8,0
7,5
7,0
pH

6,5
6,0
5,5
5,0
4,5
4,0
3,5
3,0
2,5
2,0
1,5
1,0
0,5
0,0
0 0 ,5 1 1,5 2 2 ,5 3 3 ,5 4 4 ,5 5 5,5 6 6 ,5 7 7,5 8 8 ,5 9 9 ,5 10 10 ,5 11 11,5 12 12 ,5 13 13 ,5 14

Volumen NaOH 0,1 N (mL)

 6. Finalmente para poder hallar los valores de pKa interpolamos trazando una línea
desde el punto de corte de la perpendicular (azul) en la curva de titulación hasta
el eje Y (pH), esta línea de interpolación se encuentra en color azul y es
discontinua. El valor de pH que señala la línea es el valor de pKa del grupo
funcional ionizable del aminoácido.

13,0
12,5
12,0
11,5 pH 10,3 = pKa
11,0
10,5
10,0
9,5
9,0
8,5
8,0
7,5
7,0 pH 8,00 = pKa
pH

6,5
6,0
5,5
5,0
4,5
4,0
3,5
3,0
2,5
2,0
1,5
1,0
0,5 pH 1,95 = pKa
0,0
0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4 4,5 5 5,5 6 6,5 7 7,5 8 8,5 9 9,5 10 10,5 11 11,5 12 12,5 13 13,5 14

Volumen NaOH 0,1 N (mL)